孔 凌,包清彬,劉 超
(1.成都大帝漢克生物科技有限公司,成都 611130;2.西華大學生物工程學院,成都 610039)
隨著經濟的不斷發展,我國居民飼養寵物的數量大幅增加,發達國家寵物產業已成熟,并形成了一定規模。我國的寵物食品興起于20世紀90年代,發展非常迅速,寵物商店、寵物醫院、寵物美容等與寵物相關的行業也得到了迅速的發展,寵物經濟鏈中的寵物食品行業成為了增長最快的行業之一。雖然我國寵物食品起步較晚,但隨著消費者對寵物食品品質追求越來越重視,不僅要求寵物食品滿足寵物的日常需求,也對適口性更加關注。寵物誘食劑能在一定程度上提高寵物食品的適口性。因此寵物誘食劑的研究也成為寵物食品開發中的一部分。
目前市場上寵物食品多以肉味風味居多。根據現有國內外相關專利,總結可行的研究辦法,試驗通過酶解和美拉德反應相結合的方式,以雞肝及其下腳料進行了肉腥誘食劑的研發[5]。
雞肝及下腳料等(購于農貿市場),木瓜蛋白酶(南寧龐博生物工程有限公司)、谷氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、木糖,葡萄糖,維生素B1(河南金潤食品添加劑有限公司)等。
電子天平,ME203,梅特勒-托利多儀器(上海有限公司);恒溫油浴鍋,HH-S,常州澳華儀器有限公司;組織搗碎機,A88,上海維誠儀器有限公司;水浴鍋,北京中興偉業儀器有限公司;pH計,上海雷磁等;恒溫油浴HH-S,常州澳華儀器有限公司。
1.3.1 酶解工藝
將雞肝及下腳料砍碎后,用絞肉機絞成泥狀,取肉糜100 g,按1∶2加水勻漿,升溫至合適的溫度,調節pH,添加木瓜蛋白酶0.05%后置于水浴中恒溫攪拌,水解時間6 h后,將酶解液置于沸水浴中滅酶30 min[6-8]。
1.3.2 美拉德反應產物的制備方法
稱取肉酶解液、木糖、葡萄糖、半胱氨酸、甘氨酸、維生素B1200 g,加入到反應瓶中混勻,將反應瓶置于油浴中反應一定時間,取出冷卻。
試驗主要以感官作為評價標準,以香氣強度、香氣仿真度等,具體評價方式見表1。

表1 肉腥香感官評價
2.1.1 反應最佳溫度確定
固定反應時間為90 min,pH為6,分別在90、100、110和120℃進行對比試驗[9]。結果見圖1。

圖1 反應溫度對美拉德反應的影響
反應溫度是較重要的因素,隨著溫度的升高,反應速度也會加快,同時在較高的溫度下,可生成許多香味物質。香味物質主要是比較高的溫度下美拉德反應階段產生的,反應溫度最好≤180℃,溫度過高會使反應不易控制形成焦糊味等,溫度過低使反應過慢,風味物質少,達不到理想的風味。由圖1可知,隨著溫度升高,風味先升高后降低,在110℃反應溫度下,腥味和肉味最佳。
2.1.2 反應時間的確定
固定反應溫度為110℃,pH為7,分別反應40、50、60和70 min,試驗結果見圖2。
反應時間對產品的感官性能影響明顯,在確定pH、反應溫度條件下,當時間>60 min時,產品的風味下降。反應時間過長使反應過度,不良風味過多,有明顯的糊味和硫味,而反應時間過短,反應不夠充分,產生的風味偏淡。綜合考慮生產效率和成本確定反應時間為60 min。

圖2 反應時間對美拉德反應的影響
2.1.3 反應pH確定
在反應溫度110℃,反應時間50 min,試驗反應介質pH在5.0、6.0、7.0、8.0下所得產物的結果如圖3所示。

圖3 pH對美拉德反應的影響
體系pH影響是通過羧基和氨基在不同的pH環境下實現的,pH在酸性條件下,會抑制美拉德反應,在堿性條件下,氨基酸呈陰離子態,此時氨基酸的反應性較強,容易發生褐變。同時一些揮發性組分容易在較高的pH下形成。由圖3可知,pH在7時,反應物的風味最佳,無太大雜味。
在單因素實驗的基礎上,確定正交實驗的各單因素及不同水平,然后進行正交實驗,以進一步找到產生肉腥風味的最佳組合,根據確定的單因素,將每個因素展開在3個水平下進行正交實驗,設計見表2[10-14]。結果見表3。

表2 正交設計

表3 正交實驗結果
由表3可知,最佳的工藝組合是A2B2C3,即反應溫度為110℃,反應時間60 min,pH為7時,得到的腥香風味最好。最佳組合經過驗證,驗證的結果與正交實驗結果相符,得到的產物的肉腥香風味十足,香味持久。
采用正交實驗得到的最佳試驗組合,做出肉腥香風味香底物,加入食鹽1%,制成腥香味的寵物誘食劑,混合均勻后以5%噴涂在寵物顆粒料上,扎袋存放15 d,試驗選擇了20只泰迪犬進行寵物飼喂試驗,觀察其誘食效果。結果發現,添加肉腥香誘食劑的顆粒料是市售腥香顆粒料采食量的150%。
試驗通過單因素和正交實驗,確定了肝酶解液的最佳反應工藝條件,即溫度110℃,反應時間60 min,pH 7。通過美拉德反應得到的肉腥香底物即腥香誘食劑,肉腥香純正柔和,耐高溫性好,將此誘食劑噴涂在犬顆粒料后,誘食性很好。
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