臨床197株流感嗜血桿菌的分布及耐藥性分析

楊小蘭，劉偉陽，孫增輝

(惠州市第三人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，廣東 惠州516002)

流感嗜血桿菌(HI)為革蘭氏陰性桿菌、無動(dòng)力、兼性厭氧。主要引起呼吸系統(tǒng)感染，部分菌株也可發(fā)生侵襲性感染導(dǎo)致敗血癥、蜂窩組織炎、腦膜炎、骨髓炎等[1]，易感人群以兒童多見[2]。隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，流感嗜血桿菌的耐藥也較為常見，細(xì)菌耐藥性檢測分析作為指導(dǎo)臨床合理用藥的前提尤為重要。回顧性研究分析了我院2016年7月-2017年6月從住院患者送檢標(biāo)本中分離出的197株流感嗜血桿菌的分布情況及其耐藥特點(diǎn)，旨在為臨床抗生素的合理使用提供一定的指導(dǎo)價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 菌株來源

197株流感嗜血桿菌均分離于我院2016年7月-2017年6月期間的住院患者送檢標(biāo)本，剔除同一患者單次入院不同時(shí)間標(biāo)本分離出的相同菌株。

1.2 研究方法

統(tǒng)計(jì)分析197株流感嗜血桿菌感染患者的基本資料，包括年齡、入院季節(jié)、科室、標(biāo)本類型，研究流感嗜血桿菌在不同年齡、入院季節(jié)、科室、標(biāo)本類型的分布情況，并統(tǒng)計(jì)分析流感嗜血桿菌對氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、亞胺培南、美羅培南、頭孢呋辛、頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢噻肟、氨曲南、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、氯霉素、阿奇霉素、復(fù)方新諾明等15種抗生素的耐藥情況。

1.3 細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定

痰液、腦脊液、血標(biāo)本的接種嚴(yán)格遵循《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)進(jìn)行操作，同時(shí)用哥倫比亞血平板、梅里埃嗜血巧克力平板(含萬古霉素)接種，5%-10%CO2環(huán)境下，37℃孵育18-24 h，挑取無色或灰白色、透明、濕潤的疑似菌落行衛(wèi)星試驗(yàn)進(jìn)行初步鑒定，衛(wèi)星試驗(yàn)使用廣州迪景血平板、江門凱林營養(yǎng)瓊脂平板，采用購自美國OXOID公司的Ⅴ、Ⅹ、Ⅹ+Ⅴ因子紙片輔助鑒定，同時(shí)采用VITEK2 compact全自動(dòng)微生物分析儀行明確鑒定。

1.4 藥敏試驗(yàn)

流感嗜血桿菌的藥敏試驗(yàn)采用紙片擴(kuò)散法(K-B法)，挑取分純后的單個(gè)菌落配置成0.5麥?zhǔn)隙鹊牧鞲惺妊獥U菌菌懸液均勻涂布于嗜血巧克力平板上，粘貼藥敏紙片后置于5%-10%CO2環(huán)境下，35℃孵育18-24 h，測量抑菌圈直徑，遵循美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判讀。藥敏紙片購自于溫州康泰藥物有限公司，并采用衛(wèi)生部臨檢中心的流感嗜血桿菌(ATCC49247),金黃色葡萄球菌(ATCC25923)作為質(zhì)控菌株。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用軟件WHONET 5.6進(jìn)行藥敏分析，統(tǒng)計(jì)各抗生素敏感率、中介率、耐藥率的情況，流感嗜血桿菌的分布比較采用卡方檢驗(yàn)分析比較，數(shù)據(jù)處理采用SPSS19.0處理，以P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 197株流感嗜血桿菌各種分布情況 流感嗜血桿菌按年齡、季節(jié)、科室、標(biāo)本類型分布經(jīng)卡方檢驗(yàn)分析比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。

2.1.1197株流感嗜血桿菌的年齡段分布見表1。年齡分布流感嗜血桿菌以兒童檢出率(51.27%)較高，其次為老年患者。

表1 197株流感嗜血桿菌的年齡段分布

2.1.2197株流感嗜血桿菌感染的季節(jié)分布見表2。流感嗜血桿菌感染與季節(jié)存在聯(lián)系，以冬、春季為感染高發(fā)期。

表2 197株流感嗜血桿菌感染的季節(jié)分布

2.1.3197株流感嗜血桿菌感染的科室分布見表3。科室分布以兒科(50.25%)占比最高，其次為ICU(23.35%)。

表3 197株流感嗜血桿菌感染的科室分布

2.1.4197株流感嗜血桿菌感染的標(biāo)本分布見表4。流感嗜血桿菌檢出以痰液為主(占95.94%)。

表4 197株流感嗜血桿菌感染的標(biāo)本分布

2.2 197株流感嗜血桿菌藥敏分析

197株流感嗜血桿菌藥敏分析見表5。197株流感嗜血桿菌對15種抗生物表現(xiàn)出不同的耐藥性，其中以復(fù)方新諾明(61.42%)、氨芐西林(54.31%)較高，哌拉西林/他唑巴坦、亞胺培南、美羅培南、三代頭孢(頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢噻肟等)均敏感性較高。

表5 197株流感嗜血桿菌藥敏分析(n%)

3 討論

流感嗜血桿菌屬嗜血桿菌屬，為條件致病菌，常定植于人類鼻咽部，以飛沫傳播最為多見。對嬰幼兒致病性較強(qiáng)，本研究中，0-14歲年齡段流感嗜血桿菌感染占51.27%，其次為60歲以上老年患者，占29.95%，兩年齡段患者共同生理特點(diǎn)為免疫力低下。相關(guān)研究報(bào)道顯示[3-5]：免疫功能低下、紊亂是正常菌群易感的高危因素。其對于嬰幼兒尤其2歲以下，因機(jī)體免疫系統(tǒng)發(fā)育尚未完善，機(jī)體特異性抗體水平低下，流感嗜血桿菌易在呼吸道發(fā)生定植也是嬰幼兒易發(fā)生呼吸道感染的重要原因[6]。目前，因流感嗜血桿菌感染導(dǎo)致的嬰幼兒肺炎尚未引起臨床診療的足夠重視[7]，但該年齡段患兒表現(xiàn)的病癥也相對較重，尤其流感嗜血桿菌腦膜炎的發(fā)生，易留下多種后遺癥，嚴(yán)重?fù)p傷患兒的生活質(zhì)量。流感嗜血桿菌的致病性源于其內(nèi)毒素、菌毛及多糖夾膜毒性，尤其后者易引起腦膜炎、會(huì)厭炎、膿胸、菌血癥等嚴(yán)重的疾病[8]。嬰幼兒肺炎流感嗜血桿菌的檢出并不少見，表現(xiàn)多為支氣管肺炎、節(jié)段性肺炎，部分可表現(xiàn)為大葉性肺炎。有研究顯示[9,10]：流感嗜血桿菌在新生兒肺炎的致病菌中排第5位。國外流感嗜血桿菌導(dǎo)致的新生兒肺炎將近1.6-4.9/1000，約占侵入性細(xì)菌感染的5%，多繼發(fā)于病毒感染及免疫力低下。流感嗜血桿菌感染有一定的季節(jié)性特點(diǎn)，本地區(qū)流感嗜血桿菌的季節(jié)性分布以冬春季為主，與國內(nèi)一些研究相符[11,12]。科室分布以兒科及ICU多見，兩科室患者符合上述免疫力低下特點(diǎn)，ICU重癥患者多活動(dòng)受限，長期臥床呼吸道缺乏自潔能力，自身抵抗力低下易發(fā)生致病菌的院內(nèi)感染。

致病菌的耐藥性多與臨床抗生素的不合理應(yīng)用關(guān)系密切，本研究數(shù)據(jù)顯示：197株流感嗜血桿菌對15種抗生素表現(xiàn)出不同的耐藥性，其中以復(fù)方新諾明(61.42%)、氨芐西林(54.31%)較高，哌拉西林/他唑巴坦、亞胺培南、美羅培南、三代頭孢(頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢噻肟等)均敏感性較高。在經(jīng)驗(yàn)性用藥中氨芐西林為流感嗜血桿菌感染的首選藥物[13]，但多地區(qū)的研究報(bào)道氨芐西林對流感嗜血桿菌耐藥正日趨嚴(yán)重，在世界范圍內(nèi)氨芐西林對流感嗜血桿菌耐藥高達(dá)16.6%，我國則高達(dá)41.4%[14，15]。本研究數(shù)據(jù)氨芐西林的耐藥高于全國的平均水平，提示氨芐西林耐藥嚴(yán)重已不適合流感嗜血桿菌感染的治療。流感嗜血桿菌對于氨芐西林的耐藥機(jī)制主要源于部分菌株β內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生。β內(nèi)酰胺酶可水解抗生素的β內(nèi)酰胺環(huán)，導(dǎo)致抗生素失活。臨床部分輕中度感染提倡應(yīng)用2代頭孢類抗生素，重癥患者建議選用4代頭孢菌素或碳青霉烯類[16]，但本研究數(shù)據(jù)提示頭孢呋辛在流感嗜血桿菌感染治療上也產(chǎn)生一定程度的耐藥，值得引起臨床的關(guān)注。復(fù)方新諾明的耐藥率最高達(dá)61.42%，高于50%的耐藥率的抗生素應(yīng)避免應(yīng)用于臨床的治療。細(xì)菌的耐藥地區(qū)性特點(diǎn)較為突出，這主要與當(dāng)?shù)氐尼t(yī)務(wù)工作者經(jīng)驗(yàn)用藥習(xí)慣相關(guān)。

綜上所述，流感嗜血桿菌為引起呼吸道感染的重要病原體，以嬰幼兒多見，藥敏試驗(yàn)為抗生素應(yīng)用的前提，根據(jù)藥敏分析數(shù)據(jù)合理應(yīng)用抗生素不僅有利于療效的提高，更有利于臨床耐藥菌株的減少。

作者簡介：楊小蘭(1973-)，女，副主任檢驗(yàn)師，研究方向：臨床微生物檢驗(yàn)。

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