黨參黃酮體外抗氧化能力研究

□ 官德蓮 西北民族大學生命科學與工程學院

黃酮是一類具有相同結(jié)構(gòu)或性質(zhì)的物質(zhì)總稱，其具有很好的抗氧化性，可作為營養(yǎng)強化劑添加到食品中，因此其作為一種天然藥物引起了人們的廣泛重視。黨參是桔梗科黨參屬植物，藥用黨參在陜西、青海、甘肅、山西和四川等省區(qū)均有種植[1]。研究表明黨參含有萜類、碳水化合物和苷類、甾體類、黃酮類、木生物堿類、揮發(fā)油類、有機酸類等成分[2]，具有較高的藥用價值。目前，關(guān)于黨參的研究主要集中于黨參的成分與藥理作用，對黨參黃酮的研究較少。本研究采用Fenton反應體外評價黨參黃酮抗氧化能力，從而為黨參黃酮的食品輔料開發(fā)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 原料、藥品

黨參，從淘寶網(wǎng)采購。藥品，均為分析純。蘆丁，購于成都曼斯特生物制品有限公司。

1.2 設備

101型電熱鼓風干燥箱，北京科偉永興儀器有限公司生產(chǎn)；DG120型中藥材粉碎機，浙江省瑞安市壽海藥材器械廠生產(chǎn)；722E型可見分光光度計，上海光譜儀器有限公司生產(chǎn)；AB204-S型電子分析天平，北京賽多利斯科學儀器有限公司生產(chǎn)；KQ2200DE型數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)。

1.3 黨參黃酮液的制備

1.3.1 標準曲線的繪制

稱取干燥至恒質(zhì)量的蘆丁10.00 mg，加70%乙醇，超聲溶解。70%乙醇稀釋并定容至50 mL，混勻，得到0.2 mg/mL蘆丁標準品溶液。吸取蘆丁標準溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL和6.0 mL放入7只容量瓶中，再分別加入5% NaNO2溶液1 mL、10%Al（NO3）3溶液 1 mL、5%NaOH溶液10 mL，每加入一個藥品均混勻并放置5 min，最后加入70%的乙醇定容至50 mL放置10 min，在510 nm處測定吸光度。獲得結(jié)果之后，以510 nm處的吸光度（Y）為縱坐標，以樣品濃度（x）為橫坐標，計算得標準方程Y=10.997 2x-0.003 1，R=0.997。

1.3.2 黨參黃酮的提取

黨參用清水清洗，60 ℃烘箱干燥至恒質(zhì)量，采用中藥粉碎機粉碎，獲得黨參粉。稱取10.00 g黨參粉，按料液比1∶20，加入80%乙醇溶液，超聲提取30 min，獲得黨參黃銅溶液。

1.4 羥基自由基清除能力試驗

采 用Fenton反 應， 于a、b 2只10 mL棕色容量瓶中分別加入5 mmol/L鄰二氮菲溶液1.5 mL，然后依次加入pH值為7.4的磷酸鹽緩沖液1.0 mL。a瓶加入7.5 mmol/L硫酸亞鐵1.0 mL及0.1%過氧化氫溶液1.0 mL，b瓶 加 入7.5 mmol/L硫酸亞鐵1.0 mL。每加入一種溶液便立刻搖勻，最后以水補充總體積為10 mL，于37 ℃恒溫水浴鍋中加熱1 h，在536 nm處測定吸光值，a為A536（損傷），b為A536（未損傷）。取5個容量瓶，分別加入0.2 mL不同濃度的黨參黃酮溶液（0.2、0.4、0.6、0.8 μg/mL和1.0 μg/mL）， 同a瓶 操 作 ，在536 nm處測定吸光值A(chǔ)536（樣品）。

羥基自由基清除能力計算公式如下：清除能力=[A536（樣品）-A536（損傷）]/[A536（未損傷）-A536（損傷）]×100%。

2 結(jié)果與分析

如圖1所示，黨參黃酮溶液對OH自由基擁有良好的清除能力，而且隨著濃度的提高，清除率不斷提高。當黨參黃酮濃度達到0.8 μg/mL時，清除率達到最大，為45%。不同濃度的黨參黃酮提取液之間有顯著差異，隨著濃度的不斷升高，從低濃度0.2 μg/mL升至高濃度0.8 μg/mL，清除OH自由基的能力也在上升。

圖1 黨參黃酮對OH自由基的清除能力

3 結(jié)論

試驗結(jié)果表明，黨參黃酮濃度達到0.8 μg/mL時，對OH自由基的清除率達到最大，為45%。黨參總黃酮具有一定的抗氧化能力，但關(guān)于黨參黃酮類化合物抗氧化能力的研究較少。抗氧化能研究可分為和體內(nèi)和體外2種，體內(nèi)研究成本過高，研究人員一般不直接采用這種方法。體外研究較為普遍，研究者可根據(jù)其不同用途采用不同方法進行抗氧化能力。