大鼠血清外泌體對MCF—7細胞自噬的影響

陳奇　徐彬　毛建文

【摘要】目的 觀察SD大鼠血清外泌體對乳腺癌（MCF-7）細胞自噬的影響。方法 將MCF-7細胞分為正常對照組、雷帕霉素組、外泌體組及聯合給藥組，外泌體組為加入10%（v/v）外泌體培養48 h，雷帕霉素組為加入雷帕霉素（30 nM）作用24 h，聯合給藥組為加入10%（v/v）外泌體培養48 h后，再加入雷帕霉素（30 nM）作用24 h，正常對照組僅使用10% DMEM培養基培養48 h。采用CCK-8法檢測各組乳腺癌細胞的存活率；熒光顯微鏡觀察MCF-7細胞LC3B蛋白的熒光強度；Western blotting法檢測MCF-7細胞LC3B。結果 4組細胞的存活率無顯著性差異，MCF-7細胞LC3B2/LC3B1比值分別為1.317±0.430、2.308±1.085、0.808±0.350、1.110±0.496。外泌體組與雷帕霉素組有顯著性差異；聯合給藥組與雷帕霉素組也有顯著性差異。結論 大鼠血清外泌體能減少MCF-7細胞的自噬現象。

【關鍵詞】外泌體；MCF-7細胞；細胞自噬

【中圖分類號】R737.9 【文獻標識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2018.07..02

1963年，比利時的細胞學家克里斯汀德迪夫率先提出了一個術語“自噬”，即一種由細胞自身調控的毀滅機制，用來降解無用或功能失調的組份[1]。大隅良典于90年代闡明了細胞自噬的機制，研究者們直至此時才發現自噬在人體中的重要作用[2]。外泌體是一種細胞來源的囊泡，存在于許多乃至所有真核生物的體液中，包括血液、尿液以及細胞培養的培養液中[3-4]。幾乎所有類型的細胞都通過自噬克服饑餓、回收養分以及將多余的或有害的成分轉運至細胞外。同時外泌體能夠在細胞間傳遞，因此在某些情況下這一轉運過程是通過外泌體進行的[5]。目前關于血清外泌體的研究大多集中于作為新的生物標志物用于活體檢驗方面，對于血清外泌體與腫瘤及自噬之間的研究較少。……