慢性自發(fā)性蕁麻疹患者血清25-(OH)-D和IL-25水平檢測(cè)

韓 鈺 王 娟 張亞麗 賈雪松

慢性自發(fā)性蕁麻疹(CSU)是慢性蕁麻疹(CU)的主要類型之一，其發(fā)病機(jī)制仍不清楚，近年來(lái)有研究表明維生素 D可能通過(guò)免疫調(diào)控作用參與慢性蕁麻疹的發(fā)病[1]。同時(shí)較多細(xì)胞因子在慢性蕁麻疹的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮重要作用，而IL-25作為炎性細(xì)胞因子在哮喘等過(guò)敏性疾病中發(fā)揮重要作用，可誘導(dǎo)并影響Th2免疫應(yīng)答并促進(jìn)IL-4、IL-5、 IL-13等[2]表達(dá)增加。為此，我們通過(guò)測(cè)定分析CSU患者血清中25-(OH)-D、IL-25水平，以探討兩者與慢性自發(fā)性蕁麻疹的關(guān)系。

1 資料和方法

1.1 材料 2016年12月至2017年8月新疆石河子大學(xué)第一附屬醫(yī)院皮膚科臨床診斷明確的CSU病例40例。 其中男16例，女24例，年齡 26～65(42.5±10.3)歲，病程6周至12年。 病例入選標(biāo)準(zhǔn)：病程≥6周；病情處于活動(dòng)期，風(fēng)團(tuán)每天發(fā)作或幾乎每天發(fā)作；既往半年內(nèi)無(wú)維生素D類藥物以及鈣片、激素和抑制機(jī)體免疫等藥物服用史；如有使用抗組胺藥物，則停用≥3 d 。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除物理性蕁麻疹；排除特殊類型蕁麻疹；伴有心、肺等危重內(nèi)臟疾病者；妊娠期、哺乳期婦女;伴有自身免疫疾病、腫瘤、其他嚴(yán)重系統(tǒng)疾病及除蕁麻疹之外的過(guò)敏相關(guān)性疾病；伴有嚴(yán)重的精神系統(tǒng)疾病。納入體檢科健康體檢者30人作為對(duì)照組，且了解并自愿加入該研究項(xiàng)目，男12人，女18人，年齡20～59(36.6±10.1)歲，均無(wú)個(gè)人過(guò)敏性疾病病史及家族史。本研究經(jīng)石河子大學(xué)第一附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均簽署知情同意書。25-(OH)-D、IL-25水平分級(jí)及患者病情評(píng)分:目前沒(méi)有最佳維生素D值的標(biāo)準(zhǔn)，許多專家認(rèn)為通常使用的基于人群的參考值太低，推薦用基于健康的參考值代替基于人群的參考值，本實(shí)驗(yàn)以25-(OH)-D≤20 ng/mL為缺乏，21～29 ng/mL為不足[3]，≥30 ng/mL為正常。根據(jù)歐洲慢性蕁麻疹指南疾病評(píng)分(UAS)對(duì)病情嚴(yán)重程度進(jìn)行評(píng)估。嚴(yán)重程度分級(jí)：輕度<4分、中度4～6分、重度≥7分。

1.2 標(biāo)本收集和檢測(cè) 使用電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定受試者25-羥基維生素-D水平，所用試劑盒由 Roche Diagnostics GmbH公司提供，按步驟使用電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(Cobas e601)測(cè)得血清中25-(OH)-D濃度，由我院檢驗(yàn)科完成。剩余另外受試者血清放于-80℃冰箱保存待檢。避免反復(fù)凍融，使用 ELISA法測(cè)定受試者血清 IL-25水平，試劑盒購(gòu)自上海西唐生物科技有限公司。

1.3 標(biāo)本收集和檢測(cè) 于晨起空腹采取靜脈血5 mL，靜置30 min，分離血清，將分離后血清分裝至2個(gè)EP管中，分別用于25-(OH)-D和IL-25的濃度測(cè)定。

2 結(jié)果

2.1 血清25-(OH)-D表達(dá)水平 CSU組血清25-(OH)- D水平(19.48±7. 41)ng/mL低于對(duì)照組(23.23±6.43)ng/mL,(t=2.21，P=0.03)，見表1。

表1 CSU組和健康對(duì)照組25-(OH)-D及IL-25水平

2.2 CSU組與對(duì)照血清25-(OH)-D水平分布 CSU組其中顯示有23例為25-(OH)-D缺乏，13例為不足，僅4例為正常，而健康對(duì)照組顯示有9例為25-(OH)-D缺乏，18例為不足，3例正常。CSU組25-(OH)-D水平與健康對(duì)照組25-(OH)-D水平分布相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H=30.04，P<0.001)。

2.3 血清IL-25表達(dá)水平 CSU組血清IL-25水平(124.59±19.32)pg/mL高于對(duì)照組(107.33±14.57)pg/mL,(t=4.09，P<0.001)，且兩組IL-25水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

2.4 CSU組血清25-(OH)-D水平與IL-25水平相關(guān)性 血清25-(OH)-D水平與IL-25水平無(wú)相關(guān)性(P>0.05)。

3 討論

25-(OH)-D在體內(nèi)含量相對(duì)較高且比較穩(wěn)定，較好的體現(xiàn)了維生素D的含量及其轉(zhuǎn)化能力，因此臨床常使用25-(OH)-D作為測(cè)定維生素D水平的可靠指標(biāo)。本次研究結(jié)果顯示CSU患者外周血清25-(OH)-D水平較對(duì)照組明顯降低，并且有高達(dá)57.5%的缺乏比例，高于對(duì)照組的30%，這與Chandrashekar1、Rasool等[4]和Woo[5]的研究結(jié)果相符合，提示慢性自發(fā)性蕁麻疹普遍存在維生素D水平降低現(xiàn)象。 Woo[5]分別對(duì)72例CU患者、26例急性蕁麻疹患者、26例AD患者、72例健康進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)與其他組相比慢性蕁麻疹組血清25-(OH)-D水平顯著降低。此外，這些研究者認(rèn)為維生素D缺乏可能會(huì)增加急性蕁麻疹患者進(jìn)入慢性蕁麻疹的可能性。該實(shí)驗(yàn)中10例維生素D含量極低(<10 ng/mL)的急性蕁麻疹患者中有5例發(fā)展成為了慢性蕁麻疹。

目前有大量研究表明，維生素D對(duì)機(jī)體有免疫調(diào)節(jié)作用，但仍無(wú)統(tǒng)一的理論完整的解釋其對(duì)蕁麻疹的作用機(jī)制。蕁麻疹是一種IgE介導(dǎo)的I型變態(tài)反應(yīng)，同時(shí)Yip[6]的小鼠實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)肥大細(xì)胞能通過(guò)羥化酶將25-(OH)-D轉(zhuǎn)化為1，25(OH)2 D，后者在體外實(shí)驗(yàn)中能抑制IgE介導(dǎo)相關(guān)的炎癥，且能降低肥大細(xì)胞釋放組胺等血管活性物質(zhì)水平。并有研究顯示服用維生素D可以刺激B細(xì)胞使體外IgE水平顯著降低[7]。本次研究顯示CSU組血清25-(OH)-D水平明顯低于正常人群，提示維生素D對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)可能存在負(fù)性調(diào)節(jié)作用，其水平降低后可促進(jìn)CSU的發(fā)生發(fā)展。另有研究發(fā)現(xiàn)，CU的發(fā)生發(fā)展與Th1/Th2失衡相關(guān)，免疫學(xué)上以IL-4作為Th2細(xì)胞的特征性細(xì)胞因子。維生素D及其衍生物可抑制 Th2型細(xì)胞因子 IL-4的表達(dá)[8]，且有研究證實(shí)[9]CSU患者血清中維生素D水平與IL-4水平呈負(fù)相關(guān)，推測(cè)維生素D可能通過(guò)Th1/Th2失衡影響CSU的發(fā)生。

本次研究發(fā)現(xiàn)CSU患者血清IL-25水平較正常人群明顯升高，與李玲玲[10]等研究結(jié)果相一致。IL-25主要由Th2細(xì)胞、肥大細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞等產(chǎn)生，在Th2反應(yīng)的早期啟動(dòng)中至關(guān)重要[11,12]，Wong等[13]和日本學(xué)者研究證明IL-25可誘導(dǎo)Th2細(xì)胞因子如IL-4等趨化因子表達(dá)，從而使嗜酸粒細(xì)胞增多，增強(qiáng)Th2細(xì)胞免疫應(yīng)答以及IgE的產(chǎn)生，進(jìn)一步擴(kuò)大變態(tài)反應(yīng)。這一結(jié)果提示IL-25也可能通過(guò)影響IL-4水平致Th1/Th2平衡失調(diào)，從而影響CSU的發(fā)生。

本研究通過(guò)對(duì)慢性自發(fā)性蕁麻疹患者外周血25-(OH)-D和IL-25表達(dá)水平的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)二者可能誘導(dǎo)和參與了慢性蕁麻疹的發(fā)生，盡管本次研究結(jié)果顯示血清25-(OH)-D水平與IL-25水平無(wú)相關(guān)性，推測(cè)可能與本次研究開展于新疆地區(qū)冬季，日光照射量明顯減少，減少維生素D合成相關(guān)。但綜合既往研究，推測(cè)兩者可能通過(guò)Th1/Th2細(xì)胞免疫應(yīng)答來(lái)參與慢性自發(fā)性蕁麻疹的發(fā)病，其具體機(jī)制及二者是否存在相關(guān)性仍需進(jìn)一步研究。

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