CD44分子在扁平苔蘚中的表達

林 偉 王 珍 魏 群

扁平苔蘚(lichen planus, LP)是一種慢性炎癥性疾病，其病因及發病機制未明，近年來許多研究認為細胞介導的免疫反應在LP的發病中起重要作用。CD44分子對T淋巴細胞的活化、增殖有增強作用，并且發現在銀屑病、扁平苔蘚皮損中有表達。本實驗旨在探討LP皮損組織中黏附分子CD44的表達及其與浸潤淋巴細胞之間的關系。

1 材料與方法

1.1 實驗組 在本院經臨床及病理檢查確診的扁平苔蘚患者30例，并排除其他疾病，3個月內未系統規律使用免疫抑制劑、糖皮質激素及未長期應用外用藥物治療，其中男18例，女12例，年齡18～65歲，平均發病年齡為(35±5.2)歲。對照組分為對照1組和對照2組：①對照1組為來自本院外科手術患者的健康皮膚組織10例。②對照2組為病理上以真皮層淋巴細胞浸潤為主的皮膚病(如：蕈樣肉芽腫，Sézary綜合征，紅斑狼瘡等)的病變皮膚組織10例。對照組患者要求未患其他疾病，且年齡、性別、取材部位與LP患者相匹配。

1.2 實驗用試劑 鼠抗人CD44單克隆抗體，免疫組化SP超敏試劑盒，AEC顯色劑，復合消化酶。以上試劑均購自福州邁新生物技術開發公司。

1.3 實驗方法 鏈霉菌抗生物素蛋白--過氧化物酶連結(SP)法：將石蠟切片脫蠟至水化；加3% H2O2滅活內源性過氧化物酶；用復合消化酶法進行抗原修復；滴加正常羊血清封閉液；依次加入一抗(鼠抗人CD44單克隆抗體)、生物素標記的第二抗體、鏈霉菌抗生物素-過氧化物酶溶液；采用AEC法染色，蘇木素復染，脫水透明、封片。以PBS緩沖液代替一抗作空白對照。用已知的陽性切片作為陽性對照。

1.5 統計學方法 采用SPSS 10.0統計軟件進行統計學處理，行χ2檢驗，P<0.05具有統計學意義。

2 結果

2.1 CD44分子在正常皮膚組織及扁平苔蘚皮損的表皮中均可見表達。在二者表皮中的棘細胞和基底細胞表面有表達，并且在棘細胞表面的表達最強，而在顆粒層細胞及角質層細胞均無表達，見圖1。兩組比較差異無顯著性(P>0.05)。見表1。

表1 表皮細胞中CD44分子的表達情況 例

2.2 正常人皮膚真皮組織中CD44分子的表達極少，在扁平苔蘚皮損真皮層上部，淋巴細胞呈帶狀浸潤，淋巴細胞中CD44分子的表達呈陽性或強陽性，見圖2。在淋巴細胞浸潤性皮膚病患者真皮層中，CD44分子在淋巴細胞中的表達呈陽性或弱陽性，見圖3。LP與淋巴細胞浸潤性皮膚病相比，真皮層浸潤淋巴細胞中CD44分子的表達明顯增強(P<0.01)。見表2。

表2 真皮層淋巴細胞中CD44分子的表達情況 例

圖1 LP皮損表皮棘細胞和基底細胞及真皮層淋巴細胞表面，CD44分子呈強陽性表達(AEC，×100)圖2 LP皮損真皮層淋巴細胞中，CD44分子呈強陽性表達(AEC，×400)圖3 淋巴細胞浸潤性皮膚病真皮層淋巴細胞中，CD44分子呈弱陽性表達(AEC，×400)

3 討論

盡管LP確切的病因和發病機制還不清楚，許多研究表明T細胞介導的免疫反應對LP的發病起著關鍵作用[1]。而CD44分子對T細胞的活化、增殖有增強作用。CD44分子是分布極為廣泛的細胞表面跨膜糖蛋白,屬細胞黏附分子的一種，CD44在器官形成、造血、淋巴細胞歸巢和遷移、淋巴細胞活化、激活誘導的細胞死亡等方面具有廣泛功能[2]。早期的研究主要集中在CD44和腫瘤轉移的關系上，近年來CD44在淋巴細胞激活中的作用引起人們的關注。

淋巴歸巢[3]是淋巴細胞循環和參與炎癥及其免疫反應的重要過程，關鍵環節是淋巴細胞表面黏附分子與血管內皮細胞相互黏附，進入血液循環，到達靶器官后再黏附游出血管發揮免疫作用的過程。CD44特異性抗體Hermes-1可以干擾人白細胞與高內皮靜脈的內皮結合，這表明CD44雖然不是淋巴細胞的歸巢受體但它與歸巢有關。白細胞在穿出血管的過程中，第一步都是沿著血管內皮滾動，滾動過程中，血管壁細胞間的黏附變松，白細胞的CD44介導黏附到血管內皮細胞上[4]。本研究中，CD44分子在皮膚扁平苔蘚中淋巴細胞表面的強陽性表達，進一步印證了CD44分子在淋巴細胞向真皮上部歸巢中起著至關重要的作用,尤其是在淋巴細胞與血管內皮之間的黏附中CD44的作用更顯著。

CD44分子對T細胞激活過程有增強作用，表現為受抗原刺激后T細胞上CD44分子表達暫時性增高。在激活過程中，CD44扮演“共刺激分子”的角色[5，6]，細胞膜上CD44分子與其配體透明質酸結合，作為共刺激分子同TCR/CD3復合體接受的刺激一起引起T細胞的活化與增殖，同時CD44分子作為一種協同刺激因子可降低TCR活化的閾值。此外Siegelman等發現，浸潤淋巴細胞的表面有大量的白細胞相關抗原-1(LFA-1)表達，CD44和LFA-1協同作用，可使T細胞與CD3+T相互關聯，從而使T細胞激活。以上表明CD44分子在淋巴細胞激活過程中生物功能的重要性。

在扁平苔蘚皮損中，T細胞被活化后，分泌白細胞介素-2(IL-2)、r-干擾素(IFN-r)、單核細胞刺激因子(GM-CSF)等細胞因子，其中IFN-r誘導角質形成細胞表達細胞間黏附分子-1(ICAM-1)異常抗原。同時Sennion等的研究也發現，在扁平苔蘚患者皮損基底層的角質形成細胞有大量的ICAM-1表達，而表皮的其他部分則表達微弱。因此有人推測浸潤淋巴細胞上的CD44分子可能通過與表皮角質形成細胞上的ICAM-1結合，而增強細胞間的黏附，促進淋巴細胞向表皮內浸潤[7]。

由此分析，CD44分子在扁平苔蘚發病中可能參與了T細胞的浸潤及激活過程，最終導致真皮上部淋巴細胞帶狀浸潤及基底細胞液化變性。

對于其他一些病理上以淋巴細胞浸潤為主的皮膚病中，CD44分子在淋巴細胞中的表達呈陽性或弱陽性，但與其在LP皮疹中的表達相比較，差異具有顯著性。原因可能為T細胞介導的細胞免疫反應在扁平苔蘚的發病中起了重要作用，同時CD44作為黏附分子參與了T細胞的活化和增殖，進一步說明了CD44分子在扁平苔蘚中表達的重要意義。

參考文獻

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