中草藥復合添加劑對綿羊抗氧化機能的影響

張 瑜，王倩倩，張文佳，項斌偉，趙有英，辛嘉英，陳書明，張建新

（1.山西農業大學動物科技學院，山西太谷030801；2.右玉縣畜牧局，山西右玉037200；3.右玉縣宏宇牧業有限公司，山西右玉037200；4.哈爾濱商業大學食品科學與工程重點實驗室，黑龍江哈爾濱150076）

在規模化養殖生產中，常使用抗生素等化學合成飼料添加劑[1-2]。抗生素的長期濫用，不僅造成畜禽消化道菌群紊亂，而且畜禽產品會存在有害藥物殘留，對公共衛生和人類健康造成極大危害[3]。目前，許多國家已禁止抗生素類添加劑在畜禽養殖中使用。在此背景下，尋找來源廣、毒副作用小、藥物殘留少的替代物已成為有關學者研究的方向。中草藥具有綠色天然、價格低廉、毒副作用小、低抗藥性等優勢[4-5]，故將其開發成天然、多功能的飼料添加劑已成為目前研究的方向[6-7]。近年來，國內外對中草藥在動物上的應用主要集中在提高動物生產性能和提高機體免疫力等方面[8]。高輝等[9]采用不同的補益混合方劑添加到犢牛的日糧中，結果顯示，與對照組相比，試驗組血清中IgG，IgA水平顯著升高（P＜0.05），試驗組血清總膽固醇顯著下降（P＜0.05），表明該中草藥配方能顯著提高犢牛的免疫機能，并改善肝功能。劉愛霞[8]通過在日糧中添加3個不同劑量的中草藥，對山羊進行45 d的喂養試驗，結果顯示，與對照組相比，其中1%中草藥添加劑能顯著提高奶山羊的產奶量與乳品質，并獲得了良好的經濟效益。馬得瑩等[10]研究顯示，中草藥添加劑能夠提高蛋雛雞的生長性能，而且還具有一定抗病毒作用。趙泮峰等[11]研究表明，在每千克飼料中添加10 g中草藥，可降低腹瀉率，提高斷奶幼兔生長性能。劉莉莉等[12]研究了中草藥對泌乳期山羊血清和乳腺組織抗氧化指標的影響，結果表明，中草藥添加劑能提高奶山羊的抗氧化能力。以上研究表明，不同的中草藥組方均能改善畜禽生長性能，增強機體抗病能力，增強免疫力，提高產奶量，改善乳品質及提高機體的抗氧化能力。中草藥種類繁多，配方各異，功效不同。

本研究進行了杜寒雜一代綿羊的育肥試驗，研究山楂、五味子等8味中草藥及多種微量元素組成的中草藥復合添加劑對綿羊抗氧化機能的影響，旨在為中草藥復合添加劑在綿羊飼料中的使用提供理論依據，為動物的無抗養殖奠定基礎。該中草藥復合添加劑可提高綿羊血清中的抗氧化指標，這將對綿羊的健康有重要意義。

1 材料和方法

1.1 試驗動物及分組

選取右玉縣宏宇牧業有限責任公司的4月齡健康杜寒雜一代綿羊60只，按照“體況相近、公母各半”的原則，隨機分成4組，每組15只，分別設為公羊對照組（標準日糧）、公羊試驗組（標準日糧＋中草藥復合添加劑），母羊對照組（標準日糧）、母羊試驗組（標準日糧＋中草藥復合添加劑）。

1.2 中草藥復合添加劑的制備

根據中草藥配伍理論，中草藥復合添加劑組成如下：MnSO4，FeSO4·7H2O，CuSO4·5H2O，KI，ZnO，Na2SeO3·5H2O，CoCl2·6H2O，VA，VD，VE，MgO，NaHCO3，Na2SO4，Ca（HPO4）2，石粉，莫能菌素，尿素，山楂，麥芽，陳皮，何首烏，五味子，川穹，黑豆，次粉，按照配方稱質量，粉碎，過篩，混勻。

1.3 基礎日糧與飼養管理

飼料配方列于表1。

表1 飼料配方

每天飼喂2次，于8：00與19：00各飼喂一次，先喂精飼料，再喂粗飼料（粗飼料自由采食，精飼料每只0.75 kg/d），自由飲水，飼喂試驗期為45 d。

1.4 檢測指標及方法

1.4.1 血清的制備 在飼喂試驗的第15，30，45天，分別采集血液，注入離心管，待血液凝固，用玻璃棒將血塊輕輕剝離，2 000 r/min離心10 min，吸出血清，-80℃凍存，備用。

1.4.2 總超氧化物歧化酶（T-SOD）的測定（羥胺法） 測定步驟按照南京生物建成試劑廠生產的試劑盒說明書進行。

1.4.3 丙二醛（MDA）的測定 血清中的MDA含量測定，采用硫巴比妥酸法（TBA）[13]，脂質過氧化過程中產生的丙二醛，可與硫代巴比妥酸形成紅棕色的產物，在532 nm處有一吸收峰；根據在532 nm處的吸光系數，可計算出細胞中丙二醛的含量。丙二醛含量的多少可代表機體脂質過氧化水平和膜損傷程度的大小。

1.4.4 總抗氧化能力（T-AOC）的測定 采用南京生物建成試劑廠生產的試劑盒，具體測定步驟按照試劑盒說明書進行。

1.5 數據統計分析

采用SPSS 21.0對數據進行單因素方差分析和Duncan氏多重比較，結果以“平均值±標準差”表示。

2 結果與分析

2.1 中草藥復合添加劑對綿羊血清T-SOD的影響

從表2可以看出，在第15，30，45天，與公羊對照組相比，公羊試驗組血清中總超氧化物歧化酶的活性分別提高了 29.52%，54.70%和 56.96%，且差異顯著（P＜0.05）；與母羊對照組相比，母羊試驗組各階段血清中總超氧化物歧化酶的活性分別提高了 28.71%，55.46%和 55.07%，且差異顯著（P＜0.05）；公羊、母羊對照組在15，30，45 d時血清中總超氧化物歧化酶的活性變化不大，且差異不顯著（P＞0.05）；與第 15天相比，公羊、母羊試驗組血清中總超氧化物歧化酶的活性在30，45 d時迅速上升，且差異顯著（P＜0.05），但30 d與45 d間差異不顯著。說明該中草藥復合添加劑添加到日糧中，飼喂30 d血清中總超氧化物歧化酶的活性就可達最高值。

表2 中草藥復合添加劑對血清T-SOD的影響 IU/mL

2.2 中草藥復合添加劑對綿羊血清MDA的影響

從表3可以看出，與公羊對照組30，45 d相比，公羊試驗組30，45 d血清中丙二醛的含量分別降低了 48.42%和 46.30%，且差異顯著（P＜0.05）；與母羊對照組30，45 d相比，母羊試驗組30，45 d時血清中丙二醛的含量分別降低了45.87%和44.84%，且差異顯著（P＜0.05）；公羊、母羊對照組在15，30，45 d時血清中丙二醛的含量變化不大，差異不顯著（P＞0.05）；公羊、母羊試驗組血清中丙二醛的含量隨著飼喂中草藥復合添加劑天數的增加，丙二醛的含量逐漸下降，且30，45 d時血清中丙二醛的含量與15 d相比差異顯著（P＜0.05）。說明該中草藥復合添加劑添加到日糧中，飼喂30 d后即能顯著降低血清中丙二醛的含量。

表3 中草藥復合添加劑對血清MDA含量的影響 mmol/mL

2.3 中草藥復合添加劑對綿羊血清T-AOC的影響

由表4可知，在試驗第15，30，45天，與公羊對照組相比，公羊試驗組血清中總抗氧化能力分別提高了 51.49% ，106.10% 和 108.89% ，且差異 顯著（P＜0.05）；與母羊對照組相比，母羊試驗組血清中總抗 氧 化能 力 分別 提 高 了 55.77% ，111.59% 和110.35%，且差異顯著（P＜0.05）；公羊、母羊對照組在15，30，45 d各階段血清中總抗氧化能力差異不顯著（P＞0.05）；公羊、母羊試驗組血清中總抗氧化能力隨著飼喂中草藥復合添加劑天數的增加，其活性逐漸上升，且30，45 d時血清中總抗氧化能力與15 d相比顯著升高（P＜0.05）。說明該中草藥復合添加劑添加到日糧中，飼喂30 d后，血清中總抗氧化能力達最大值。

表4 中草藥復合添加劑對血清中T-AOC的影響 IU/mL

3 討論

正常情況下，機體氧自由基的產生與清除保持平衡；但在衰老、疾病或特殊生理情況下，機體抗氧化酶的活性顯著降低，這些氧自由基大量積累，對機體造成極大破壞作用[14]。酶促系統和非酶促系統是動物機體防御自由基攻擊的兩大系統，其中酶促系統最主要的是SOD。SOD是需氧生物中普遍存在的一種含金屬的酶[15]，有Cu-Zn-SOD和Mn-SOD，通過催化O2-·的歧化反應生成H2O2，阻止自由基對生物膜系統的損傷，從而維護細胞正常的生理功能。如果自由基不能及時清除，就會造成大量的MDA積于體內[16]。脂質過氧化作用產生的自由基不僅能連續誘發脂質的過氧化作用，而且還可以使蛋白質脫氫而產生蛋白質自由基，使蛋白質分子發生鏈式聚合，從而使細胞變性，這時機體的抗氧化系統發揮作用，總抗氧化能力（T-AOC）就成為衡量機體抗氧化性能的重要指標[17]。

規模化舍飼圈養極易造成羊體內的抗氧化體系紊亂，病死率上升。許多研究顯示，中草藥含有多種營養物質，如蛋白質、多糖、生物堿、甙類、揮發性樹脂類、有機酸、氨基酸、維生素及微量礦物元素[18]。中草藥通過“驅邪扶正”改善機體的失衡狀態，來提高機體的抗氧化能力。申瑞玲等[19]和李宏全等[20]在蛋雞上的試驗結果表明，中草藥方劑除能顯著增加產蛋率外，還可極顯著地提高血清中的SOD活性，降低血清中的MDA含量。崔永華[21]研究表明，日糧中添加2%的中草藥能夠顯著提高生長牛血清中的抗氧化性能。劉莉莉等[12]研究發現，中草藥添加劑能減少脂質過氧化物丙二醛的產生，同時能夠提高血清和乳腺組織中的抗氧化酶活性，增強山羊的抗氧化能力。武孝晉等[22]研究表明，中草藥添加劑可提高雞體內SOD活性，并降低MDA含量。本試驗在精飼料中添加5%中草藥復合添加劑，15 d時即顯著提高血清中的T-SOD，T-AOC的活性，分別上升28%，51%；在30 d時，血清中的丙二醛含量即可降低45%以上，說明該中草藥復合添加劑能夠顯著提高綿羊抗氧化機能。試驗組SOD活性升高可能與該添加劑含有“五味子”有關，木脂素類是五味子的主要藥用成分，而五味子乙素是木脂素的活性成分之一[23-24]，李斌等[25]試驗表明，五味子乙素對羥自由基清除作用大于相同質量濃度的微生素C。馬得瑩等[15]用五味子等中草藥作為添加劑提高了機體抗氧化性能，顯著地提高了血清中SOD酶活性。此外，中草藥中的山楂含有黃酮類物質，可消除鏈引發階段的自由基，通過酚羥基阻斷自由基鏈反應而發揮抗氧化作用。武晉孝等[22]研究認為，影響抗氧化性能的因素還有維生素E、硒、鋅或錳；本試驗組中添加的中草藥復合添加劑含硒等微量元素，也是提高綿羊抗氧化機能的因素之一。除此之外，該中草藥復合添加劑中的麥芽、陳皮、何首烏、川穹、黑豆、次粉等含有的多種生物活性物質均有可能對綿羊血清中抗氧化指標產生影響，但其抗氧化功效及其作用機制還有待進一步研究。

4 結論

本研究結果表明，中草藥復合添加劑能顯著提高綿羊血清中T-SOD與T-AOC的活性，顯著降低綿羊血清中MDA的含量，顯著增強綿羊的抗氧化機能。研究結果為該中草藥復合添加劑在綿羊育肥中應用奠定了基礎。

參考文獻：

［1］ SHAH NJ.Reversing resistance:The next generation antibacterials[J].Ind J Pharmacol，2015，47（3）：248-255.

［2］王金合，李榮譽，汪德剛，等.中草藥添加劑對肉牛增重和血清中生長激素的影響[J].河南農業科學，2007（9）：101-103.

［3］趙亮，趙瑞萍，李向陽，等.中草藥飼料添加劑在畜禽上應用研究進展[J].山西農業科學，2014，42（2）：206-208.

［4］吳存兵，吳君艷，乙耀.中草藥添加劑在飼料中應用研究[J].農業科技與裝備，2017（4）：62-63.

［5］鄭成江，呂世璽，張連洪，等.中草藥飼料添加劑的研究進展與展望[J].天津農業科學，2010，16（5）：51-54.

［6］劉忠寬，智建飛，李英杰.中草藥飼料添加劑研究進展[J].河北農業科學，2005，9（2）：86-89.

［7］金花，賈玉山，劉興波，等.中草藥飼料添加劑對奶牛產奶量及牛奶品質影響初探[J].華北農學報，2007，22（Z3）：37-40.

［8］劉愛霞.中草藥添加劑對奶山羊產奶性能的影響[J].飼料工業，2013（13）：58-60.

［9］高輝，楊靜靜，劉翠艷，等.中草藥添加劑對犢牛生產性能和血液生化指標的影響 [J].安徽農業大學學報，2013，40（6）：950-954.

［10］馬得瑩，單安山，李群道.中草藥添加劑對蛋雛雞生長性能和免疫功能的影響[J].動物營養學報，2004，16（2）：36-40.

［11］趙泮峰，任戰軍，王洪陽，等.中草藥添加劑對斷奶幼兔生長性能和腹瀉率的影響[J].西北農業學報，2012，21（1）：43-47.

［12］劉莉莉，李慶章.中草藥添加劑對泌乳期奶山羊抗氧化能力的影響[J].中國乳品工業，2008，36（7）：32-34.

［13］王金勝，郭春絨，劉桂林，等.農業生物化學技術[M].太原：山西科學技術出版社，1997：169-170.

［14］李秋梅，宋恩亮，萬發春，等.中藥方劑對肉牛血清總超氧化物歧化酶活性的影響[J].飼料研究，2008（6）：57-59.

［15］馬得瑩，單安山，李群道，等.中草藥、甘露寡糖和抗生素對蛋雛雞抗氧化機能與血液生化指標的影響 [J].畜牧獸醫學報，2004（4）：389-394.

［16］杜利霞，董寬虎，喬志宏，等.NaHCO3脅迫對賴草幾種生理指標的影響[J].山西農業科學，2012，40（11）：1160-1163.

［17］胡文琴，王恬，孟慶利.動物中活性氧的產生及清除機制[J].家畜生態，2004，25（3）：64-67.

［18］ LIU H W，TONG J M，ZHOU D W.Utilization of Chinese herbal feed additives in animal production[J].Agriculture Sciences in China，2011，10（8）：1262-1272.

［19］申瑞玲，王俊東.中草藥添加劑對蛋雞抗氧化作用及生產性能的影響[J].中國獸醫科技，2000（5）：27-29.

［20］李宏全，段縣平，馬海利，等.黃芪多糖提高雞抗氧化作用對免疫功能的影響[J].山西農業大學學報（自然科學版），2002（1）：78-81.

［21］崔永華.復方中草藥添加劑對生長牛主要消化酶和血清抗氧化指標的影響研究[D].泰安：山東農業大學，2006.

［22］武晉孝，李淑琴，王俊東，等.復方中草藥添加劑對肉雞抗氧化作用的影響[J].河北畜牧獸醫，2003，19（3）：14-16.

［23］GUW，WEI N，WANG Z.LCAnalysis of Lignans from Schisandra sphenanthera，Rehd.etWils[J].Chromatographia，2008，67（11/12）：979-983.

［24］仰榴青，徐佐旗，吳向陽，等.薄層掃描法同時測定南、北五味子提取物中四種木脂素的含量 [J].食品科學，2006，27（11）：401-404.

［25］李斌，孟憲軍，薛雪，等.北五味子乙素清除自由基及體外抑菌作用的研究[J].食品科學，2011，32（5）：79-82.