2016-2017年北川縣H5型高致病性禽流感免疫抗體監測及分析

王雪 李海全 萬青山 肖香 陳橋 黃宇

1.四川省北川羌族自治縣農業局

2.四川省三臺縣農業局

禽流感是一種由A型流感病毒引起的多種家禽及野鳥的高度接觸性傳染病，被OIE列為A類傳染病，我國也將其列為一類動物疫病，為強制免疫病種。2016-2017年期間，為分析春秋兩季集中免疫質量，及時掌握流行病學動態和免疫效果，筆者在每年的5月和11月對轄區內部分規模場、散戶進行H5型高致病性禽流感抗體的血清學監測采樣和檢測，現將近2年的檢測結果報告如下。

一、材料與方法

1.試劑。自配阿氏液，1%雞紅細胞懸液，pH7.2的0．Olmol/L磷酸鹽緩沖液（PBS），H5型禽流感抗原，及陰、陽對照血清（由中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所提供），批號:20160401，20170512。

2.采樣。

（1）采樣選擇。共對17個養雞場、180個村218戶采樣。如表1。

表1北川縣高致病性禽流感監測場點

（2）采樣要求。每個家禽均采用翅靜脈采取血液，并記錄地址、日齡、養殖規模、免疫次數、最近免疫時間、品種及使用疫苗的相關資料。

（3）采集內容。共采集雞血583份、鴨血25份、鵝血10份，每個樣品采血量1.5～2.0ml。

3.檢測方法。血凝抑制試驗:采集血液后，及時分離出血清，并參照H5高致病性禽流感診斷技術（GB/T 18936-2003）和禽流感微量紅細胞凝集抑制試驗（SN/T1182.2-2004）的規定，采用血凝抑制試驗，集中對血清樣品進行實驗室檢測，并作系統分析。

4.結果判定。以完成抑制4個HAU抗原的血清最高稀釋倍數作為HI滴度。只有陰性對照孔血清滴度不大于2 log2．陽性對照孔血清誤差不超過1個滴度，試驗結果才有效。HI價小于或等于3 log2判定HI試驗陰性；HI價等于4 log2為可疑，需重復試驗；HI價大于或等于 5 log2 為陽性。

二、結果與分析

2016年全年共檢測免疫禽血清310份，其中合格255份，平均合格率為82.3%。2017年全年共檢測免疫禽血清308份，其中合格237份，平均合格率為77%。結果見表2。

表2 2016-2017年北川縣H5高致病性禽流感免疫抗體檢測結果 份

1．規模場檢測結果。在2016年總檢測數90份中，合格79份，平均合格率為88%，2017年總檢測數80份中，合格71份，平均合格率為89.5%。

2.散養戶檢測結果。在2016年總檢測數220份中，合格176份，平均合格率為80%，2017年總檢測數228份中，合格166份，平均合格率為72.8%。

三、結論與討論

1.規模場的抗體水平普遍比較高，這些養殖場基本上是外地購買雞苗，蛋雞居多，選址嚴格，周圍有天然的免疫屏障，有專業的獸醫技術人員駐場或作技術指導，疫苗有專規范保存和運輸，按照科學的免疫程序進行接種。商品代養殖場均經兩次禽流感免疫，有時新禽二聯和重組禽流感間隔免疫。

2.有的散養戶禽流感免疫抗體合格率始終較規模場低的原因主要有以下幾方面：（1）免疫程序不科學。有些散養場養殖戶防疫意識淡薄，重點靠春秋兩季集中免疫，基礎免疫過遲或加強免疫的間隔時間過長，加之北川地處山區，家禽多散養林間，存在免疫困難，免疫效果差；（2）疫苗的運輸和保存不當。北川山區養殖戶不集中，村社間距離遠，疫苗浪費嚴重，禽流感滅活油乳苗稀釋后要在當天內用完，禽流感一新城疫重組二聯活疫苗稀釋后2小時內用完。有些養禽戶家禽散養不方便抓，多用二聯苗飲水，自行擠到水槽內，之前沒有限水，無法保證2小時內喂完，水槽也沒清理干凈，家禽免疫效果不得而知；（3）疫苗使用前準備不充分，未按免疫劑量接種，加大或減少劑量。疫苗使用前溫度回到室溫的水平，油乳劑要充分搖勻，加上注射過程中操作技術不熟練，出現空打或少打。有的還隨意減少或加大劑量，造成免疫抑制或不能產生足夠的抗體，以致抗體水平偏低；（4）禽苗首免10～14日齡，但是散養戶考慮到家禽日齡比較小，一般不讓免疫。以致抗體水平低。

3.需要注意的是，本次檢測的規模場樣品170份中，陽性率雖然都達到80%以上，但是尚未出現達100%免疫合格率的雞群，仍需要認真分析免疫過程中的各種問題，按照強制免疫計劃做好強制免疫工作。2017年比2016年春秋防規模場檢測合格率要略高，原因應該是2017年局里加強了規模場管理，大部分用的是重組禽流感，而有文獻表明重組禽流感比新禽二聯苗效果要好。農業部2017年起增加對H7型高致病性禽流感免疫，新禽二聯苗將退出市場，但是禽流感不能飲水免疫對于散戶抗體達標始終存在困難，

4.HI主要檢測血清中針對HA蛋白的抗體，具有特異性，HA抗體的產生在很大程度上反映了機體對病毒感染的抵抗力水平。因此，免疫是預防和控制禽流感最有效的手段。在家禽生產中，長期對AI的血清學監測是十分必要的，同時多做宣傳，定期培訓縣內的基層防疫員，了解疫苗注射流程及必要性，最終提升禽流感的抗體合格率。