雙氫青蒿素片劑的研制及溶出度研究

黃 靜

(安徽醫學高等專科學校，安徽合肥 230061)

青蒿素是從中藥黃花蒿中經提取分離出來的一種抗瘧藥，療效高、毒性小。雙氫青蒿素(Dihydroartemisinine)是將青蒿素用硼氫化鈉還原而得到的一個衍生物，療效迅速，毒副作用小。雙氫青蒿素為過氧化物，具有獨特的過氧橋結構，其抗虐作用與鐵介導的藥物分子內過氧橋裂解產生的自由基有關[1]。雙氫青蒿素具有強大的抗瘧原蟲作用，其抗虐作用是青蒿素的4～8倍，且對耐氯喹株瘧原蟲感染亦有效。口服吸收良好，起效迅速。雙氫青蒿素片劑口服吸收完全，生物利用度高，其生物利用度約為青蒿素的10～60倍，適用于各種類型瘧疾的癥狀控制，尤其是對抗氯喹惡性及兇險型瘧疾有較好療效[2]。本實驗研制了其片劑，并考察其溶出度。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

片劑四用測定儀78X-2(上海黃海藥檢儀器廠)；紫外可見分光光度計UV-2450(日本島津公司)；藥物溶出度儀RCZ-6B(上海黃海藥檢儀器廠)；電熱鼓風干燥箱JB101(南通滬南科學儀器有限公司)；電子天平FA1104(上海民橋天平儀器廠)；旋轉式壓片機ZP-33(上海天祥健臺藥機廠)；標準分樣篩(24,20,200,100,80目)(合肥通達篩網有限公司)。

1.2 試藥

雙氫青蒿素原料藥(浙江新和成藥業股份有限公司)；微晶纖維素(淮南山河藥用輔料有限公司)；羧甲基淀粉鈉(淮南山河藥用輔料有限公司)；聚乙烯吡咯烷酮K30(中國醫藥(集團)上海化學試劑公司)；乳糖(廣東西隴化工廠)；硬脂酸鎂(淮南山河藥用輔料有限公司)。

2 方法與結果

2.1 處方設計

2.1.1 劑量依據

依據中國藥典2015版二部收載的雙氫青蒿素片，其規格為20 mg/片，制定本品規格為20 mg/片。

2.1.2 崩解劑選擇

本品為難溶性藥物，為使藥物能夠快速溶出起效，片劑中需加入適量的崩解劑。常用的崩解劑有淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素等，我們選用微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉為崩解劑進行處方篩選。

2.1.3 填充劑的選擇

藥物的體積太小不易壓片，本品的劑量較小(規格為20 mg)，須加入適量的填充劑，以增加片劑的體積。常用的填充劑有糖粉、乳糖、淀粉等，其中乳糖無吸濕性，釋放藥物快，對藥物含量測定影響小，我們選用乳糖、淀粉為填充劑進行處方篩選。

2.1.4 潤濕劑及粘合劑的選擇

本品擬采用濕法制粒，需加入水、醇或其它粘合劑以產生粘性制成顆粒，對于疏水性藥物，用PVP水溶液作粘合劑，不但易于均勻濕潤，并能使疏水性藥物顆粒表面變為親水性，有利于藥物的崩解和溶出。結合主藥和所選用輔料的性質，我們選用水、5%PVP溶液及PVP為潤濕劑或粘合劑進行處方篩選。

2.1.5 潤滑劑的選擇

為增加顆粒的流動性，壓片時需加入適當適量潤滑劑。硬脂酸鎂、滑石粉及微粉硅膠等為常用的潤滑劑。根據本品的性質，我們選用硬脂酸鎂、微粉硅膠為潤滑劑進行處方篩選。

2.1.6 處方

根據本品的劑型特點及原輔料的性質和用量等，我們設計了以下6個處方(表1)，進行實驗。

表1 處方摸索

2.2 制備工藝

將原料藥、輔料在60℃干燥2小時，原料藥過200目篩，輔料過100目篩，備用。按每處方30片量分別稱取上述各組分，按等量遞增原則混勻，再過80目篩混勻。加入潤濕劑或粘合劑制軟材，過24目篩制粒，所得濕顆粒在60℃恒溫烘箱中通風干燥2小時，其干顆粒過20目篩整粒，加入潤滑劑混勻。調節裝量和壓力，壓片，即得。

2.3 溶出度的測定

2.3.1 溶出介質的選擇

本品難溶于水，在乙醇中略溶，參考2010年版藥典，選用0.15%氫氧化鈉-乙醇(4∶1)[4]為溶出介質。

2.3.2 測定波長的選擇

精密稱取雙氫青蒿素原料藥40 mg，置100 mL量瓶中，加乙醇適量，振搖使雙氫青蒿素溶解并稀釋至刻度，搖勻，靜置2小時以上，精密量取靜置后溶液2 mL，置10 mL量瓶中，加0.15%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，在37℃條件下保溫30分鐘，再精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加2%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，置60℃恒溫水浴中反應30分鐘，取出冷卻至室溫，以(0.15%氫氧化鈉溶液-乙醇(4∶1))-2%氫氧化鈉溶液(1∶4)為空白，于200～400 nm波長間掃描。

由紫外掃描可知，雙氫青蒿素在2%氫氧化鈉-乙醇溶液(4∶1)中于241 nm波長處有最大吸收。另取處方量的空白輔料。將上述溶液置60℃恒溫水浴中，反應30分鐘，冷至室溫，按照分光光度法，在241 nm的波長處測定吸收度。結果表明：輔料在此波長下無吸收，不干擾本法的測定。故選定241 nm為溶出度測定波長。

2.3.3 標準曲線的制備

精密稱得雙氫青蒿素對照品40 mg，置250 mL量瓶中，加溶出介質(0.15%氫氧化鈉-乙醇(4∶1))溶解并稀釋至刻度，搖勻，置37℃保溫30分鐘，作為對照品貯備液。精密量取貯備液2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0 mL，分別置10 mL量瓶中，加溶出介質稀釋至刻度，搖勻，另精密量取溶出介質2 mL，置10mL量瓶中，加2%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，作為空白溶液。以濃度(μg/mL)為縱坐標，吸收度為橫坐標進行線性回歸結果見圖1和表2。

表2 溶出度測定線性

圖1 線性回歸結果

得回歸方程為：A=4.335×10-3×C-6.640×10-4(R=0.9998，n=7)。表明雙氫青蒿素在6.54～26.18 μg/mL的濃度范圍內呈良好的線性關系。

2.3.4 精密度

精密稱取雙氫青蒿素對照品10 mg、16 mg、20 mg，分別置250 mL量瓶中，加溶出介質充分溶解并稀釋至刻度，搖勻，置37℃保溫30分鐘。精密量取上述各濃度溶液各2 mL，共5份，分別置10 mL量瓶中，加2%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度。將上述溶液置60℃恒溫水浴中，反應30分鐘，冷至室溫，照分光光度法，在241 nm的波長處測定吸收度，以吸收度計算相對標準偏差(RSD)，結果相對標準偏差(RSD)分別為1.38%(低)、1.24%(中)、0.87%(高)，本法的精密度良好。

2.3.5 回收率考察

取雙氫青蒿素對照品10 mg、16 mg、20 mg，各3份，分別置250 mL量瓶中，加入處方比例的空白輔料約60 mg，共9份，分別置上述量瓶中，加溶出介質充分溶解并稀釋至刻度，在37℃條件下保溫30分鐘，再精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加2%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，作為供試品溶液。另取雙氫青蒿素對照品適量，加乙醇溶解并定量稀釋成每1mL中含0.4 mg的溶液，放置2小時以上，精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加0.15%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，置37℃保溫30分鐘，再精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加2%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，作為對照品溶液。將供試品溶液及對照品溶液置60℃恒溫水浴中，反應30分鐘，同時取出，冷至室溫，照分光光度法，在241 nm的波長處測定吸收度，計算結果見表3。

結果表明，本法測定雙氫青蒿素片溶出度方法的回收率良好。

2.3.6 制劑處方溶出度的測定

取各處方的樣品，照溶出度測定法，以0.15%氫氧化鈉-乙醇(4∶1)250 mL為溶劑，依法操作，經30分鐘時，取溶液5 mL(同時補充溶液5 mL)，濾過，精密量取續濾液2 mL，置10 mL量瓶中，加2%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，作為供試品溶液。另取雙氫青蒿素對照品適量，加乙醇溶解并定量稀釋成每1 mL中含0.4 mg的溶液，精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加0.15%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，再精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加2%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，作為對照品溶液。將供試品溶液及對照品溶液置60℃恒溫水浴中，反應30分鐘，同時取出，冷至室溫，結果見表4。

表3 溶出度測定回收率試驗

表4 各處方溶出度測定結果

處方1、2制得的樣品溶出度不符合要求；處方3、4溶出度均符合要求，但處方3溶出稍慢；處方5、6壓出的片子外觀性狀、溶出度均符合要求，但處方5溶出偏慢。綜合考慮，處方4、6為最佳處方，按照處方4、6制備的片劑其外觀性狀、溶出度均較為理想。但處方4中的微粉硅膠較硬脂酸鎂價格高，從成本考慮，選擇處方6作為最佳處方。

2.3.7 樣品溶出曲線考察

取處方6的片子，照溶出度測定法，以0.15%氫氧化鈉-乙醇(4∶1)250 mL為溶出介質，轉速為每分鐘50轉，依法操作，經5、10、15、30、45、60分鐘時，取溶液5 mL(并同時補液5 mL)，濾過，精密量取續濾液2 mL，置10 mL量瓶中，加2%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，作為供試品溶液。照上述方法操作，在241 nm的波長處測定吸收度，繪制出溶出曲線,結果見表5和圖2。

表5 樣品溶出曲線數據

圖2 溶出曲線

3 結果和討論

(1)劑量小的藥物通過濕法制粒可達到含量準確、分散良好，同時獲得良好的流動性，減少細粉飛揚。故采用濕法制粒。(2)本品為難溶性藥物，必須有足夠的細度以保證混合均勻及溶出度要求。(3)本品藥物量少，與輔料量相差懸殊，要采用等體積遞增混合法混勻。(4)制軟材時要控制潤濕劑或粘合劑的用量，使軟材達到“握之成團，觸之即散”，并以握后掌上不粘粉為度。

[參考文獻]

[1]翟自立,肖樹華.青蒿素類抗虐藥的作用機制[J].中國寄生蟲學與寄生蟲雜志,2007(3):182-185.

[2]趙凱存,宋振玉.雙氫青蒿素在人的藥代動力學及與青蒿素的比較[J].藥學學報,2006(5):342-346.

[3]侯惠民,王浩,張光杰,等.藥用輔料應用技術[M].2版.北京:中國醫藥科技出版社,2005:53-78.

[4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典二部[M].北京:中國醫藥科技出版社,2010.