I群4型禽腺病毒卵黃抗體效價與雞攻毒保護相關(guān)性試驗

于洪濤，趙 麗，呂日輝

（ 哈藥集團生物疫苗有限公司，哈爾濱 150069）

腺病毒是全球家禽和野禽常見的傳染病原之一。多數(shù)腺病毒可在健康禽體內(nèi)存在并復制，不表現(xiàn)臨床癥狀或臨床癥狀非常輕微，但可成為混合感染時的條件性病原；腺病毒有時也可作為原發(fā)性病原，引起禽類的多種病癥[1-2]。

腺病毒可分為A、B、C、D、E 5個種12個血清型，我國主要流行A、B、C 3種基因型，共6個血清型（火雞1型、1型、4型、5型、8a/b型），但是近期在豫南、皖北、蘇北、魯西北和膠東地區(qū)流行的禽腺病毒主要是血清4型和8a/b型，造成雞群的死亡率較高，發(fā)病急，有蔓延的趨勢。安卡拉病（心包積水-肝炎綜合征）就是由Ⅰ群腺病毒，血清4型引起的[3-5]。該病多發(fā)于肉雞，近期也開始感染麻雞，以及產(chǎn)蛋雞的育成雞，并且育成雞發(fā)病死亡率還非常高[6-9]。

Ⅰ群禽腺病毒的12個血清型交叉保護性較差，因此在防控上必須選用與流行株匹配的疫苗株和卵黃抗體才能有效遏制疫情的蔓延。使用卵黃抗體時，因其質(zhì)量差別、使用方法、雛鴨的體質(zhì)狀況和鴨群流行病學情況等不同，各地報道的預防和治療效果不盡相同。為此，本文對制備的卵黃抗體進行抗體效價與靶動物攻毒保護相關(guān)性研究，確定卵黃抗體效價與攻毒保護之間的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

Ⅰ群4型禽腺病毒卵黃抗體：批號是201701、201702、201703，由哈藥集團生物疫苗有限公司制備。

Ⅰ群4型禽腺病毒檢驗用強毒：批號是FAVHY-QS-03-2，病毒含量為107.38TCID50/0.1 mL，規(guī)格為2.0 mL·瓶-1；Ⅰ群4型禽腺病毒瓊擴抗原：批號是 FAV-HY-K-01；效價：1：2；規(guī)格：2.0 mL·瓶-1；Ⅰ群4型禽腺病毒陽性血清：批號是FAV-HYY-01；效價：1：64；規(guī)格：2.0 mL·瓶-1；I群4型禽腺病毒陰性血清：批號是HY-Y-01，規(guī)格：2.0 mL·瓶-1，由哈藥集團生物疫苗有限公司制備、鑒定、保管和供應(yīng)。

SPF雞：21和42日齡，由哈藥集團生物疫苗有限公司五常SPF雞場提供。

注射器：1.0 mL注射器，購自上海達美醫(yī)用塑料廠。

1.2 試驗方法

每批實驗室試制的卵黃抗體用磷酸鹽緩沖液分別稀釋成Ⅰ群4型禽腺病毒卵黃抗體瓊擴效價分別為1：2、1：4和1：8，各效價抗體按1.0 mL·只-1分別肌肉接種21日和42日齡SPF雞各10只，另設(shè)同批次同日齡SPF雞各10只，每只肌肉注射生理鹽水1.0 mL作為攻毒對照組；設(shè)同批次同日齡SPF雞各10只，不注射任何藥品作為健康對照。注射抗體24 h后，試驗抗體組和攻毒對照組雞經(jīng)肌肉注射I群4型禽腺病毒，每只0.1 mL（含106.0TCID50），各組相同條件下隔離飼養(yǎng)10 d，比較抗體效價與攻毒保護率之間的關(guān)系。共進行3批實驗室試制抗體的試驗。

2 試驗結(jié)果

不同效價抗體接種21日、42日齡雞攻毒保護試驗結(jié)果見表1、表2。不同效價抗體對Ⅰ群4型禽腺病毒攻毒保護試驗統(tǒng)計結(jié)果見表3。

表1 不同效價抗體接種21日齡雞攻毒保護試驗結(jié)果

從表1、表2、表3結(jié)果可知，卵黃抗體接種21和42日齡雞，當抗體瓊擴效價為1：2時，Ⅰ群4型禽腺病毒強毒攻毒保護率為50%；當瓊擴效價均為1：4時，攻毒保護率為93.3%～96.7%，當抗體瓊擴效價均為1：8時，攻毒保護率為100%。攻毒對照組雞100%發(fā)病，剖檢試驗雞、死亡和發(fā)病雞均呈典型的心包積液及肝臟腫大和壞死的病理變化；健康對照組均100%健活。

表2 不同效價抗體接種42日齡雞攻毒保護試驗結(jié)果

表3 不同效價抗體對I群4型禽腺病毒攻毒保護試驗統(tǒng)計結(jié)果

3 結(jié) 論

Ⅰ群4型禽腺病毒卵黃抗體預防雞肝炎具有良好效果，且抗體瓊擴效價與攻毒保護率呈正相關(guān)，抗體瓊擴效價可代替雞效檢試驗。確定Ⅰ群4型禽腺病毒抗體效價≥1：4，其為Ⅰ群4型禽腺病毒卵黃抗體血清學效檢標準。

[參考文獻]

[1] 李曉林,王相芹,羅濟冠,等.I群禽腺病毒的分離鑒定及其致病性研究[J].中國動物檢疫,2016,33（8）:86-89.

[2]初歡歡,單虎,鄭秀云,等.9株Ⅰ群禽腺病毒的分離鑒定及hexon基因的遺傳變異分析[J].中國獸醫(yī)雜志,2017（1）:7-9.

[3] 王亞楠,韓濤,李純玲,等.禽腺病毒Ⅰ群的研究現(xiàn)狀[J].中國動物保健,2017,19（1）:61-64.

[4] 藏玉婷,張楊,王彬,等.小鵝瘟卵黃抗體效價與攻毒保護相關(guān)性試驗[J].廣東畜牧獸醫(yī)科技,2015,40（3）:39-40.

[5] 劉吉山,肖躍強,于雪,等.麻鴨感染Ⅰ群禽腺病毒4型的致病及防治研究[J].中國獸醫(yī)科學,2017（9）:1 112-1 117.

[6] 孫德君,柴華,馮艷男,等.禽Ⅰ群腺病毒血清4型感染的診斷與防治[J].獸醫(yī)導刊,2017（15）:29-30.

[7] 張玉霞,袁小遠,徐懷英,等.雞腺病毒Ⅰ群血清4型的分離鑒定與防治[J].家禽科學,2016（10）:29-30.

[8] 王慧,程小果,郭建友,等.近期雞群I群禽腺病毒的流行與防治[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊,2016（2）:62-63.

[9] 李敏,馬玉峰,楊振.Ⅰ型禽腺病毒在我國雞群中的流行情況和防控措施[J].獸醫(yī)導刊,2017（1）:30-32.