β－catenin與Survivin在鼻咽癌組織中的表達及其相關性

溫宗華，周秀堅 （廣西壯族自治區人民醫院病理科，廣西 南寧 530021）

Survivin是一種凋亡抑制蛋白，在腫瘤組織中的過表達與生存期縮短、預后不良、對治療抵抗和加速復發有關［1］。βcatenin是Wnt／β-catenin信號通路的關鍵分子，與多種腫瘤惡性進展密切相關［2］。最近有研究結果表明β-catenin和Survivin在促進腫瘤的發生、發展過程中具有協同促進作用［3-4］，而β-catenin和Survivin在鼻咽癌中的表達及其相關性研究較少。本研究采用免疫組化法檢測β-catenin和Survivin在鼻咽癌組織中的表達，并分析兩者在鼻咽癌組織表達的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集我院病理科2016年～2017年存檔的鼻咽癌石蠟組織標本94例，均經臨床病理診斷為未分化非角化性癌，均未合并其他惡性腫瘤，另選取正常鼻咽黏膜石蠟組織標本40例作為對照組。

1.2 研究方法：免疫組織化學染色采用EnVision兩步法，檢測抗體包括β-catenin和Survivin，均購自北京中杉金橋生物技術公司，根據抗體說明書及實驗室規范進行操作，常規設立陽性和陰性對照。

1.3 觀察指標以兩組研究對象的β-catenin和Survivin蛋白表達情況為觀察指標，β-catenin表達位于胞膜，并呈連續棕褐色線性為正常表達，胞膜不連續和胞質染色或胞質、胞核同時染色或不著色均為異位表達，Survivin以細胞核和細胞質出現明顯的棕黃色顆粒為陽性細胞標志。

1.4 統計學方法：采用SPSS17.0統計軟件進行統計分析，各組間蛋白表達差異采用χ2檢驗，Spearman相關分析β-catenin和Survivin蛋白的相關性，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 β-catenin和Survivin在鼻咽癌及正常組織中的表達情況：94例NPC組織β-catenin異位表達率為72.3%（68／94），40例正常鼻咽黏膜的陽性表達率為12.5%（5／40），NPC患者中β-catenin的異位表達率明顯高于正常鼻咽黏膜，兩者之間差異有統計學意義（P＜0.05）。Survivin主要定位于細胞核內，94例NPC組織Survivin的陽性表達率為68.1%（64／94），40例正常鼻咽黏膜的陽性表達率為17.5%（7／40），NPC患者中Survivin的陽性表達率明顯高于正常鼻咽黏膜，兩者之間差異有統計學意義（P＜0.05）。見圖1。

2.2 β-catenin和Survivin在鼻咽癌中表達的相關性：β-catenin異位表達率和Survivin陽性表達在鼻咽癌呈正相關，兩者共陽性53例，共陰性15例，僅Survivin陽性11例，僅β-catenin陽性15例，r＝0.342，差異有統計學意義（P＜0.05）。

圖1 （A）正常鼻咽黏膜上皮表達β-catenin，呈細胞膜的連續棕褐色線性染色EnVision法高倍放大；（B）鼻咽癌瘤細胞異位表達β-catenin，呈胞膜不連續和胞質染色 EnVision法高倍放大；（C）正常鼻咽黏膜上皮Survivin呈陰性表達EnVision法 高倍放大；（D）鼻咽癌瘤細胞Survivin陽性表達，呈胞膜胞核染色EnVision法高倍放大

3 討論

鼻咽癌發生發展的分子機制尚未完全闡明。有研究發現Wnt／β-catenin信號通路的激活參與了鼻咽癌的發生發展［5］，β-catenin在鼻咽癌組織存在異位表達［6］。Wnt信號通路是決定細胞增殖和凋亡的關鍵通路，它的閉合決定著細胞的增殖分化以及惡性腫瘤發生發展的過程。β-catenin是Wnt信號通路的關鍵調控因子，其胞質積聚并核轉位是通路的關鍵步驟。Wnt信號激活時，β-catenin在胞質中大量增殖和核轉位，啟動相應靶基因的轉錄，在細胞的增殖、分化、轉移和凋亡中起重要作用［7］。Survivin是凋亡抑制蛋白（IAP）家族中的成員之一，于1997年由耶魯大學的Altieri等人首次在人類基因組庫中篩選分離出來，Survivin蛋白分子量在IAP家族中最小，僅為16.5kDa，但其具有強大的抗凋亡作用，是經典Wnt信號通路的下游靶基因［8］。已有大量文獻證實Survivin作為協同基因參與了Wnt／β-catenin信號通路［3-4］，也有文獻發現它在鼻咽癌存在高表達［9］。鼻咽癌中Survivin是否也和其他腫瘤一樣，參與了Wnt／β-catenin信號通路，未見報道。因此本研究采用免疫組織化學法檢測94例鼻咽癌及正常黏膜組織中Survivin和β-catenin蛋白表達情況。結果顯示，鼻咽癌組織Survivin的陽性表達率明顯高于正常黏膜組織，兩者之間差異有統計學意義（P＜0.05），鼻咽癌組織β-catenin的異位表達率明顯高于正常黏膜組織，兩者之間差異有統計學意義（P＜0.05）。鼻咽癌組織Survivin表達和β-catenin異位表達在呈正相關（r＝0.342，P＜0.05）。以上結果表明，Survivin和β-catenin在鼻咽癌的發生發展中起到協同促進作用，這一結果與其他作者在其他類型腫瘤的研究結果一致［10-11］，但具體的作用機制有待進一步研究。

［1］ Fukuda S，Pelus L M.Survivin，a cancer target with an emerging role in normal adult tissues［J］.Mol Cancer Ther，2006，5（5）：1087.

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［3］ Bongiovanni L，D′Andrea A，Porcellato I，et al.Canine cutaneous melanocytic tumours：significance of beta-catenin and survivin immunohistochemical expression［J］.Vet Dermatol，2015，26（4）：259.

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［5］ Wang Z，Wang Y，Ren H，et al.ZNRF3 Inhibits the Invasion and Tumorigenesis in Nasopharyngeal Carcinoma Cells by Inactivating the Wnt／beta-Catenin Pathway［J］.Onclolgy Research，2017，25（4）：571.

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［10］ Bongiovanni L，D′Andrea A，Porcellato I，et al.Canine cutaneous melanocytic tumours：significance of beta-catenin and survivin immunohistochemical expression［J］.Vet Dermatol，2015，26（4）：259.

［11］ Habibie，Yokoyama S，Abdelhamed S，et al.Survivin suppression through STAT3／beta-catenin is essential for resveratrol-induced melanoma apoptosis［J］.Int J Oncol，2014，45（2）：895.