電感耦合等離子體發射光譜法測定原料藥(異丙托溴銨)中的硼雜質含量

(北京市理化分析測試中心，有機材料檢測技術與質量評價北京市重點實驗室，北京市科學技術研究院分析測試技術重點實驗室，北京, 100094)

原料藥異丙托溴銨(ipratropium bromide), 白色結晶性粉末,CAS：66985-17-9，分子式：C20H30BrNO3，相對分子量：412，制成氣霧劑用于支氣管痙攣、喘息癥狀，并可用于防治哮喘[1-5]。在原料藥合成加工過程中會有硼元素雜質的殘留。目前藥品中元素雜質殘留的測試方法主要是電感耦合等離子體發射光譜法(Inductively Coupled Plasma-Atomic Emission Spectrometry, ICP-AES)、原子吸收光譜法(Atomic Absorption Spectrometry, AAS)、電感耦合等離子體質譜法(Inductively Coupled Plasma-Mass Spectrometry, ICP-MS)等[6-110]。ICP-MS法成本高，儀器測定方法復雜，對樣品基體和前處理要求高，不適合于藥品研發生產企業原料藥中痕量催化劑殘留的日常質量控制。AAS法測硼需要基體改進劑，數據穩定性差，費時費力。ICP-AES法測定限可達到mg/kg級，能滿足藥物中微量雜質元素測定的要求，具有簡便、干擾少、穩定、快速等優點。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

ICAP 6300電感耦合等離子體發射光譜儀(美國Thermo公司)；DigiBlock EHD36電熱石墨消解儀(萊伯泰科公司)；電子天平(十萬分之一，賽多利斯儀器公司)。

異丙托溴銨：某藥廠提供；硼標準樣品：規格1000mg/L，編號GSB G 62003-90，國家鋼鐵材料測試中心；優級純硝酸：MERCK公司；高氯酸：國藥集團。

1.2 樣品前處理

稱取異丙托溴銨樣品0.200 g于聚四氟乙烯消解管中，加入10 mL 優級純硝酸，電熱石墨消解儀中120 ℃加熱消解至近干后，再加入2 mL優級純高氯酸，趕酸至樣品澄清透明，定容至10 mL，過濾，同時做樣品空白。

1.3 實驗過程

1.3.1 儀器操作條件

儀器操作參數如下：功率：1150 W；泵速：50 rpm；輔助氣流量：0.5 L/min；垂直觀測高度：15.0 mm；元素波長：249.773 nm。

1.3.2 標準曲線確定

標準曲線：將1000 mg/L的硼標準溶液逐級稀釋至約10.0，5.0，2.0，1.0，0.5，0.1mg/L。標準曲線方程為y= 2583.544x-2.900；R2=0.9999。

2 實驗結果與討論

以異丙托溴銨樣品做方法學研究，分別做樣品精密度實驗、平行性實驗和回收率實驗。按照中華人民共和國藥典2015年版四部《藥品質量標準分析方法驗證指導原則》之規定如下：

檢出限計算公式：LOD=3.3*δ/S

定量限計算公式：LOD=10*δ/S

計算方法得出方法檢出限為45.05μg/kg，方法定量限為136.5μg/kg。

2.1 專屬性實驗

連續進11針空白溶液，得出結果如表1。

2.2 精密度實驗

2.2.1 儀器的精密度實驗

取溶液濃度約1.000mg/L的硼溶液，連續測定20次強度值，做硼元素的精密度實驗結果，計算出RSD為0.237%，(表2)。

表1 專屬性結果表

表2 硼溶液精密度實驗表

2.2.2 方法的精密度實驗

稱取異丙托溴銨樣品0.200g于消解管中，消解定容過濾后進樣測試，做樣品中硼元素的含量的精密度實驗，結果如表3所示。計算出RSD為0.330%。

表3 異丙托溴銨樣品精密度實驗表

2.3 回收率實驗

稱取異丙托溴銨樣品0.200g左右，分別加入0.800、1.000、1.200mg硼(分別做3個平行)，對其進行回收率實驗，回收率結果見表4。

表4 回收率測定結果(n=9)

2.4 樣品測定與實驗結果

通過上述對異丙托溴銨進行平行性和回收率實驗，結果表明：該測試方法可以用于硼元素的測定。利用所建立的方法分別測試3個批次原料藥中硼元素，結果見表5，表明不同批次樣品結果穩定。

表5 3個批次樣品中硼含量測定結果

3 結論

采用電感耦合等離子體發射光譜儀測定異丙托溴銨中硼的含量，進行了原料藥(異丙托溴銨)中硼雜質檢驗方法開發的研究。通過配制硼系列標準溶液，驗證標準曲線方程和相關系數，確定該方法的相關系數r均為0.9999。利用該檢測方法，硼回收率較好，在97%～99%之間。方法檢出限為45.05μg/kg，方法定量限為136.5μg/kg。精密度實驗RSD在2%以內。本實驗所建立的方法可以用于原料藥(異丙托溴銨)中硼雜質殘留的測定，為藥品的質量控制提供了依據。

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