規(guī)?；i場(chǎng)O型口蹄疫抗體水平監(jiān)測(cè)與分析

張俊波，印雙紅 ，陸安法 ，白 明，陸志松

（1.銅仁學(xué)院農(nóng)林工程與規(guī)劃學(xué)院（銅仁市文化科技產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新研究中心），貴州 銅仁 554300； 2.銅仁學(xué)院大健康學(xué)院，貴州 銅仁 554300；3.銅仁市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 銅仁 554300）

0　引言

口蹄疫( Foot-and-mouth disease， FMD) 是 由 口 蹄 疫 病 毒(Foot-and-mouth disease virus，F(xiàn)MDV)所引起的偶蹄動(dòng)物的一種急性高度接觸性傳染病[1]。該病一旦發(fā)生可呈暴發(fā)性流行，其中包括牛、水牛、豬、綿羊、山羊和駱駝等20個(gè)科的70多種家養(yǎng)和野生哺乳動(dòng)物容易受其感染[2]。據(jù)調(diào)查顯示與一般傳染病不同的是它較易從一種動(dòng)物傳給另一種動(dòng)物，且由于病毒型不同 ，因此，每個(gè)單獨(dú)的病毒型都可引起動(dòng)物的一次發(fā)病，新流行地區(qū)發(fā)病率可達(dá)100%，老疫區(qū)發(fā)病率在50 %以上[3]。在世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)與聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織 (FAO)的排行榜上口蹄疫就穩(wěn)居“A類動(dòng)物傳染病之首”的位置[4]。早在14世紀(jì)的時(shí)候意大利學(xué)者第一次描述了FMD，1898年，Loeffler等人證明了口蹄疫的病原體為濾過性的病毒，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)口蹄疫的病原體主要有7個(gè)血清主型（O型、A型、C型、亞洲Ⅰ型、南非Ⅰ型、南非Ⅱ型、南非Ⅲ型），2013年在我國(guó)發(fā)生的口蹄疫疫情主要是O型和A型[5，6]。

目前，F(xiàn)MD在世界的分布很廣，是國(guó)際間相互進(jìn)行傳播流行蔓延的世界性傳染病，幾乎所有的國(guó)家都有記載，在1514年首次在意大利報(bào)道以來，最近的一個(gè)世紀(jì)就先后在美國(guó)、墨西哥、加拿大、丹麥、中國(guó)等國(guó)家和地區(qū)出現(xiàn)，給全球畜牧業(yè)和世界貿(mào)易帶來嚴(yán)重的危害，每年用于預(yù)防和損失賠償?shù)暮馁Y就達(dá)60～120億美元，2012年世界動(dòng)物衛(wèi)生組織的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示：全世界已經(jīng)消滅口蹄疫的國(guó)家69個(gè)，新西蘭則是歷史上從未發(fā)生口蹄疫的國(guó)家[7]。我國(guó)流行的血清型（O型、A型）給口蹄疫防治提出巨大的要求，且由于造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失和社會(huì)影響，歷來受到各國(guó)政府的關(guān)注，針對(duì)口蹄疫的治療尚無有效藥物，疫苗免疫是最有效的一個(gè)方法[8]。業(yè)界內(nèi)最為關(guān)心的話題是豬群口蹄疫的免疫效果，口蹄疫的免疫效果能直接影響豬群的健康狀況，體現(xiàn)出抗體水平和保護(hù)率高低的差異，而影響免疫效果的原因有很多，如疫苗種毒的抗原性、疫苗的質(zhì)量、豬群的健康狀況等，我國(guó)豬群現(xiàn)使用的口蹄疫滅活(合成) 疫苗普遍存在免疫原性欠佳的情況，養(yǎng)豬場(chǎng)采取多次強(qiáng)化免疫的方法來提高抗體水平，但如何使各生理階段的豬只都達(dá)到足夠高的抗體水平，在什么情況下要進(jìn)行多次強(qiáng)化免疫等方面未達(dá)成共識(shí)[9]。經(jīng)調(diào)查貴州地區(qū)對(duì)豬O型口蹄疫抗體水平監(jiān)測(cè)的統(tǒng)計(jì)較少，貴州累計(jì)有三次監(jiān)測(cè)統(tǒng)計(jì)：2007年文明等人采用LB-ELISA方法對(duì)貴陽(yáng)地區(qū)家畜口蹄疫免疫抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果分析[10]。2009年秋季動(dòng)物防疫期間，劉波等人采用口蹄疫正向間接血凝試驗(yàn)對(duì)黎平縣豬口蹄疫免疫抗體進(jìn)行監(jiān)測(cè)及分析[10]；2013年6月，趙福崴等人在春季動(dòng)物疫病集中免疫期間采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)遵義市豬O型口蹄疫進(jìn)行監(jiān)測(cè)[11]。

養(yǎng)殖業(yè)是銅仁地區(qū)一大特色產(chǎn)業(yè)，且養(yǎng)豬作為當(dāng)?shù)鼐用褚粋€(gè)經(jīng)濟(jì)來源，大多數(shù)人以豬肉為主要肉食，由于地方經(jīng)濟(jì)比較落后，豬場(chǎng)規(guī)模不大，一般屬于小規(guī)模豬場(chǎng)(＞100頭)，豬口蹄疫又是嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的傳染病，且銅仁市各個(gè)縣城和市區(qū)的豬肉市場(chǎng)主要是由這些豬場(chǎng)提供貨源，所以這些豬場(chǎng)的豬是否健康直接影響各個(gè)縣城和市區(qū)人民的健康。養(yǎng)豬業(yè)遵循“預(yù)防為主，防重于治”的有效方針，所以全面了解銅仁市豬口蹄疫免疫水平至關(guān)重要。本次調(diào)查于2015年5月、11月對(duì)銅仁市8個(gè)縣、2區(qū)的各鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）隨機(jī)抽取17個(gè)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)內(nèi)保育豬、肥育豬、公豬、母豬、哺乳仔豬進(jìn)行春、秋兩次豬O型口蹄疫血清學(xué)調(diào)查工作，收集數(shù)據(jù)，比較不同地區(qū)春季和秋季的免疫抗體水平情況，為銅仁地區(qū)的口蹄疫的防治提供參考。

1　材料與方法

1.1 血清樣品準(zhǔn)備

隨機(jī)抽取的銅仁市8縣2區(qū)共17個(gè)規(guī)?；i場(chǎng)定點(diǎn)場(chǎng)，每個(gè)豬場(chǎng)隨機(jī)采取30份經(jīng)口蹄疫疫苗免疫接種21 d以上的育肥豬108份、保育豬117份、哺乳仔豬121份、母豬60份、公豬104份豬血清樣本，春、秋各采取510份，見表1。

1.2 材料和儀器

1.2.1 試劑與器材

豬O型口蹄疫病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒（由武漢某公司提供，批號(hào)，20150412，20150410，20151002）。

1.2.2 主要儀器

振動(dòng)器；自動(dòng)酶標(biāo)儀（美國(guó)BioTek儀器有限公司）；單道微量移液槍（eppendorf公司）；8道微量移液槍（Thrmo公司）；恒溫培養(yǎng)箱（北京市光明醫(yī)療儀器廠）。

1.3 樣品采集時(shí)間、方法及儲(chǔ)存

1.3.1 采集時(shí)間

血清共分為兩次均等采集，分別是2015年5月和2015年11月。

1.3.2 樣品采集方法及儲(chǔ)存

對(duì)選定的豬要進(jìn)行前腔靜脈采血，具體方法分為3個(gè)步驟，如下：

1）豬的保定

對(duì)中大豬的保定：用保定繩套住豬的上腭，將繩子斜向上，至豬的頸部皮膚充分崩緊，左右顯出兩個(gè)較深的窩。對(duì)仔豬的保定：直接仰臥。

2）進(jìn)針采血

將豬保定后，選取左右兩個(gè)窩中較深的一個(gè)作為進(jìn)針點(diǎn)，選定進(jìn)針點(diǎn)，用碘酊消毒，手持一次性采血盛血器，從對(duì)側(cè)肩胛骨呈 45°方向刺入，抽取5 mL血液。

3）血清制備

抽取血液完后立即置于30℃左右環(huán)境，傾斜靜置半小時(shí)左右，每份吸取血清1 mL于 1.5 mL EP 管，要求血清清亮無溶血，做好標(biāo)記，-20 ℃保存。

1.4 試驗(yàn)方法與結(jié)果判定

1.4.1 間接ELISA原理

在試驗(yàn)中加入稀釋的對(duì)照血清和待測(cè)血清，經(jīng)溫育后，若樣品中含有豬口蹄疫病毒VP1的特異性抗體，則與包被板上的抗原結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分，再加酶標(biāo)二抗，與包被板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合，再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶結(jié)合物，在每孔中加入TMB底物液，與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物，再加入HF溶液終止反應(yīng)后，用酶標(biāo)儀630 nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的測(cè)OD630值，

1.4.2 試驗(yàn)操作步驟

1）解凍。取出冷凍的待測(cè)血清置于室溫（20～25 ℃），充分解凍后，震蕩混勻以備用。

2）將冷藏保存的試劑盒放置室溫，使其恢復(fù)至室溫（20～25 ℃）備用。

3）使用前，將恢復(fù)至室溫（25 ℃）的濃縮洗滌液搖動(dòng)并使沉淀溶解（最好在37 ℃水中加熱5～10 min），然后根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋盛于燒杯中備用。做好這些準(zhǔn)備工作即可進(jìn)行檢測(cè)，流程如下：

4）取抗原包被板（根據(jù)樣品的多少，可拆分使用），每孔加入稀釋好的洗滌液200 μL，靜置3 min倒掉液體，并在吸水紙上拍干，共計(jì)洗板2次。在分別將稀釋好的待測(cè)血清和對(duì)照各取100 μL加入到抗原包被板孔中，待檢樣品做1孔，陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照各設(shè)2孔，輕輕振勻孔中樣品（勿溢出），置37 ℃溫育30min。

5）甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀釋好的洗滌液200 μL、靜置3 min倒掉，再在吸水紙上拍干，共計(jì)洗滌5次。

6）每孔加入羊豬酶標(biāo)二抗100 μL，置37℃溫育30min。

7）洗滌5次，方法同5），每次在干凈吸水紙上拍干。

8）按步驟6）的操作方法再次進(jìn)行洗滌。

9）洗滌完后，充分拍干包被孔中的液體，先后加入底物A50 μL，再加底物50 μL，混勻，室溫（20～25 ℃）避光顯色10 min。

10）顯色后每孔加入終止液50 μL，10 min內(nèi) 用 酶 標(biāo) 儀 測(cè) 定630 nm波長(zhǎng)的吸光度值（測(cè)定前在振蕩器上輕輕振動(dòng)一下）。

表1　采集信息統(tǒng)計(jì)表

1.4.3 結(jié)果判定

在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔的OD630nm值。試驗(yàn)成立的條件是陽(yáng)性對(duì)照平均OD630nm值均≥0.8，陰性對(duì)照平均OD630nm值＜0.3。樣品OD630nm值≥0.4時(shí)判為陽(yáng)性。樣品OD630nm值＜0.4，判為陰性。嚴(yán)格按照試劑盒使用說明書上的步驟測(cè)定其樣品OD值。根據(jù)農(nóng)業(yè)部規(guī)定免疫合格率≥70.00%為免疫合格。

1.4.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

用Excel軟件進(jìn)行原始的數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析。

2　結(jié)果及分析

2.1 不同季節(jié)豬O型口蹄疫抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果與分析

2.1.1 不同季節(jié)豬O型口蹄疫抗體免疫水平監(jiān)測(cè)結(jié)果分析

檢測(cè)結(jié)果見表2和表3，春季陽(yáng)性414份，平均合格率為81.83%，從分地區(qū)來看免疫合格率較高的有思南縣91.67%、石阡縣91.67%，江口縣93.33%，免疫合格率較低的為松桃縣68.33%、德江縣65.00%。分地區(qū)免疫合格率總趨勢(shì)為江口縣＞（思南縣、石阡縣）＞碧江區(qū)＞沿河縣＞（印江縣、萬山區(qū)）＞玉屏縣＞松桃縣＞德江縣。此結(jié)果說明春季監(jiān)測(cè)的豬O型口蹄疫抗體，平均合格率為82.67%大于農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)（≥70.00%），只有碧江區(qū)、萬山區(qū)、思南縣、印江縣、石阡縣、沿河縣、江口縣、玉屏縣8個(gè)地區(qū)免疫合格率達(dá)到農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)，而松桃縣（68.33%）、德江縣（67.50%）免疫合格率未達(dá)到農(nóng)業(yè)部的標(biāo)準(zhǔn)。秋季陽(yáng)性435份，平均免疫合格率為85.00%，從分地區(qū)去來看石阡縣免疫合格率，最高96.67%，最低合格率松桃縣70.00%，免疫合格率總趨勢(shì)為沿河縣＞石阡縣＞思南縣＞碧江區(qū)＞江口縣＞印江縣＞玉屏縣＞萬山區(qū)＞德江縣＞松桃縣。此結(jié)果說明秋季監(jiān)測(cè)的豬O型口蹄疫抗體，平均合格率87.58%達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)（≥70.00%），且各地區(qū)的免疫合格率均≥70.00%，抽取的各地區(qū)豬O型口蹄疫免疫效果較好。

2.1.2 不同季節(jié)豬O型口蹄疫免疫檢測(cè)結(jié)果比較分析

經(jīng)比較，春秋兩季各檢測(cè)的510份豬血樣中，首先春季陽(yáng)性414份，秋季陽(yáng)性435份，平均合格率春季（81.83%）＜秋季（85.00%），免疫合格率呈上升的趨勢(shì)（秋季相對(duì)于春季上升了3.17%），免疫合格率只有碧江區(qū)、萬山區(qū)、思南縣、印江縣、石阡縣、沿河縣、江口縣、玉屏縣8個(gè)地區(qū)免疫合格率達(dá)到農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)，而松桃縣（68.33%）、德江縣（65.00%）免疫合格率未達(dá)到農(nóng)業(yè)部的標(biāo)準(zhǔn)，即春季監(jiān)測(cè)豬O型口蹄疫抗體有兩個(gè)地區(qū)出現(xiàn)了免疫未達(dá)到國(guó)家農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，而秋季監(jiān)測(cè)的各個(gè)地區(qū)都達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，此情況說明在春季的基礎(chǔ)上部分地區(qū)的豬O型口蹄疫免疫情況有所改善，如在春季監(jiān)測(cè)的松桃縣、德江縣兩個(gè)地區(qū)的免疫合格率分別為68.33%、65.00%并未達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，而在秋季監(jiān)測(cè)結(jié)果中松桃縣、德江縣免疫合格率分別達(dá)到70.00%、75.00%。此結(jié)果說明2015年兩次監(jiān)測(cè)豬O型口蹄疫抗體中，各地區(qū)秋季豬O型口蹄疫免疫抗體水平要高于春季豬O型口蹄疫免疫抗體的水平。

表2　春季豬O型口蹄疫檢測(cè)結(jié)果

表3　春季豬O型口蹄疫檢測(cè)結(jié)果

2.2 不同類型豬O型口蹄疫抗體水平結(jié)果分析

對(duì)兩次檢測(cè)的血清樣品不同類型豬O型口蹄疫抗體分析，如表4。春季平均陽(yáng)性率74.10%，公豬陽(yáng)性率94.23%，陽(yáng)性率最高，其次是母豬77.78%，依次是育肥豬72.22%、保育豬70.08%、哺乳仔豬56.20%。秋季平均陽(yáng)性率81.70%，母豬陽(yáng)性率95.56%，陽(yáng)性率最高，其次是育肥豬89.81%，然后依次是公豬88.46%、保育豬74.35%、哺乳仔豬60.33%。從整體水平上分析，春、秋季各類型豬陽(yáng)性水平較高，哺乳仔豬的陽(yáng)性率較低。

3　討論

3.1 口蹄疫的傳播途徑及防御措施

口蹄疫是由口蹄疫病毒所引起的偶蹄動(dòng)物急性高度接觸性傳染病，其危害的動(dòng)物種類非常之多，傳播速度極快，是其他動(dòng)物疫病所無法比擬的，目前我國(guó)所采用預(yù)防口蹄疫的一個(gè)重要手段是通過免疫接種口蹄疫疫苗來提高畜群整體的抗體水平，而免疫抗體水平的監(jiān)測(cè)是評(píng)估畜群免疫效果的一種重要方式[12]，檢測(cè)結(jié)果中秋季平均免疫合格率85.00%高于春季平均免疫合格率81.83%，可能是5月份相對(duì)于11月份溫度高，空氣濕度不同導(dǎo)致的，口蹄疫傳播的途徑有空氣傳播和接觸傳播兩種，即可經(jīng)吸入、攝入、外傷、人工授精及近距離接觸而傳染，因此要特別注意豬群氣源、圈舍、牧場(chǎng)、集貿(mào)市場(chǎng)、運(yùn)輸車輛，針對(duì)口蹄疫的防治措施每個(gè)國(guó)家根據(jù)本國(guó)實(shí)際情況采取封鎖、撲殺、焚燒措施和制定出相應(yīng)的預(yù)防、控制、撲滅措施，我國(guó)口蹄疫的應(yīng)對(duì)免疫預(yù)防的核心措施是對(duì)口蹄疫易感動(dòng)物有針對(duì)性地接種疫苗，提高動(dòng)物抗感染能力，斷絕病毒繁殖機(jī)會(huì)，撲殺病畜及同群畜，而病畜及其同群畜是最危險(xiǎn)的傳染源[13]。

表4　不同類型豬O型口蹄疫抗體陽(yáng)性率表

3.2　2015年銅仁地區(qū)豬O型口蹄疫血清學(xué)調(diào)查情況

銅仁地區(qū)2015年豬O型口蹄疫抗體水平監(jiān)測(cè)時(shí)間分別是5月與11月，在17個(gè)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)，分別隨機(jī)抽取采自碧江區(qū)、萬山區(qū)、思南縣、松桃縣、德江縣、印江縣、石阡縣、沿河縣、江口縣、玉屏縣8縣2區(qū)的豬血清樣品，共計(jì)1020份，免疫合格份數(shù)849份，春季陽(yáng)性414份，平均免疫合格率81.83%，秋季陽(yáng)性435份，平均免疫合格率85.00%，春季、秋季平局免疫合格率均大于農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)（≥70.00%），表明2015年銅仁地區(qū)免疫效果較好。不同階段豬O型口蹄疫免疫合格率變化情況，春季陽(yáng)性率56.20%～94.23%，公豬陽(yáng)性率最高；秋季陽(yáng)性率60.33%～95.56%，母豬陽(yáng)性率最高，兩次監(jiān)測(cè)都說明哺乳仔豬免疫水平較低。

3.3 銅仁地區(qū)豬O型口蹄疫抗體水平差異較大

規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)重視豬O型口蹄疫抗體監(jiān)測(cè)，開展抗體監(jiān)測(cè)的目的不僅僅是診斷，更主要的是評(píng)價(jià)豬群的免疫狀況，并根據(jù)其監(jiān)測(cè)結(jié)果對(duì)免疫方案進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整或提供一些預(yù)警 ，本次對(duì)銅仁地區(qū)17個(gè)規(guī)模場(chǎng)的監(jiān)測(cè)中，春季平均免疫合格率81.33%，秋季平均免疫合格率85.00%，趨勢(shì)表現(xiàn)為秋季免疫合格率高于春季，且平均免疫合格率均達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，2015年5月楊先富等人對(duì)黔東南州16個(gè)縣(市) 的16個(gè)規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)和16個(gè)自然村散養(yǎng)生豬開展了血清學(xué)調(diào)查中，對(duì)豬O型口蹄疫免疫抗體水平的檢測(cè)情況分析用平均免疫合格率（規(guī)模場(chǎng)豬O型口蹄疫免疫血清免疫抗體平均合格率為96.55%，散養(yǎng)戶免疫抗體平均合格率為73.91%）的變化趨勢(shì)來確定豬O型口蹄疫的抗體水平[14]，由表3和表4的檢測(cè)結(jié)果不同地區(qū)的免疫合格率不相同，其中春季分地區(qū)碧江區(qū)88.33%（53/60）萬山區(qū)80.00%（24/30）、思南縣91.67%（55/60）、松桃縣68.33%（41/60）、德江縣65.00%（39/60）、印江縣80.00%（32/40）、石阡縣91.67%（55/60）、沿河縣83.33%（25/30)、江口縣93.33%（28/30)、 玉 屏 縣 76.67%（46/60），秋季分地區(qū)合格率碧江區(qū)91.67%（55/60）、萬山區(qū)83.33%（25/30）、思南縣93.33%（56/60）、松桃縣70.00%（42/60）、德江縣75.00%（30/40）、印江縣86.67%（52/60）、石阡縣96.67%（58/60），各地區(qū)的免疫合格率明顯不相同，張智鵬等2012年10月，采用正向間接血凝試驗(yàn)對(duì)漢中轄區(qū)內(nèi)的生豬進(jìn)行了口蹄疫免疫抗體監(jiān)測(cè)，得出規(guī)模場(chǎng)與散養(yǎng)戶的合格率顯示不同地區(qū)的合格率不相同的情況[15]，因此要讓各個(gè)地區(qū)的免疫情況都處在相同水平上是達(dá)不到的。

3.4 部分地區(qū)豬O型口蹄疫抗體水平有待提高

檢測(cè)結(jié)果顯示，部分地區(qū)免疫合格率較低，如在春季監(jiān)測(cè)的松桃縣、德江縣兩個(gè)地區(qū)的免疫合格率分別為68.33%、67.50%，并未達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，說明免疫程序的某環(huán)節(jié)未做到位，筆者認(rèn)為有幾下原因：1）在免疫程序及防治上不科學(xué)或者執(zhí)行力不夠，因?yàn)榭茖W(xué)合理的免疫程序及防治能夠保證免疫成功率，也能確保其他動(dòng)物免受疫病的感染，從而使畜群抵御口蹄疫病毒的能力得到加強(qiáng)，避免免疫陷入混亂而導(dǎo)致免疫失敗的結(jié)果；2）銅仁市的養(yǎng)豬場(chǎng)規(guī)模不大，針對(duì)豬口蹄疫的防范意識(shí)薄弱，相關(guān)的技術(shù)人員也不健全，且對(duì)豬口蹄疫的重視程度不高，使得疫苗免疫的方式或操作不規(guī)范，免疫效果相應(yīng)的也就降低；3）是疫苗質(zhì)量不過關(guān)，運(yùn)輸與儲(chǔ)藏不當(dāng)而引起的疫苗失效[16]。2013年熊勝利等采用正向間接血凝試驗(yàn)對(duì)貴州省某規(guī)模場(chǎng)豬場(chǎng)O型口蹄疫春秋兩防免疫抗體監(jiān)測(cè)及野毒檢測(cè)顯示不同地區(qū)的抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果，一些散養(yǎng)戶的免疫合格率較低，針對(duì)免疫合格率低的地區(qū)，需要加強(qiáng)免疫[17]，如春季中出現(xiàn)松桃縣（68.33%）、德江縣（67.50%）兩個(gè)縣免疫合格率未達(dá)到農(nóng)業(yè)部的標(biāo)準(zhǔn)，而秋季監(jiān)測(cè)的各個(gè)地區(qū)都達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，此情況說明在春季的基礎(chǔ)差各地區(qū)的豬O型口蹄疫免疫情況有所改善，但對(duì)于免疫合格率較低的地區(qū)，銅仁市的養(yǎng)豬場(chǎng)應(yīng)該確立完善的免疫監(jiān)管制度，且根據(jù)檢測(cè)的大部分地區(qū)雖然合格率雖達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，但大部分地區(qū)都未達(dá)到100%的合格率，對(duì)這些地區(qū)也應(yīng)該建議實(shí)施強(qiáng)化免疫[18]。并且在科學(xué)飼養(yǎng)管理的基礎(chǔ)上，銅仁地區(qū)規(guī)模場(chǎng)要建立健全防疫衛(wèi)生制度，制定科學(xué)、規(guī)范、具有針對(duì)性的本地免疫程序，提高免疫效果[19]。

3.5 不同階段的豬O型口蹄疫抗體水平，哺乳仔豬抗體水平明顯較低

對(duì)不同類型豬O型口蹄疫抗體水平結(jié)果分析，得出對(duì)兩次檢測(cè)的血清樣品中春季公豬、母豬、育肥豬、保育豬、哺乳仔豬陽(yáng)性率分別是94.23%、77.78%、72.22%、70.08%、56.20%。秋季母豬、育肥豬、公豬、保育豬、哺乳仔豬陽(yáng)性率分別是95.56%、89.81%、88.46%、74.35%、60.33%。春、秋兩次檢測(cè)哺乳仔豬的陽(yáng)性率都比較低，這與張智鵬等在漢中地區(qū)免疫抗體與結(jié)果分析中報(bào)道不同階段豬O型口蹄疫抗體仔豬免疫合格率80.15%的結(jié)論不一致，而檢測(cè)的結(jié)果顯示春季哺乳仔豬的陽(yáng)性率56.20%，秋季哺乳仔豬的陽(yáng)性60.33%，哺乳仔豬免疫因受母源抗體的干擾，就很容易造成免疫失敗，到了保育階段或育肥階段，若不及時(shí)了解抗體水平進(jìn)行補(bǔ)免，再加上環(huán)境消毒不徹底，就極易造成口蹄疫病毒的感染，因此應(yīng)該落實(shí)每一個(gè)階段生豬的免疫工作，齊向濤等采用ELISA法對(duì)分別采集自北疆地區(qū)3個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)公豬、后備母豬、哺乳母豬、仔豬等不同階段豬群的血清進(jìn)行豬O型口蹄疫檢測(cè)，結(jié)果顯示，仔豬的陽(yáng)性率就比較低，針對(duì)這一情況提出建議：30日齡之前的仔豬母源抗體依然較高，此時(shí)接種會(huì)造成免疫抑制，所以此階段不能進(jìn)行首次免疫，應(yīng)該把首次免疫的時(shí)間推至40日齡，這樣抗體水平不至于太低[20]。

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