有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液對(duì)藍(lán)莓營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)和抗氧化作用的影響

李春霞，劉偉，陳凌云，姜文儀，蔣光月，黃蓓*

1(安徽大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，安徽 合肥，230601) 2(安徽省農(nóng)科院，安徽 合肥，230031)

藍(lán)莓又名篤斯、藍(lán)漿果，屬杜鵑花科，越橘屬植物，原產(chǎn)和主產(chǎn)于美國(guó)又被稱(chēng)為美國(guó)藍(lán)莓。我國(guó)藍(lán)莓主要以北高叢、半高叢、矮叢以及兔眼藍(lán)莓為主，如布里吉塔、芭爾德溫等，種植面積約47萬(wàn)畝，藍(lán)莓產(chǎn)量?jī)H為3.133萬(wàn)h2。藍(lán)莓果實(shí)中除了常規(guī)的酸和VC外，富含VE、VA、VB、SOD、蛋白質(zhì)、花青苷、食用纖維以及豐富的K、Fe、Zn、Ca等礦質(zhì)元素,且低糖、低脂肪，因此被國(guó)際糧農(nóng)組織列為人類(lèi)5大健康食品之一，被譽(yù)為“漿果之王”[1-2]。

硒元素是在1918年由瑞典化學(xué)家JBERZELIUZ發(fā)現(xiàn)，并在1973年被世界衛(wèi)生組織定為生物生命活動(dòng)必需的微量元素。研究顯示硒作為含硒的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)的活性中心，調(diào)節(jié)著生物體抗氧化防御體系的主要組成部分[14]。研究還發(fā)現(xiàn)，硒在植物體內(nèi)還有拮抗重金屬，調(diào)節(jié)包括VC、VE在內(nèi)的非酶氧化系統(tǒng)，平衡功能元素在體內(nèi)代謝的功能。農(nóng)業(yè)應(yīng)用中多以亞硒酸鈉作為農(nóng)產(chǎn)品中外加源硒的硒源，但亞硒酸鈉存在使用安全性等問(wèn)題，本實(shí)驗(yàn)所用的是低毒有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液。張敏等[15]在含硒鹽培養(yǎng)基中加入ZM菌發(fā)酵，制得生物硒，且已證明作為主藥治療癌癥時(shí)無(wú)不良反應(yīng)。劉軍等[16]研究說(shuō)明生物硒比無(wú)機(jī)硒更能安全有效地促進(jìn)韭菜葉片對(duì)N、P、K、Mg、Ca、Zn等營(yíng)養(yǎng)元素的吸收。與亞硒酸鈉相比，EM(effective micro-organism)菌發(fā)酵制得的生物硒明顯提高大米中硒的含量，而且葉面噴施更安全有效[17]。生物硒制備方法是我國(guó)自主研發(fā)的微生物生產(chǎn)菌硒的工藝。生物硒肥是一類(lèi)成本低、效果高、毒性小的新型富硒肥料[18]。給藍(lán)莓施亞硒酸鈉后，漿果中總硒、有機(jī)硒、可溶性糖的含量及SOD活性明顯提高，促進(jìn)礦質(zhì)元素吸收，而且葉面噴施的效果優(yōu)于土壤基施[19]。目前關(guān)于噴施生物硒肥后藍(lán)莓營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的變化及對(duì)小鼠抗氧化功能影響的研究未見(jiàn)報(bào)道。

本實(shí)驗(yàn)利用亞硒酸鈉與菌種發(fā)酵所制備的有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液葉面噴施藍(lán)莓植株，檢測(cè)其營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)，通過(guò)體外培養(yǎng)細(xì)胞自由基清除實(shí)驗(yàn)及小鼠體內(nèi)抗氧化酶活性實(shí)驗(yàn)，評(píng)估硒對(duì)藍(lán)莓營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)改善以及施有機(jī)硒藍(lán)莓對(duì)抗氧化能力的影響效果，為優(yōu)質(zhì)抗氧化活性的藍(lán)莓產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1　材料、動(dòng)物與試劑

藍(lán)莓(布里吉塔)植株，由安徽蕪湖宏源農(nóng)業(yè)有限公司提供。

亞硒酸鈉水溶液及發(fā)酵菌種(酵母菌和枯草桿菌等多種益生菌)，由安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所提供。

SPF級(jí)昆明小鼠40只，體重(20±2)g，雄性，購(gòu)自安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(皖)2011-002。

HepG2細(xì)胞，購(gòu)自上海中科院細(xì)胞庫(kù)。

GIBCO血清，Thermo Fisher；DMEM培養(yǎng)基，HyClone公司產(chǎn)品；活性氧檢測(cè)試劑盒，碧云天生物技術(shù)公司；H2O2(分析純)，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；SOD試劑盒、MDA試劑盒、GSH-Px試劑盒、VC試劑盒、VE試劑盒，南京建成生物研究所；HNO3(分析純)，上海振興化工二廠(chǎng)；HClO4(分析純)，上海金鹿化工有限公司；NaBH4(分析純)，湖北賽創(chuàng)科技有限責(zé)任公司；HCl、乙酸鈉、KCl及甲醇等試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2　儀器與設(shè)備

AFS-3100型雙道原子熒光光度計(jì)，北京海光儀器公司；SameCOM Liss XA量子共振檢測(cè)儀，同康科技有限公司；UItrospec 3100 pro紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，英國(guó)柏楉有限公司；Eppendorf centrifuge 5417R離心機(jī)，德國(guó)Eppendorf公司；Alpha 1-2 LD plus凍干機(jī)，德國(guó)Chriet公司；激光共聚焦顯微鏡FV1000-IX81，日本OLYMPUS公司；3308型CO2培養(yǎng)箱，美國(guó)Thermo Fisher Forma公司。

1.3　實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液制備及施肥方法

利用安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所提供的亞硒酸鈉水溶液和菌種以及基料，在實(shí)驗(yàn)室中把菌種和液體基料混合攪拌均勻后好氧保存1 d，加入無(wú)機(jī)態(tài)亞硒酸鈉溶液，每次加入的亞硒酸鈉總量2.0 g/100 mL混合液，共加入2次，間隔7 d。期間開(kāi)口攪拌或搖晃，作用14 d后，紅色溶液增稠、穩(wěn)定即形成試驗(yàn)用有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液產(chǎn)品。

在試驗(yàn)區(qū)內(nèi)，選擇長(zhǎng)勢(shì)大小一致的5年生植株，分為對(duì)照組、無(wú)機(jī)硒組和有機(jī)硒組，每組選20株藍(lán)莓，對(duì)照為清水，無(wú)機(jī)硒組為亞硒酸鈉水溶液，有機(jī)硒組為有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液，無(wú)機(jī)硒組和有機(jī)硒組總Se含量一致，分別在座果后期、膨大前期、膨大后期葉面噴施，施用量為1次或2次，間隔10到15 d，總硒劑量理論值以2 g/畝(220棵)計(jì)算, 噴灑質(zhì)量濃度為50 mg/L，座果25 d后收集果實(shí)，稱(chēng)取重量，計(jì)算單顆平均重量，檢測(cè)硒的含量及有機(jī)硒和總硒的比值。

1.3.2硒含量的測(cè)定

將采集的新鮮的清水藍(lán)莓(watered blueberry ,WB)、無(wú)機(jī)硒藍(lán)莓(selenium blueberry ,SB)及有機(jī)硒藍(lán)莓(organic selenium blueberry ,OSB)制成勻漿，冷凍干燥，分別稱(chēng)取1.0 g干粉于50 mL三角瓶中，加入10 mLV(HNO3)∶V(HClO4)=4∶1混合酸液，放置12 h，置于電熱板上低溫加熱蒸發(fā)至有機(jī)物分解或色澤加深，補(bǔ)加1～3 mL消化液繼續(xù)消化，如此反復(fù)至消化液澄清，有HClO4白煙冒出，繼續(xù)加熱至溶液1～3 mL，用60%濃HCl定容在25 mL容量瓶中，然后加0.5% NaBH4至反應(yīng)終點(diǎn)，用雙道原子熒光光度計(jì)測(cè)量總硒含量。

將采集的各組新鮮的藍(lán)莓制成勻漿，冷凍干燥，分別稱(chēng)取1.0 g干粉，加10～20 mL的蒸餾水，置于加熱板上加熱沸騰20～30 min，冷卻,4 000 r/min離心10 min，保存上清液，殘?jiān)僦貜?fù)1次操作，合并上清液，加入10 mLV(HNO3)∶V(HClO4)=4∶1混合酸液，放置12 h，置于電熱板上低溫加熱至有機(jī)物分解或色澤加深，補(bǔ)加1～2 mL消化液繼續(xù)消化，如此反復(fù)至消化液澄清，有HClO4白煙冒出，繼續(xù)加熱至溶液1～2 mL，用60%濃HCl定容在25 mL容量瓶中，然后加0.5% NaBH4至反應(yīng)終點(diǎn)，用雙道原子熒光光度計(jì)測(cè)量無(wú)機(jī)硒含量，然后總硒含量減去無(wú)機(jī)硒含量即是有機(jī)硒的含量。

1.3.3藍(lán)莓中營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)的檢測(cè)

將各組藍(lán)莓新鮮果實(shí)打成勻漿，分別用pH計(jì)和手持?jǐn)?shù)顯糖度計(jì)測(cè)定pH值和可溶性固形物含量；采用Folin-Ciocalteu法測(cè)定總酚含量；參照吳春霞等[20]方法對(duì)總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定；采用凱氏定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)含量[21]；采用蒽酮法測(cè)定可溶性糖含量[22]。

1.3.4總SOD活性及VC、VE與花青素含量的檢測(cè)

準(zhǔn)確稱(chēng)取新鮮藍(lán)莓2 g，加入0.1 mol/L pH 7.4的磷酸鹽緩沖液8 mL，冰水浴條件下，機(jī)械勻漿，勻漿液在4 ℃條件下，以4 000 r/min離心10 min，收集上清液，依照試劑盒要求測(cè)定總SOD的含量。

稱(chēng)取新鮮的藍(lán)莓50 mg，加入450 μL的PBS，冰水浴研磨破碎，4 ℃條件下，以4 000 r/min離心10 min，收集上清液，依照試劑盒要求測(cè)定VC的含量。

稱(chēng)取新鮮的藍(lán)莓1 g，加入試劑盒中的試劑四(勻漿介質(zhì))9 mL，冰水浴研磨勻漿，4 ℃條件下，以2 500 r/min離心10 min，收集上清液，依照試劑盒要求測(cè)定VE的含量。

花青素提取液的制備：參照周方等[23]的方法并改進(jìn)，分別稱(chēng)取各組新鮮的藍(lán)莓各4 g，分別放入50 mL的離心管中，再各加入40 mL的鹽酸-甲醇混合液(含0.1%的HCl)，在80 ℃下振蕩提取30 min，收集提取液，在3 000 r/min下離心30 min后收集上清液待測(cè)。

花青素含量測(cè)定[24]：吸取樣液1 mL,加入pH 4.5的乙酸鈉緩沖液4 mL，搖勻，測(cè)定在波長(zhǎng)520 nm和700 nm處的吸光度值；同上，吸取上述樣液1 mL，加入pH 1.0的KCl緩沖液4 mL，搖勻，測(cè)定波長(zhǎng)510 nm和700 nm處的吸光度值。

1.3.5量子共振檢測(cè)樣品的量?jī)r(jià)值

將采集的各組新鮮的藍(lán)莓制成勻漿，冷凍干燥成干粉，分別稱(chēng)取1.0 g左右的樣品干粉直接放在檢測(cè)盤(pán)上，利用量子共振檢測(cè)儀檢測(cè)各組藍(lán)莓的磷、鉀、氮、鈣、維生素等營(yíng)養(yǎng)價(jià)值指標(biāo)的量?jī)r(jià)值，以及分析其免疫功能等生理功能指標(biāo)的量?jī)r(jià)值。

1.3.6細(xì)胞內(nèi)活性氧檢測(cè)

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HepG2細(xì)胞，用胰蛋白酶消化并用含10%血清的培養(yǎng)基調(diào)制成 5×104個(gè)/mL，以每皿 1 mL接種至共聚焦小皿中。細(xì)胞生長(zhǎng)到80%時(shí)，棄去舊的培養(yǎng)液；分別加入含SB(27.04 mg/mL)、OSB(27.04 mg/mL)及WB(27.04 mg/mL)的細(xì)胞培養(yǎng)基1 mL，孵育3 h后，加入10 mmol/L H2O2溶液25 μL(終濃度為2 mmol/L),陰性對(duì)照組(negative control ,NC)加入等量的PBS，孵育1 h，取出舊的細(xì)胞液，用 PBS 洗滌細(xì)胞2次，加入10 μmol/L的DCFH-DA溶液 1 mL，37 ℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20 min后吸棄，并用無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞，再加入1 mL的無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)液，將小皿置于共聚焦顯微鏡上，激發(fā)波長(zhǎng)488 nm，發(fā)射波長(zhǎng) 525 nm記錄胞內(nèi)熒光強(qiáng)度，使用ImageJ軟件分析胞內(nèi)熒光強(qiáng)度。

1.3.7小鼠模型的建立及檢測(cè)

將小鼠隨機(jī)分成4組：陰性對(duì)照組(negative control ,NC)，WB組，SB組，OSB組,每組10只。NC組每日灌胃蒸餾水；WB組每日灌胃施清水藍(lán)莓，灌胃劑量是10 g/kg；SB組和OSB組每日分別灌胃施無(wú)機(jī)硒藍(lán)莓勻漿、施有機(jī)硒藍(lán)莓勻漿，灌胃劑量是10 g/kg，連續(xù)30 d。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，小鼠采取自由進(jìn)食、飲水，隔日換水、換墊料。

血清中GSH-Px、SOD的檢測(cè)：小鼠斷尾取血，血樣4 ℃靜置2 h后，3 000 r/min，4 ℃離心15 min，獲得上層血清，-20 ℃保存待測(cè)。

肝臟中MDA的檢測(cè)：取0.5 g的肝臟組織，取5 mL的生理鹽水放入燒杯中研磨，3 000 r/min低溫離心10 min，取上清液用MDA的檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。

1.3.8數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

2　結(jié)果與分析

2.1　有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液對(duì)藍(lán)莓中營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的影響

試驗(yàn)中沒(méi)有測(cè)定噴施清水和硒以外的同區(qū)域藍(lán)莓，不能得知施用硒與否對(duì)藍(lán)莓產(chǎn)量的影響，但從表1中藍(lán)莓的單顆平均重量來(lái)估算，施用硒后，藍(lán)莓產(chǎn)量均有一定幅度的增加。噴施亞硒酸鈉水溶液的藍(lán)莓每顆平均重量增加3.77%(p>0.05)，施用有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液的藍(lán)莓每顆平均質(zhì)量增加6.25%(p>0.05)，即有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液處理組的增產(chǎn)幅度比亞硒酸鈉水溶液處理組的增產(chǎn)幅度高，且WB中有機(jī)硒與總硒的比值為69.70%，SB中有機(jī)硒與總硒的比值為72.83%, OSB中有機(jī)硒與總硒的比值為76.36%, SB和OSB中硒含量分別是WB的1.39倍與1.67倍，說(shuō)明有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液比亞硒酸鈉溶液更容易被藍(lán)莓葉片吸收利用和轉(zhuǎn)運(yùn)。

由表1可知，施用硒與否，對(duì)藍(lán)莓的pH值影響不明顯(p>0.05)，與WB相比，SB和OSB中蛋白質(zhì)含量分別提高了14.55%(p<0.01)和24.84%(p<0.01)，可溶性糖含量分別比WB提高了15.15%(p<0.01)和25.89%(p<0.01)，可溶性固形物含量分別提高了12.06%(p<0.05)和22.10%(p<0.01)。

表1　各組藍(lán)莓果實(shí)重量和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)比較Table 1　Comparison of weight and nutritional compounds in fruits of different blueberry groups

注：同列不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(p<0.05)，同列不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(p<0.01)；WB，清水藍(lán)莓；SB，無(wú)機(jī)硒藍(lán)莓；OSB，有機(jī)硒藍(lán)莓。表2同。

為探討藍(lán)莓噴施富硒營(yíng)養(yǎng)液后對(duì)其抗氧化性的影響，本研究分析比較了各組藍(lán)莓鮮果中的總酚、總黃酮、VC、VE和花青素的含量及總SOD的活性。結(jié)果顯示：藍(lán)莓施肥后不但提高了硒的含量，也影響著與抗氧化活性有關(guān)的成分如總酚、總黃酮、VC、VE、花青素和總SOD等，與WB相比，SB和OSB中VC含量分別提高了17.77%(p<0.01)和30.08%(p<0.01)，VE含量分別比WB提高了18.74%(p>0.05)和31.71%(p>0.05)，花青素含量分別提高了10.30%(p>0.05)和20.00%(p>0.05)，總SOD活性分別提高了3.37%(p>0.05)和10.62%(p<0.01)，總酚含量分別提高了13.62%(p<0.01)和21.42%(p<0.01)，總黃酮含量分別提高了11.71%(p<0.01)和22.42%(p<0.01)，說(shuō)明藍(lán)莓富硒后能夠顯著提高藍(lán)莓果中抗氧化成分的含量，且有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液比亞硒酸鈉水溶液作用更明顯，如表2所示。

表2　各組藍(lán)莓中抗氧化成分比較Table 2　Comparison of antioxidants of different blueberry groups

2.2　有機(jī)硒對(duì)藍(lán)莓主要功能元素的影響

與此同時(shí)，試驗(yàn)用量子共振技術(shù)檢測(cè)了各組藍(lán)莓的主要功能元素的相對(duì)含量。量子共振QRS值越高，說(shuō)明其含量或功能性越好。與WB進(jìn)行比較，SB和OSB的磷、氮、鈣、鋅、硒的量?jī)r(jià)值都高于WB(表3)，OSB的氮、鈣、鋅、硒的量?jī)r(jià)值又高于SB；SB和OSB中維生素的量?jī)r(jià)值也都高于WB，且OSB高于SB；在功能性指標(biāo)中，OSB的免疫功能量?jī)r(jià)值達(dá)到+7，而WB和SB分別只有+4和+5。以上結(jié)果表明，OSB的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值要高于WB和SB，免疫力更強(qiáng)，為增強(qiáng)其抗氧化能力奠定了良好的基礎(chǔ)。量子共振技術(shù)檢測(cè)得到的數(shù)據(jù)是相對(duì)值，只能做定性判斷的依據(jù)。

2.3　有機(jī)硒藍(lán)莓對(duì)細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基的清除效果

表3　各組藍(lán)莓QRS值比較Table 3　Comparison of QRS value between blueberry andfertilizing selenium blueberry

活性氧自由基熒光探針DCFH-DA在細(xì)胞內(nèi)本身無(wú)熒光，但它可被胞內(nèi)的H2O2、HO及過(guò)氧化硝基氧化形成DCF，DCF激發(fā)后可發(fā)出綠色熒光，反映了胞內(nèi)活性氧自由基水平變化。本實(shí)驗(yàn)利用H2O2誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HepG2產(chǎn)生較高濃度的自由基，然后分別添加WB、SB、OSB，比較分析其對(duì)自由基的清除效果。

圖 1(A～E)是各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞經(jīng) DCFH-DA 染色后，共聚焦顯微鏡拍攝的細(xì)胞圖像。照片的亮度差異反映了細(xì)胞經(jīng)處理后產(chǎn)生的 DCF 熒光強(qiáng)度變化。圖1-F為細(xì)胞內(nèi)DCF熒光強(qiáng)度的定量統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果。結(jié)果顯示：H2O2作用后胞內(nèi) ROS是對(duì)照組的180.41%(p<0.01)。WB、SB、OSB作用后胞內(nèi)ROS分別是正常對(duì)照組的161.74% (p<0.01)、144.43% 和130.82% 。相對(duì)于模型組(MG)，WB、SB、OSB作用后自由基清除率分別是10.34%(p>0.05)、19.94%(p<0.05)和27.49%(p<0.01)。由上可知，與SB處理組相比，有機(jī)硒藍(lán)莓對(duì)過(guò)氧化氫誘發(fā)的活性氧自由基抑制效果更顯著。

A-陰性對(duì)照組；B-模型組，暴露在過(guò)氧化氫下1 h；C-暴露在過(guò)氧化氫下1 h前，先用SB預(yù)處理3 h；D-暴露在過(guò)氧化氯下1 h前，先用WB預(yù)處理3 h；E-暴露在過(guò)氧化氯下1 h前，先用OSB預(yù)處理3 h；F-從A到E的熒光檢測(cè)DCF的水平圖1　有機(jī)硒藍(lán)莓對(duì)HepG2細(xì)胞內(nèi)活性氧自由基含量的影響Fig.1　Effects of fertilizing selenium blueberry on intracellular ROS levels in HepG2 cells注：+為顯著性小于0.01對(duì)比對(duì)照組(NC);*和**分別為顯著性小于0.05和0.01對(duì)比模型組(MG);比例尺：80 μm。

2.4　有機(jī)硒藍(lán)莓對(duì)小鼠抗氧化能力的影響

動(dòng)物體內(nèi)抗氧化酶GSH-Px、SOD的活性水平及MDA的含量水平能夠反應(yīng)機(jī)體的抗氧化能力。本實(shí)驗(yàn)分別用WB、SB及OSB灌胃1個(gè)月后檢測(cè)小鼠體內(nèi)肝臟中MDA含量及血清中的GSH-Px、SOD的抗氧化酶活性。

由圖2-A可知，與NC組相比，OSB組、SB組小鼠肝臟組織中MDA 含量分別降低了51.53%(p<0.01)和29.81% (p<0.01)，而WB組只降低了15.02%(p<0.05)。由圖2-B、2-C可知，相對(duì)于NC組，WB組小鼠血清中GSH-Px和 SOD活性分別增高了12.48%和10.14%，無(wú)顯著性差異(p>0.05)；OSB組小鼠血清中GSH-Px和SOD活性顯著增高了55.94%(p<0.01)和45.93%(p<0.01)；SB組小鼠血清中GSH-Px和SOD活性明顯高于NC組(p<0.05),提高了38.02%和29.62%。

圖2　有機(jī)硒藍(lán)莓對(duì)小鼠體內(nèi)抗氧化酶活性的影響Fig.2　Effect of organic selenium blueberry on the antioxidant enzyme activity in mice注：*和**分別為顯著性小于0.05和0.01對(duì)比對(duì)照組(NC)。

3　結(jié)論

研究顯示，硒被吸收后形成的硒蛋白可以提高植物的合成代謝效率，使VC、VE等還原型物質(zhì)合成量增加，即增強(qiáng)植物的抗氧化系統(tǒng)能力[25-26]。常溫下無(wú)機(jī)硒處理濃度為18.0～24.0 mg/L時(shí)可以提高SOD的活性[27]，進(jìn)而影響作物的產(chǎn)量[28]。楊燕君[29]、寧嬋娟[30]等研究結(jié)果證明，給甜柿和紅富士蘋(píng)果噴施硒肥，可以增加水果中VC、可溶性糖和可溶性固形物的含量，提高水果的品質(zhì)。本實(shí)驗(yàn)利用有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液噴施藍(lán)莓植株，檢測(cè)了施硒藍(lán)莓中蛋白質(zhì)、可溶性糖、可溶性固形物、總酚、總黃酮、微量元素Se、VC、VE和花青素的含量及總SOD的活性，以及氮、磷、鉀、鈣、鋅、維生素、免疫功能等指標(biāo)的量?jī)r(jià)值，與噴清水組藍(lán)莓(WB)比較發(fā)現(xiàn)，富集硒的同時(shí)，藍(lán)莓中氮、磷、鈣、鋅的含量也發(fā)生了變化，施硒藍(lán)莓組中蛋白質(zhì)、可溶性糖、可溶性固形物、總酚、總黃酮、VC的含量及SOD的活性顯著大于WB，VE和花青素的含量也有所提高，且藍(lán)莓產(chǎn)量均有一定幅度的增加；而噴施有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液的藍(lán)莓無(wú)論產(chǎn)量還是營(yíng)養(yǎng)價(jià)值以及功能元素和免疫能力的量?jī)r(jià)值都高于噴施亞硒酸鈉水溶液的藍(lán)莓。

藍(lán)莓富含多糖、黃銅、總酚、花色苷和維生素等抗氧化物質(zhì)，具備較強(qiáng)的抗氧化能力。陳健[31]、林清華[32]等研究發(fā)現(xiàn)，藍(lán)莓花青素通過(guò)降低血漿中ALT、MDA含量提高SOD、GSH-Px含量，可以對(duì)CCl4所致的小鼠肝損傷起到保護(hù)的作用。BARROS等[33]研究發(fā)現(xiàn)，藍(lán)莓中的多酚物質(zhì)具有抗氧化作用，且對(duì)DNA的損傷具有保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，相比清水藍(lán)莓和無(wú)機(jī)硒藍(lán)莓，有機(jī)硒藍(lán)莓能顯著降低小鼠肝組織中MDA的含量，提高血清中SOD和GSH-Px活性，更能有效的清除肝腫瘤細(xì)胞胞內(nèi)的氧自由基。以上實(shí)驗(yàn)證實(shí)，有機(jī)硒具有較高的生物活性及吸收利用率，噴施有機(jī)硒營(yíng)養(yǎng)液的藍(lán)莓其抗氧化性及功能元素量?jī)r(jià)值均高于噴施亞硒酸鈉水溶液的藍(lán)莓。

總之，硒的加入優(yōu)化了藍(lán)莓的營(yíng)養(yǎng)譜，提高了藍(lán)莓抗氧化能力，有機(jī)硒藍(lán)莓是具有很大開(kāi)發(fā)前景的一種天然高效抗氧化物。

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