淺析血液標本放置時間對檢驗結果的影響

郜瑋

（內蒙古血液中心，內蒙古 呼和浩特 010010）

0　引言

近年來，隨著血液標本檢驗設備的不斷更新，以往的手工檢測、半自動分析儀檢測慢慢改進為全自動分析儀檢測，其檢測結果較原來的檢測設備更為精準[1]。近年來，關于血液標本放置時間會不會影響檢測的報道也多種多樣，而我中心為保障獻血者和受血者的權益，使每一袋血都有溯源性，需要長時間存放血液標本，那么血液標本放置時間對標本再次檢驗的結果究竟有多大影響[2]？大量醫學專家表示，標本的時間可作為影響檢驗結果的重要因素。為了保證檢驗質量，醫院引進先進的檢驗設備與技術，將傳統、落后的檢驗設備及檢驗模式更換掉，逐漸提高檢驗工作的效率及檢驗結果質量。本研究以中心2012年1月至2015年1月收集的50例HBV雙試劑陽性血液標本予以研究，現報道如下。

1　資料與方法

1.1　一般資料

選取本中心于2012年1月至2015年1月50份酶聯免疫法（ELISA）雙試劑HBV陽性標本為研究對象。

1.2　方法

1.2.1儀器及試劑準備

儀器：瑞士AusBio公司的STAR-8ch全自動加樣儀和FAME24/30全自動酶免疫分析儀；試劑：上海科華生物工程股份有限公司提供的乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒及英科新創科技有限公司提供的乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒。

1.2.2具體操作方法

將經過正常檢測流程后的HBV雙試劑陽性標本挑出，分離血清。再分別將標本置于零下25～30℃冰箱保存一周、一年、三年。嚴格按照試劑盒的具體說明書施行ELISA檢測。

1.3　觀察指標

觀察50例血液樣本在72h內存放于零下25～30℃一周、一年及三年后分別經ELISA檢測的陽性率結果。

1.4　統計學方法

數據采用SPSS 19.0進行分析，計數資料用率表示行卡方檢驗，檢驗標準α＜0.05。

2　結果

50例血清樣本放置于零下25～30℃保存后的結果顯示，一周、一年、三年各時間段的檢出時間均無明顯差異（P＞0.05），其陽性率均高，無統計學意義。見表1。

表1　50例血清放置時間及陽性變化情況

3　討論

乙型肝炎病毒（HBV）是導致慢性乙型肝炎發生及病情發展的重要因素。乙型肝炎病屬于一種DNA病毒，歸于嗜肝DNA病毒科[3]。據目前資料顯示，HBV僅對人、猩猩存在易感性，導致人和猩猩患乙型病毒性肝炎疾病[4]。該病毒是由丹娜于1965年發現，直徑為42nm，主要由外殼和核心組成，呈完整的顆粒狀，因此也被稱為丹娜顆粒[5]。此病毒的傳播路徑主要包括血液傳播、醫源性傳播、母嬰傳播、性傳播等多種傳播途徑，對人們的健康造成了較大的影響。目前，我國的乙肝病毒感染率已經到達60%～70%，其中乙肝表面抗原攜帶率占全國人口的7.18%，也就是說全國大約有9300萬人已經攜帶乙肝病毒，其中有大約2000萬人為慢性乙型肝炎患者[6]。該病屬于一種傳染性疾病而非遺傳病，盡管如此，很早之前就有了乙型肝炎病毒疫苗，對該病毒進行了有效控制。同時，我國的醫學專家們仍然沒有停止對該病毒的研究，不斷地推陳出新，研制出了更為先進的病毒檢測技術及治療藥物，大大提高了該病的治愈率[7]。

乙肝病毒基因的檢查方法包括：PCR酶聯免疫吸附法、PCR酶聯化學發光法、競爭PCR法、熒光PCR法以及熒光標記物法等方法。其檢測方法多種多樣，且檢測儀器和設備均來自不同的國家，其標準曲線和標準熒光均有所不同，導致其得出的數值均存在左右漂浮、偏差較大的特點，因此其檢測范圍也有所不同。針對該病毒基因檢查，實驗室主要通過ELISA檢測進行診斷[8]。本研究便是以ELISA檢測為主，探究不同時間段檢測乙型肝炎病毒對檢驗結構是否存在影響。酶聯免疫法（ELISA）是將已經知曉的抗原體、抗體吸附于固相載體表面，并使酶標記的抗原抗體同時反應于固相載體表面上的技術。本技術可對大分子抗原、特異性抗體有檢測作用，且檢測速度快、靈敏性強、操作簡便、載體易于標準化。在施行該檢測技術的過程中必須使用三種試劑，包括免疫吸附劑、標記物以及顯色劑。在測量時，需要先將抗體與固相載體結合，注意保留其免疫活性，然后將抗原同酶結合成標記物，該標記物同樣保持原來的免疫活性和酶活性，待標記物同固相載體上的抗體結合反應后，再添加相應底物及顯色劑。最后可用肉眼、電子顯微鏡及光學顯微鏡進行觀察，再通過酶標儀予以測定。尤其是進行HBV-DNA檢測，其檢測過程中該技術所具備的特異性可將乙肝病毒基因組中的270bp基因片段進行擴增，擴至2n的指數，并在數小時內進行特定的分子片段擴增，可擴至1×107～1×108倍，其HBV檢出率較高，是一種較強的檢測手段。

目前，由于醫療技術水平的快速提升，檢測技術的不斷進步，其血液標本的保存技術也有了突破性改變。大多數醫療機構已經建立了較為完整的血液標本保存管理制度，由專門的工作人員進行血液標本采集，并予以實驗室妥善處理后，置于溫度適宜的冰箱內進行短期保存或長期保存，需要時，可及時進行采用或者進行監測。血液標本對存放環境的要求十分嚴格，需要由專業人員營造一個無菌且密封的環境，將采集的血液標本存放至專門的位置，避免外界污染。當出現血液無法及時檢測時，醫護人員應嚴格按相關血液標本存放制度進行存放，注意將其放置為無菌的冰箱（4℃）內，存放時間小于72h。對部分缺乏穩定性項目重復檢查，確保準確檢驗結果。本研究表明，50例血清樣本放置于室溫保存后的結果顯示，一周、一年、三年各時間段的陽性檢出情況均無明顯差異（P＞0.05），其陽性率均高，無統計學意義，充分說明了血液標本放置時間對檢驗結果影響不大。

[1] 李曉恒.血液標本放置時間對生化檢驗結果的影響[J].吉林醫學,2011,32(3):529.

[2] 趙曉紅.血液標本存放時間對生化檢驗結果的影響研究[J].中國保健營養旬刊,2013,23(7):2127.

[3] 韋淑鳳,王海勇.血液標本存放時間對生化檢驗結果影響的分析[J].醫學美學美容旬刊,2014,10(7):443.

[4] 朱紅英.血液標本存放時間對生化檢驗結果造成影響的分析[J].中國當代醫藥,2013,20(25):101-102.

[5] 黎莉.血液標本采集相關因素對生化檢驗結果的影響[J].臨床合理用藥雜志,2014,7(10):17-18.

[6] 古賢清.相關因素對300例血液采集標本生化檢驗結果的影響分析[J].廣東微量元素科學,2015,22(4):56-58.

[7] 郭慧霞.血液標本采集對生化檢驗結果的影響差異分析[J].臨床醫學研究與實踐,2017,2(1):83-84.

[8] 唐美琴.生化檢驗中血液標本采集對結果的影響分析[J].吉林醫學,2013,34(33):6914.