一例豬圓環病毒2型和3型混合感染的診斷與分析

陶順啟 張三軍

豬圓環病毒（Porecine circovirus，PCV）能引起不同階段豬只的多種癥狀的疾病，已成為危害養豬業健康發展的重要疾病，越來越受到重視。駐馬店地區養豬生產也是受到PCV的嚴重困擾，不過隨著豬圓環病毒2型（PCV2）疫苗在豬場的廣泛使用，PCV的危害有所緩解，但有的豬場使用效果不明顯，懷疑豬場可能存在新型PCV。本文主要通過對駐馬店某發病豬場的病原檢測證明了豬圓環病毒3型（PCV3）在駐馬店豬場的存在，介紹了該場PCV2和PCV3混合感染的診斷過程，并對發病原因進行了分析，以期為今后豬場科學開展對PCV的防控提供幫助。

PCV為圓環病毒科（Circoviridae）圓環病毒屬（Circovirus）一員，單股環狀DNA病毒，為已知的最小動物病毒之一。2016年前只發現豬圓環病毒1型（PCV1）和豬圓環病毒2型（PCV2）。豬圓環病毒3型（PCV3）是近年發現的傳染病病原，2016年被美國首次報道發現。通過PCR檢測，在新鄉、鄭州等河南大部分地區豬場均檢出PCV3感染。PCV1無致病力，PCV2和PCV3均可造成豬只感染發病，并可引起豬群的免疫力降低，繼發多種疫病，造成重大經濟損失。

1 發病情況

該豬場存欄530多頭，其中母豬52頭。發病階段主要集中于保育豬和育肥豬，從2018年8月中旬至9月10日出現癥狀約有100頭，死亡40多頭。病程一般10d以上，日齡越小發病情況越嚴重。母豬有3頭出現產弱胎、死胎情況，有1頭出現流產情況。

2 臨床癥狀

病豬體溫40℃左右，被毛粗亂，皮膚發白，貧血消瘦、腹瀉，皮膚上出現大小不等的紫褐色隆起丘疹，與健康皮膚分界明顯。個別豬出現喘氣等呼吸道癥狀。少數母豬可見食欲降低，皮膚上出現多量丘疹。

3 病理剖檢

可見腹股溝淋巴結、腸系膜淋巴結等多處淋巴結水腫，肺臟間質增寬，心臟冠狀溝有淡黃色膠凍樣水腫，腎臟腫大，表面分布有花斑狀白色壞死灶。小腸粗細不等，出現肉芽腫性腸炎。

4 實驗室診斷

4.1 樣品的采集及處理

無菌采集5頭發病豬的肺臟、脾臟、淋巴結5份樣品。將無菌采集的上述5份樣品剪取適量分裝于圓底無菌離心管，放入鋼珠，按照1：3加入生理鹽水，使用M-200組織搗勻儀處理5min，將處理好的樣品反復凍融3次，然后使用凱特離心機1200r/min離心8min，取上清液送PCR室檢測。

4.2 實驗室檢測使用的試劑、檢測方法及結果

4.2.1 試驗方法、試劑、判定標準。采用熒光定量PCR方法進行檢測;試劑廠家：世紀元亨;試劑批號：PC2&320180801P;按照實際說明書進行操作，判定標準PCV2和PCV3 Ct值（是指每個反應管內的熒光信號到達設定域值時所經歷的循環數）≤30為陽性，Ct值>35或無Ct值為陰性，30

4.2.2 結果。采集的5份樣品檢測結果均為PCV2和PCV3病毒核酸陽性。

5 分析

該豬場一直存在PCV2的感染情況，豬場主要采取對15日齡仔豬免疫PCV2疫苗來控制該病。PCV3是在該豬場首次發現，雖然該豬場4月份有從外地引進后備母豬的情況，但是因為豬只發病前沒有做過PCV3的檢測，所以目前對于該場什么時間存在PCV3的感染及與引進種豬有沒有關系尚不清楚，需要進一步跟蹤調查。從該場檢測的結果來看駐馬店地區已存在PCV3的感染，但PCV3發現較晚，目前對于該病的來源及在駐馬店地區的感染的情況不清楚，下一步需要跟蹤調查駐馬店地區PCV3流行情況，掌握該病流行特點和趨勢，為今后該地區對該病的科學防控提供幫助。

該豬場PCV的發生可能有以下原因引起：①豬群存在或近期感染了PCV3。②該豬場雖然對15日齡仔豬免疫PCV2疫苗，而目前發現PCV2主要有PCV2a和PCV2b兩個基因亞型，可能該場使用的商品化的疫苗與流行毒株交叉保護性低。并且疫苗免疫并不能完全阻斷PCV2的傳播，亦不能清除體內感染的病毒。③豬場硬件條件比較簡陋，存在不同階段和批次的豬混養情況。④該豬場PCV的免疫程序存在不合理性。

PCV2主要引起斷奶仔豬多系統衰竭綜合征（PMWS）、皮炎腎病綜合征（PDNS）、呼吸道綜合征（PRDC）、母豬繁殖障礙等一系列疾病，不同階段豬臨床表現不一樣。PCV3感染多見于具有PDNS和繁殖障礙癥狀豬群。PCV3臨床感染癥狀與病理變化與PCV2高度相似。該豬場這次PCV疫情比較嚴重，發病率和死亡率都比較高，應該與PCV2和PCV3的混合感染有著密切的關系。對于PCV2與PCV3混合感染對豬只的共同致病作用、臨床癥狀及所引起的病理變化等尚需進一步調查研究。

為了預防和減輕豬場PCV的危害可采取以下措施：①要建立一個適合本場的免疫程序。根據目前市場銷售的疫苗特點和PCV感染情況建議豬場對于母豬和仔豬都要免疫。仔豬建議15d和斷奶后各免疫一次。②做好豬場的豬瘟、偽狂犬、口蹄疫基礎免疫，控制好豬場的鏈球菌、支原體肺炎和副豬嗜血桿菌等細菌病。③PCV3目前沒有可用的商品化疫苗，所以豬場要執行嚴格的生物安全措施，建議分區、分點飼養。④加強豬場的飼養管理，減少各種應激因素的發生，可定期使用黃芪多糖等能提高機體免疫力的藥物進行保健。