海南省普通人群宮頸HPV感染及臨床信息分析

賀國麗，吳秀榮，鄭碧娟，王 雪，崔開穎

(海南省人民醫院，海南 ?？?570311)

宮頸癌仍然是當今嚴重威脅女性健康的婦科惡性腫瘤，我國每年新增宮頸癌患者13.5萬，占全球新發病數量的1/3，其中約8萬人死亡[1]。高危型人乳頭瘤病毒(human papillomavirus，HPV)持續感染是宮頸病變與宮頸癌的主要病因之一。本研究對5 959例女性人群進行了HPV的分型檢測和基本信息的收集，現將結果分析報告如下。

1資料與方法

1.1研究對象

采集2015年1月至2016年5月海南省19個市縣普通人群5 959例宮頸脫落細胞標本，同時收集個人的基本信息。納入研究的人群年齡在23～69歲之間；職業有干部、個體、工人、農民、無業；民族有漢族、黎族、苗族、滿族、回族、瑤族、壯族。文化程度有大學、中學、小學、未接受系統教育；調查避孕方式、生育胎次、對宮頸癌可以早期篩查的知曉情況。所有研究對象均知情同意。

1.2試劑與儀器

凱普HPVDNA提取試劑盒、DNA擴增試劑盒和HPV核酸分型檢測試劑盒(潮州凱普生物化學有限公司)、多聚酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)擴增儀、Hybrmiax醫用核酸分子雜交儀。

1.3標本采集

擴陰器暴露宮頸后，用特制取樣刷順時針轉5圈以上，將刷頭折斷放入已加有專用細胞保存液的取樣管中，立即送檢或4℃保存備檢。

1.4分型檢測

1.4.1 DNA模板的制備

樣本制備過程按凱普公司HPVDNA提取試劑盒使用說明進行。將樣品管渦旋振蕩混勻，取500μL細胞保存液，14 000r/min離心5min，沉淀加400μL溶液Ⅰ于100℃水浴15min，再加入400μL溶液Ⅱ，14 000r/min離心5min，棄上清，獲取核酸沉淀，用60μL溶液Ⅲ溶解核酸沉淀后備用。

1.4.2 PCR擴增

使用凱普DNA擴增試劑盒擴增，反應體系及反應條件根據試劑盒說明書。每管23.25μLPCRmix和0.75μLTaq酶配制擴增反應液，各加已提取DNA樣本模板1μL進行擴增。PCR反應條件為95℃預變性9min，95℃20s，55℃30s，72℃30s，共40個循環，72℃延伸5min。

1.4.3 雜交并顯色

按照Hybrmiax醫用核酸分子雜交儀操作步驟進行雜交試驗并顯色。

1.4.4結果判讀

檢測結果陽性為肉眼清晰可見的紫藍色圓點，根據試劑盒提供的膜條HPV分型分布圖判讀結果。包括HPV6、11、16、18、31、33、35、39、42、43、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、cp8304亞型。

1.5統計學方法

所有數據采用SPSS 18.0統計軟件進行分析，計數資料組間比較采用卡方檢驗，以P<0.05為有統計學意義。

2結果

2.1參檢人群的年齡與HPV感染

不同年齡段中HPV陽性率有顯著性差異(χ2=48.15，P=0.005)，>60歲年齡段的HPV陽性率最高(占22.73%)，其次為20～30歲年齡段(占17.84%)，見表1。

2.2參檢人群的職業與HPV感染

不同職業中HPV陽性率有顯著性差異(χ2=9.59，P=0.025)，以無業人員HPV陽性率最高(14.17%)，見表2。

表1 參檢人群年齡及HPV分布情況Table 1 Distribution of age and HPV infection among the enrolled women

表2 參檢人群職業及HPV感染分布情況Table 2 Distribution of occupation and HPV infection among the enrolled women

2.3參檢人群的民族與HPV感染

在參檢人群的民族中，除外HPV檢測陰性的少數民族，漢族人群的HPV感染率高于黎族人群(χ2=41.19，P=0.005)，見表3。

表3 參檢人群民族及HPV感染情況Table 3 Distribution of nationality and HPV infection among the enrolled women

2.4參檢人群的生育與HPV感染

不同生育胎次之間HPV陽性率有顯著性差異(χ2=85.29，P=0.005)，生育胎次多者HPV感染率較胎次少者為低，見表4。

表4 參檢人群生育及HPV感染情況Table 4 Distribution of number of birth and HPV infection among the enrolled women

2.5參檢人群的文化程度與HPV感染

參檢人群的中接受文化教育的程度與HPV感染率有一定關系，既文化程度較高者HPV感染率要小于文化程度低者(χ2= 97.81，P=0.005)，見表5。

表5 參檢人群的文化程度及HPV感染情況Table 5 Educational level and HPV infection among the enrolled women

2.6參檢人群的避孕方式與HPV感染

不同避孕方法中HPV陽性率有顯著性差異(χ2=92.81，P=0.005)，輸卵管結扎者的HPV感染率最低，見表6(口服避孕藥的人數過少，未納入差異分析)。

表6 參檢人群避孕情況及HPV感染情況Table 6 Distribution of contraception and HPV infection among the enrolled women

2.7參檢人群的宮頸外觀表現與HPV感染情況

在宮頸外觀上，宮頸柱狀上皮是否有異位及異位范圍的大小與HPV感染無明顯相關性(χ2=7.15，P=0.100)，見表7。

表7 參檢人群宮頸外觀及HPV感染情況Table 7 Cervix appearance and HPV infection among the enrolled women

2.8參檢人群對宮頸癌早期篩查知曉情況

參檢人群中，不知道宮頸癌是可以早期篩查的比例達41.94%。

2.9受檢者高危HPV分型情況

受檢人群的高危HPV型別有17種，分布廣泛，由高到低依次為HPV52(3.14%)、HPV16(1.65%)、HPV58(1.34%)、HPV39(0.99%)、HPV18(0.94%)、HPV66(0.74%)、HPV68(0.60%)、HPV51(0.49%)、HPV53/56(0.34%)、HPV59/33(0.27%)、HPV45(0.20%)、HPV31(0.17%)、HPV82(0.10%)、HPV35(0.07%)、HPV73(0.02%)。

3討論

宮頸癌在本省位居女性生殖系統惡性腫瘤之首，多年來一直居高不下，就診時期別偏晚者不在少數，對家庭和社會均造成極大的經濟和精神負擔，情況令人堪憂。

3.1人群的HPV感染情況

本課題受到省社會發展專項資金的資助，對本省19個市縣普通人群5 959人進行了23型別HPV的分型檢測，結果HPV陽性者758例，其中高危型HPV感染694例，高危型HPV感染率11.65%，較本地區門診就診者31.36%的感染率明顯低[2]，說明門診就診人群與普通人群的HPV感染情況是不同的，門診的陽性率是不能代表人群陽性率的。國內還沒有公布全國性的宮頸HPV感染情況，本資料的結果較2007年喬友林等報告的我國平均水平14.2%稍低。本資料中的高危型別由高到低順序依次為HPV52(187例)、HPV16(98例)、HPV58(80例)、HPV39(59例)、HPV18(56例)、HPV66(44例)、HPV68(36例)、HPV51(29例)、HPV53和HPV56(20例)、HPV59和HPV33(16例)、HPV45(12例)、HPV31(10例)、HPV82(6例)、HPV35(4例)、HPV73(1例)，與國內的大部分報道及本地區門診就診者的統計結果基本一致[2-3]。

3.2人群的臨床基本信息與HPV感染的關系

研究認為HPV感染與年齡有關，感染率隨年齡的增加而升高[4-5]。本研究結果發現，不同年齡段中HPV陽性率有顯著性差異(P<0.05)，>60歲年齡段的HPV陽性率最高(22.73%)，其次為20～30歲年齡段(17.84%)，說明這二個年齡段是HPV的易感人群。在低年齡女性存在性活躍、衛生保健知識和意識缺乏，流產分娩多等事件；而在老年女性雌激素水平下降、機體免疫力降低、身體基礎疾病較多[2,6]。提示60歲以后人群仍是篩查中不應忽視的高危人群；年輕女性抵御HPV感染的能力差，預防性疫苗應該在青春期和青春前期應用。

生育胎次的分析中顯示，在3胎以下人群的HPV陽性率是隨胎次的增加呈現降低的表現，而3胎以上的HPV陽性率又有上升的表現。說明多次妊娠、生產對宮頸的反復損傷及修復過程是會增加HPV侵襲的。

隨著文化程度的降低，HPV陽性率呈現增加的趨勢，其中未受教育者最高，其次為小學程度者，差異有統計學意義。顯示HPV感染與受教育的情況有關，因為文化程度是會明顯影響到人群對保健知識的接受水平、健康意識的強弱、生活及衛生習慣的好壞。

在避孕方式的分析中，輸卵管結扎者的HPV陽性率最低，而其它方式之間無差異。提示避孕套似乎并不能阻擋HPV的傳播，當然這里還存在這部分受檢者可能是通過其它途徑而非性行為感染了HPV以及她們并沒有常規使用避孕套的原因。因口服避孕藥者人數太少，且均無HPV檢出，故未列入差異的統計分析。

本資料中受檢人宮頸是否有柱狀上皮異位(“糜爛”)以及異位的程度范圍與HPV感染率無統計學意義，說明雖然“糜爛”(異位)的上皮菲薄會導致抵抗病原體侵襲能力較差，但單純的宮頸“糜爛”可能還不是易患HPV感染的主要因素。

黎族是本省的最主要少數民族，本資料中黎族人群的HPV陽性率為7.13%，而漢族人群是14.26%陽性率，差異有統計學意義。一項本地區宮頸病變病例的分析結果顯示，在438例宮頸癌中，漢族402例，占91.78%；黎族30例，占6.85%；629例癌前病變中，漢族607例，占96.50%；黎族21例，占3.33%[7]。這二項結果顯示黎族的HPV感染率和宮頸病變發生率均較低，是否在不同民族間存在著HPV易感基因或易感因素的差異還有待于進一步研究。

3.3人群對宮頸癌早期篩查的認知

在發展中國家，宮頸癌占所有婦科腫瘤的20%～30%，而在發達國家僅為4%～6%，導致這種顯著差別的主要原因是早期篩查的重視和推廣，使多數高危者得到早發現早診斷早治療[3，8]。目前我國的人群篩查率屬低水平，城市為29.1%，經濟發達地區為31.3%，農村為16.9%。在本資料的人群中，對于是否知曉宮頸癌可以早期篩查的調查結果是，表示知道的占58.06%，而表示不知道的為41.94%，雖然前者的比例高于后者，但后者的占比仍屬相當高，說明公眾對宮頸癌預防的認知度和宮頸癌相關信息的了解程度還很不理想，我們所面臨的宮頸癌防治工作壓力巨大，任重道遠。

[1]崔亞杰,張培蓮,盧天捷,等. 西安地區宮頸病變婦女人乳頭瘤病毒感染狀況及基因型別分析[J].中國婦幼健康研究,2016,27(7):819-821.

[2]賀國麗,蔡俊宏.14335例婦科門診就診者人乳頭狀瘤病毒感染結果的報告[J].腫瘤預防與治療,2015,28(3):140-143.

[3]Al-Awadhi R,Chehadeh W,Jaragh M,etal.Distribution of human papillomavirus among women with abnormal cervical cytology in Kuwait[J].Diagn Cytopathol,2013,41(2):107-114.

[4]王艷,陳雅珍,丁友法,等.浙南地區4034例宮頸人乳頭狀瘤病毒感染狀況分析[J].中華醫院感染學雜志,2012,22(4):750-752.

[5]肖瑜,李彥,周遠忠,等.黔北地區5925例婦女子宮頸人乳頭狀病毒的感染及其亞型分布[J].國際檢驗醫學雜志,2013,34(7):894-896.

[6]Lee E H,Um T H,Chi H S,etal.Prevalence and distribution of human papillomavirus infection in Korean women as determined by restriction fragment mass polymorphism assay[J].J Korean Med Sci,2012,27(9):1091-1097.

[7]賀國麗,吳秀榮,鄭碧娟.宮頸癌與癌前病變中高危人乳頭瘤病毒型別特征及差異分析[J].實用婦產科雜志,2016,32(6):459-461.

[8] Suh D H,Kim K,Kim J W.Major clinical research advances in gynecologic cancer in 2011[J].J Gynecol Oncol,2012,23(1):53-64.

[專業責任編輯： 張忠明]