洪智敏 福州大北農生物技術有限公司 福州 350014
豬支原體肺炎 (Mycoplasmal pneumonia of swine,MPS)又稱豬流行性肺炎,在我國俗稱豬氣喘病,由豬肺炎支原體 (Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)所引發的呼吸系統疾病,是影響我國養豬業發展的主要疫病之一。Mhp是一種原核生物,能夠自行復制,分離培養困難,對生長需求苛刻;無細胞壁,在顯微鏡下呈現多形態,直徑0.2~0.5 μm,大小介于細菌和病毒之間。革蘭氏染色為陰性,瑞特或吉姆薩染色良好,大環內酯類、氟喹諾酮類可抑制Mhp的生長,影響蛋白質合成的藥物可影響Mhp生長[1]。MPS的病死率不高,傳播緩慢,在豬群中會呈現隱性感染而被養殖戶忽視。在規模化豬場中Mhp常與其他病原體如豬繁殖與呼吸綜合征病毒、圓環病毒、副豬嗜血桿菌(HPS)等混合感染,使豬的免疫功能受損,免疫力降低,導致豬瘟免疫失敗,病菌感染率升高,并引發常見的豬呼吸道疾病綜合征,致使豬病防治的難度進一步提高,對養殖戶造成重大的經濟損失[2]。
豬支原體肺炎的傳播主要是帶菌豬的病原體經呼吸道分泌物或氣霧接觸而傳播,感染不受年齡、性別及品種的影響,主要經哺乳母豬傳染給仔豬。該病沒有季節性特點,以冬春交際時常見,呈地方性流行,根據病程可分為急性、慢性和隱性3個類型。其嚴重程度常與管理水平如豬群密集、豬舍濕冷等衛生環境以及飼養管理規范等因素相關。易感豬與帶菌豬接觸后,潛伏期可達10 d或更長,感染較普遍是6~10周齡豬,癥狀最早可見于2~3周齡仔豬,許多豬感染后在4~6月齡才出現癥狀。如病情以急性、暴發形式出現,短時間內會傳染大量豬群,且病死率高,給豬場造成重大損失[3]。Mhp傳播距離可達9.2 km,該病在傳染后應及時采取相應的應急措施,否則易引發大面積感染,使得疫病防控更難[4]。
豬肺炎支原體是細胞外病原體,早期感染主要是病原體聚集并粘連在呼吸道上皮細胞,識別呼吸道黏膜纖毛細胞特異性受體,損傷纖毛和上皮細胞,逐漸引起感染細胞病變、死亡,纖毛萎縮及功能受損,引起支氣管炎。而隨后分泌的一些有害因子,進一步破壞黏膜層,纖毛大量脫落,無法通過擺動功能排除肺泡分泌物、空氣源性的微粒粉塵及各種致病菌,使其他病原菌易于侵入,導致豬體的體液免疫和細胞免疫功能降低,而引起繼發感染。伴隨著感染引發的炎癥面積逐漸擴大至肺組織,肺泡出現感染,呼吸功能受到影響,肺活量隨之降低,患豬出現咳嗽、氣喘[5]。肺炎感染進一步加重時,患豬呼吸和血液循環系統機能會受到影響,嚴重缺氧時會導致心力衰竭和窒息死亡[3]。
臨床初期癥狀主要表現為氣喘、無痰慢性干咳,尤其在進食或運動后,癥狀表現更為明顯;夜間可聽見患豬哮喘聲,嚴重時會有明顯缺氧癥狀。此外,患豬還會出現低燒,精神萎靡、皮毛粗亂,趴窩不愿站立,食欲出現減退,身體逐漸消瘦,且飼料轉化率低,特別是幼豬,造成大量飼料和人力的浪費。該病主要是經哺乳母豬傳染給小豬,但感染不受年齡限制,包括乳豬和種豬均可感染。豬感染肺炎支原體后會有一定潛伏期,在病癥持續2~3個月后,患豬免疫力會降低,在機體抵抗力變弱時易引發肺炎[6]。
患豬感染支原體肺炎,通常會有大量中性粒細胞聚集腔體、氣管周圍及肺泡中,解剖時以肺部病變為主,其他組織器官一般沒有特殊病變,肺部病變主要出現在肺臟、肺門淋巴結和縱膈淋巴結。其中肺有不同程度的水腫和氣腫并膨大,兩肺肺尖葉和心葉出現胰樣變和肉樣變,與非病灶有明顯界限,顏色為紫紅到黃褐色;肺門和縱膈淋巴結明顯腫大、質硬、灰白色切面[7]。隨著病情的惡化,在支氣管附近會出現淋巴細胞增加而產生的淋巴增生,肺泡間的間隙增厚,支氣管擴張困難,肺泡正常氣體交換受到影響,患豬表現出氣喘現象。
5.1 病原學診斷檢測
5.1.1 分離培養 豬肺炎支原體是難分離和鑒定的病原體,Mhp活力也會因分離方法不同而有差異。從豬支原體肺炎感染豬分離肺炎支原體時,常伴有其他病菌如豬鼻支原體和絮狀支原體的感染,且豬肺炎支原體生長較豬鼻支原體緩慢,對培養條件要求更苛刻,分離培養過程中易被豬鼻支原體所覆蓋。感染肺炎經治愈的豬以及使用抗生素治療的患豬也很難分離出Mhp[8]。
5.1.2 普通PCR診斷技術 隨著分子生物學的發展,PCR診斷技術已成為病原學檢測的主要方法,該方法克服了支原體分離培養難、血清學檢測易產生交叉反應及對血清質量要求嚴的缺點,能快速地檢測出微量的微生物,敏感性強,尤其在豬發生肺炎的急性期,PCR診斷方法具有高度敏感性。豬肺炎支原體的P36蛋白是Mhp的特征性蛋白,該蛋白片段基因的擴增可將豬肺炎支原體與絮狀支原體及豬鼻支原體等感染區別。劉茂軍等[9]根據豬肺炎支原體P36蛋白基因序列設計一對引物,擴增到Mhp,特異性強,建立豬肺炎支原體PCR檢測方法,并將該方法運用到Mhp的特異性檢測中,為臨床上Mhp的鑒定提供了快速簡便的方法。
5.1.3 免疫熒光技術 早在1970年就有報道通過熒光技術檢測豬肺中的Mhp。但熒光抗體技術在患豬肺部存在大量Mhp時,檢測準確度高;在患豬接受抗生素等藥物治療或轉慢性感染時,由于體內Mhp數量減少,熒光抗體技術檢測易出現假陰性,因此,該方法適合于Mhp急性期感染檢測[8]。
5.2 血清學診斷檢測
5.2.1 間接血凝試驗(IHA) IHA方法優點是敏感性高,操作簡便快速,價格便宜,是診斷豬支原體肺炎常用方法之一。缺點是該檢測方法與其他支原體之間存在交叉反應,有研究發現感染豬的血清中含有易溶血的特異性吸附因子,對紅細胞要求嚴格,個體差異致紅細胞不易標準化[10],且血清中的雜質、細菌污染等常引起反應失敗或非特異性凝集,這使間接血凝試驗在臨床應用中受到了一定的限制[1]。
5.2.2 補體結合試驗(CFT) 目前主要有微管補體結合和微量修正補體結合兩種有效補體結合試驗應用于檢測豬血清中Mhp抗體,CFT陽性率與豬肺部病變有較好的相關性,但在敏感性和特異性方面存在一定局限性,存在很高的假陽性和假陰性,早期檢測敏感,后期敏感性較差[8]。
5.2.3 酶聯免疫吸附試驗(ELISA) ELISA方法能進行定量分析,特異性強,并且在后期檢測中的效價仍然很高。該方法克服了熒光抗體技術不能有效檢測抗生素等藥物治療中的感染豬以及樣品不能長期保存的缺點,且比熒光抗體法更敏感,是目前國內外最常用于診斷Mhp的方法之一。靳岷等以Mhp 168株為材料,利用Mhp的全菌蛋白作為包被建立了間接ELISA方法,并經臨床試驗證明有一定的實用性[11]。
6.1 預防措施 由于肺炎支原體可通過健康豬與患豬直接接觸或氣溶膠傳播,且傳播距離遠,又常與其他病原體混合感染或繼發感染,引起豬呼吸道綜合征,致使病情進一步加重,防控難度加大。因此,豬支原體肺炎的控制要做到種豬凈化、環境控制、疫苗免疫、藥物預防與治療四步。即推行自繁自養及全進全出的管理模式,加強檢疫檢驗及源頭凈化,改善養殖環境及掐斷中間傳播媒介,開展預防保健及相關疫苗免疫程序,長期堅持,才能有效控制該病的發生。在已發病的地區,要采取積極主動措施,對未發病的豬場或圈舍內的豬接種豬支原體肺炎活疫苗,進行緊急預防[12]。
6.2 藥物的治療 目前許多藥物如四環素、替米考星、泰妙菌素、喹諾酮類等對豬支原體肺炎均有較好的治療效果,能有效抑制該病,但四環素類藥物停藥后效果不佳。泰妙菌素、林可霉素或氟苯尼考等輔以氨茶堿,以及中藥清肺止咳散、定喘散等可治療輕微型豬氣喘病。喹諾酮類藥物多用于針劑,口服時用量過大懷孕母豬易導致停食[13]。用泰樂菌素+魚腥草注射液,按每千克體重肌肉注射0.2 mL,1次/d,5 d為一個療程,但泰樂菌素耐藥情況嚴重,后期藥效下降[3]。合理用藥,藥物投放的時間、種類、劑量、療程應根據豬群狀況確定。由于支原體并未進入血液,主要定植于呼吸道纖毛上,藥物代謝能發揮的有效濃度并不高,因此,藥物對支原體肺炎的防治效果有一定局限性。
豬支原體肺炎普遍存在于世界各地,發病率高,但因病死率低,一度不被養殖戶重視。近年隨著養豬業規模化程度不斷提高,養殖戶已逐步認識到了豬支原體肺炎造成的經濟損失,防疫意識明顯提升。馮志新[14]研究員調查報道顯示,“目前全球豬支原體肺炎感染率在70%~90%,除了北歐的瑞士、芬蘭、丹麥等幾個國家凈化了該病,大部分養豬國家的感染率相差無幾。”每年豬呼吸道疾病引起的直接損失達到100億元以上,在高密度飼養的集約化豬場,一旦暴發該病,引起的經濟損失不容小覷。
作為能夠通過氣溶膠傳播的呼吸道疾病,單靠藥物或疫苗是無法做到豬場豬肺炎支原體的凈化,需要從傳染源、傳播途徑、飼養管理、環境等全面防控。一旦傳入該病后,豬場要采取積極嚴密的措施,否則豬支原體肺炎與其他病原體繼發感染其他疾病,很難徹底撲滅。因此,有必要掌握其流行特點,認識其產生的危害,做好生物防控,加強飼養管理及相關預防治療措施。同時對MPS的正確診斷和及早防控是全球需迫切解決的重要難題。
[1]李瑩瑩,何穎,趙武,等.豬支原體肺炎研究進展[J].動物醫學進展,2013,34(10):95-100.
[2]杜向黨,李新生.豬病類癥鑒別診斷彩色圖譜[M].北京:中國農業出版社,2010:3-4.
[3]李超,孫振曉,姜華衛.豬支原體肺炎的流行及防治[J].畜牧獸醫科技信息,2012(6):89.
[4]Otake S,Dee S,Corzo C,et al.Long-distance airborne transport of infectious PRRSV and Mycoplasma hyopneumoniae from a swine population infected with multiple viral variants[J].Vet Microbiol,2010,145(3/4):198-208.
[5]周勇岐,趙永前.豬支原體肺炎(168株)活疫苗的作用機理與應用[J].中國牧業通訊,2008(10):49-52.
[6]張婧,亓達博.豬支原體肺炎研究進展[J].國外畜牧學(豬與禽),2010,30(4):92-93.
[7]程曉盈,張彥明,王韋華,等.豬支原體肺炎自然病例的臨床和病理學觀察[J].中國動物檢疫,2006(10):40-41.
[8]高玉花,張映,白春雨.豬支原體肺炎診斷方法研究進展[J].中國動物保健,2009,11(4):51-54.
[9]劉茂軍,李冬梅,邵國青,等.豬肺炎支原體PCR鑒定方法的建立[J].金陵科技學院學報,2008(3):99-101.
[10]趙榮茂,姚建聰.豬支原體肺炎血清學檢測技術及其應用[J].豬業科學,2006(11):23-24.
[11]靳岷,邵國青.檢測豬肺炎支原體抗體間接ELISA方法與單抗阻斷ELISA方法的對比試驗[J].畜禽業,2009(1):17-19.
[12]梁彤,林震.豬支原體肺炎病流行特點及防控措施[J].中國畜禽種業,2015,11(5):105.
[13]邵國青.豬喘氣病的控制與凈化方法的建議[J].養豬,2010(6):65-69.
[14]柏麗華.馮志新:豬支原體肺炎弱毒疫苗的局部免疫效果更好[J].今日養豬業,2016(8):46-48.