PCR檢驗法及細菌培養法在陰道細菌檢驗中的應用比較

劉朝志 向廷健

（1四川省德陽市旌陽區疾病預防控制中心檢驗科 四川 德陽 618000）(2四川省德陽市旌陽區人民醫院檢驗科 四川 德陽 618000）

女性的陰道的細菌檢驗對于女性健康非常重要，陰道細菌感染將直接導致女性的陰道炎，所以女性若遇到陰部不適應及時就醫，并進行檢查，及時緩解不適，以防造成陰道感染[1]。嚴重時將直接造成女性不孕，還會給女性的妊娠等造成困難。女性的陰道感染主要是由于患者的陰道內寄生大量細菌，從而導致陰道內環境不平衡造成各種并發癥發生[2]。因此對患者陰道內細菌情況進行有效檢測，并根據具體情況采用相應的治療方法能夠有效改善患者癥狀，臨床常規采用細菌培養法對其進行檢測，但由于檢測時間較長，操作較為復雜，已逐漸無法應對現今情況。隨著檢驗科學的發展，采用PCR對患者情況進行檢測逐步被接受，本研究通過對本院的112名女性陰道細菌的檢驗，比較PCR檢驗法和細菌培養法的優缺點及這兩種方法的應用價值。檢驗PCR檢驗法的有效性。

1.資料和方法

1.1 臨床資料

將我院在2016年8月至2017年8月診治的112例進行陰道細菌檢測的患者作為研究對象，112例患者年齡范圍25～41歲，平均年齡（30.7±2.6）歲，病程（6～22）個月，平均病程（14.9±4.2）個月。納入標準：（1）患者均為育齡期婦女。（2）獲得患者本人及家屬同意。（3）患者有陰道細菌感染的病灶。排除標準：（1）由于主觀因素排斥治療的患者。（2）哺育期的患者。（3）肝腎肺功能異常的患者。兩組患者的在年齡、病程等其他方面具有可比性(P＞0.05)。

1.2 方法

先使用無菌棉棒涂抹陰道后穹窿部位，收集陰道分泌物，并將陰道分泌物置于無菌生理鹽水中儲存，隨后分別將其進行細菌培養檢驗和PCR檢驗。具體操作方法如下：

PCR檢驗法：收集1ml陰道分泌物于離心管中，離心，離心條件為1200r、15min，隨后棄掉上清液，留下沉淀，并加入組織裂解液，置于水浴鍋，60℃水浴15min，然后再次離心，離心條件為1200r、10min，離心完成后取上清液將其作為PCR的擴增DNA模板，使用PCR儀進行擴增循環。

細胞培養法：將細菌接種到之前配置好的5%的羊血培養基中，使用涂布的方法，涂布棒要使用熟練，盡量將培養基表面的液體均勻涂抹開。隨后置于37℃培養箱中培養24小時，待長出明顯菌落后，挑選目標菌落。目標菌落程灰白色，水滴狀。使用ATB半自動微生物鑒定藥敏儀以確定B族鏈球菌。

1.3 觀察指標

觀察兩組女性患者的陰道細菌檢驗情況。主要比較兩組患者的陽性檢出率，本研究中主要包括棒球狀菌、加特納菌、腸球菌三種細菌的檢出。

1.4 統計學處理

數據采用SPSS17.0 軟件進行統計學分析。計量資料應用平均值±標準差(±s)，組間比較采用獨立樣本t檢驗，各項指標以百分率表示，采用χ2檢驗。差異具有可比性，（P＜0.05）。

2.結果

2.1 觀察兩組患者陰道細菌的檢驗情況

觀察組患者使用PCR檢驗法，對照組患者使用細菌培養法，觀察組患者的陽性檢出率為72.32%，對照組患者的陽性檢出率為40.18%。觀察組患者的陽性檢出率高出對照組44.44%。總之，觀察組患者的陽性檢出率遠高于對照組患者的陽性檢出率，各項差異具有可比性，（P＜0.05）。詳見表。

表 兩組患者使用PCR檢驗法與細菌培養法對女性陰道細菌檢驗結果比較（n，%）

3.討論

近年來，細菌性陰道炎的發病率有顯著上升趨勢，給患者日常生活帶來較大影響，該病癥主要導致患者出現白帶異味及外陰瘙癢等癥狀，發病的主要機制為引導內菌群平衡被破壞，導致陰道桿菌數量急劇減少，從而使致病菌所占比例提高，引起癥狀。因此，有效對患者陰道細菌進行檢測，對該癥狀的早期診斷及治療具有重要意義。

對于女性陰道細菌的檢查有兩種方法，包括PCR檢驗法和細菌培養法。細菌培養法長期以來為陰道細菌檢測的“金標準”，能夠較為準確的對患者陰道內細菌情況進行檢測，但隨著患者數量的增加，存在以下不足：（1）操作復雜，采用細菌培養法對培養環境要求較高，在對致病菌進行培養時，需保證其不被外界病菌所污染；（2）檢測時間長，細菌培養時間一般為48h以上，可能造成對患者治療的延誤；（3）檢測結果需反復印證才能確定。PCR檢驗法又稱聚合酶鏈式檢驗法，該方法是將PCR、DNA分子雜交和光譜精確定量三種技術的融合[3]。PCR檢驗法分為DNA變性成單鏈、降溫結合引物模板成雙鏈DNA、延伸擴增[4]。PCR檢驗法還有多種優點，例如：檢驗耗時短、方便有效、操作便捷，是檢驗女性陰道細菌情況的有效方法。

現在醫學表明，PCR檢驗法是檢驗女性陰道細菌的首選方法，能準確地檢出患者的隱患，及時得到治療，使患者擺脫疾病的痛苦。受到了廣大女性患者的深切擁護。

兩組檢驗均順利完成，觀察組患者使用PCR檢驗法，陽性檢出率為72.32%，遠高于對照組患者使用的細菌培養法的陽性檢出率40.18%，各項差異具有可比性，（P＜0.05）。說明采用PCR對患者陰道細菌進行檢查，能夠有效保證檢測質量，同時檢測時間及操作較常規細菌培養法而言，根據有優勢。

綜上所述，使用PCR檢驗法檢測女性患者陰道細菌感染情況的檢驗效果要比細菌培養法的檢驗效果要好的多。

【參考文獻】

[1]李偉萍,鐘旭軍.PCR檢驗法與細菌培養法應用于陰道細菌檢驗中的價值分析[J/OL].中國生化藥物雜志,2017,(11)：356-357.

[2]郭秋霞,楊俊歌.分析PCR檢驗法和細菌培養法用于陰道細菌檢驗的效果[J].中國療養醫學,2017,26(10)：1087-1088.

[3]李穎嫦,羅小娟,黃少珍.PCR檢驗法和細菌培養法在陰道細菌檢驗中的應用研究[J].現代診斷與治療,2017,28(07)：1300-1301.

[4]郭燕.PCR檢驗法和細菌培養法在陰道細菌檢驗中的效果對比[J].保健醫學研究與實踐,2016,13(06)：52-53.