60例甲狀腺癌病例的循環miRNA與靶向基因的臨床相關性分析

裴玉梅,張 靜△,陳春悠,劉雅娟

(1.河北省唐山市工人醫院內分泌科 063000；2.河北省唐山市工人醫院頭頸外科 063000；3.河北省唐山市第九醫院超聲科 063000)

甲狀腺癌是最常見的甲狀腺惡性腫瘤，約占全身惡性腫瘤的1%[1]。除髓樣癌外，絕大部分甲狀腺癌起源于濾泡上皮細胞，其發病率逐年增加，甲狀腺乳頭狀癌約占全部甲狀腺癌病理類型的80%[2-3]。近年來關于循環miRNA與甲狀腺癌的研究也較多，但其具體機制仍不清楚，且每個miRNA作用的靶點所導致的宏觀影響也不明確。因此，本文旨在探究甲狀腺癌病例的循環miRNA與靶向基因的臨床相關性,現將研究結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年2月15日至2017年5月1日來唐山市工人醫院接受治療的60例甲狀腺癌病例作為試驗組，同期接受甲狀腺病理檢查的患者23例作為對照組。試驗組男女比例為2∶3，年齡26～67歲，平均(43.5±2.9)歲；對照組男女比例為6∶17，年齡22～59歲，平均(42.2±3.5)歲。排除標準：<20歲；其他系統重大腫瘤者；精神疾病者；其他系統重大疾病者。所有甲狀腺癌均病理檢查確診，患者及家屬簽署知情同意書，經醫院倫理委員會批準(2014112913)。

1.2方法 收集患者入院時外周靜脈血2 mL和適量甲狀腺組織，采用北京曠博生物技術股份有限公司生產的外周全血和組織qPCR試劑盒進行qPCR試驗，操作過程嚴格按著試劑盒說明書操作。觀察患者外周血和甲狀腺組織中hsa-mir-181b-2、hsa-mir-221、hsa-mir-34a、hsa-mir-21和hsa-mir-222的表達水平。

2 結 果

2.1兩組甲狀腺組織和外周血中相關miRNA表達水平 試驗組5個miRNA指標均明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.01)，hsa-mir-222的表達最高，見圖1。

2.2甲狀腺癌相關循環miRNA相關因素研究 采用一般線性模型對數據進行分析，以未分化癌、無腫瘤浸潤、無遠端轉移、腫瘤直徑小于2 cm及不是復發腫瘤作為參照組。結果顯示，乳頭狀瘤、腫瘤浸潤、遠端轉移是hsa-mir-181b-2的獨立危險因素；乳頭狀癌、髓樣癌、腫瘤浸潤、遠端轉移及腫瘤直徑大于4 cm是hsa-mir-221、hsa-mir-34a、hsa-mir-21表達升高的危險因素；hsa-mir-222在乳頭狀癌中低表達，髓樣癌中高表達，腫瘤浸潤、遠端轉及腫瘤直徑大于4 cm是hsa-mir-222高表達的獨立危險因素，見表1～5。

A：甲狀腺癌患者甲狀腺組織中相關循環miRNA表達情況；B:甲狀腺癌患者外周血中相關循環miRNA表達情況；*：P<0.05，與對照組比較

圖1 兩組甲狀腺組織和外周血中相關miRNA

表2 hsa-mir-221一般線性模型相關因素分析

表3 hsa-mir-222一般線性模型相關因素分析

續表3 hsa-mir-222一般線性模型相關因素分析

表4 hsa-mir-34a一般線性模型相關因素分析

表5 hsa-mir-21一般線性模型相關因素分析

續表5 hsa-mir-21一般線性模型相關因素分析

3 討 論

miRNA是近十年內發現的能夠通過調節RNA的轉錄來調控炎癥因子的產生、腫瘤的形成與分化的一類由18～24個核苷酸組成的小分子[4]。其能夠與靶基因mRNA迅速結合從而抑制其翻譯或激活降解。有研究表明，miRNA能夠調節細胞轉化、癌癥發生、發展中有重要作用，甚至提出其能夠預測腫瘤分類[5]。

hsa-mir-181b-2可以充當促癌基因，其在癌癥的發生、發展過程中發揮一定的作用。TAO等[6]研究表明，hsa-mir-181b-2能夠通過味精同系物2(EZH2)/hsa-mir-181b-2/己糖激酶2(HK2)通路在前列腺癌的發生、發展中發揮積極作用。張笑添等[7]研究發現，miR-181b-2可以作為胃癌早期診斷的標志物，其可能具有癌基因的指示作用。LIU等[8]研究顯示，miR-181b已被發現是連接炎癥和癌癥的關鍵調節性miRNA，其在各種腫瘤和翻譯研究中的功能意義表明，它作為預測和預后的生物標志物具有巨大的潛力。本研究結果顯示，hsa-mir-181b-2在甲狀腺癌組織和外周血中高表達，且在乳頭狀瘤、浸潤性腫瘤和發生遠端轉移的患者中呈高表達，表明其能夠參與甲狀腺乳頭狀癌的發生和發展，其表達是未分化癌的2.314倍。有研究指出，hsa-mir-181b在甲狀腺乳頭狀癌中具有一定診斷價值，進一步證明此觀點[9]。本研究顯示，hsa-mir-221、hsa-mir-34a、hsa-mir-21在甲狀腺乳頭狀癌、髓樣癌、腫瘤浸潤、遠端轉移及腫瘤直徑大于4 cm者中表達較高。hsa-mir-221、hsa-mir-222和hsa-mir-21是已被證實了的具有促癌作用的分子。FENG等[10]研究發現，hsa-mir-221能夠促進細胞增殖，同時抑制胰腺癌細胞凋亡，提出循環mir-211-3p可以作為胰腺癌的生物標志物。XUE等[11]的研究發現，miRNA221和miRNA222表達明顯高于對照組織，在惡性腫瘤組織中二者表達明顯升高。FREZZETTI等[12]研究結果表明，hsa-mir-21在甲狀腺乳頭狀癌中表達升高，與RNA-seq篩選結果相一致，與本研究結果相一致，hsa-mir-21可能通過抑制腫瘤抑制基因PTPN14、PTEN、RECK和TPM1等起到促癌作用。值得注意的是，hsa-mir-222在甲狀腺乳頭狀癌中表達不高，在髓樣癌中表達升高，需要進行進一步研究確認是否可以作為甲狀腺髓樣癌的生物學標志物。多項研究指出，hsa-mir-34a在多種腫瘤細胞中呈現低表達情況，但在甲狀腺乳頭狀癌中呈現高表達[13-14]，這與本研究結果相一致。

綜上所述，hsa-mir-181b-2、hsa-mir-221、hsa-mir-34a、hsa-mir-21、hsa-mir-222均與腫瘤的分化、轉移和直徑相關。

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