免疫檢驗的影響因素分析及初步研究

張 琳

（撫順市第五醫院檢驗科，遼寧 撫順 113003）

免疫功能異常，往往在一定程度上可以對疾病進行預警，由此可見，免疫檢驗的具有一定臨床意義[1]。免疫檢驗涉及到的指標諸多，其中包含對外界條件相對敏感指標。免疫檢驗較為復雜。若未能處理好免疫檢驗影響因素，那么就會對檢驗結果造成影響，不利于疾病方案制定，甚至會對患者疾病轉歸造成影響。因此，認真依照標準環節實施檢驗，排除不利因素，提升檢驗人員職業素養，做好質量控制工作，有著相當重要的臨床意義。結合實際情況，本文收集2015年12月至2016年12月免疫學檢驗資料為研究樣本，全面分析影響檢驗的因素與質控方式，得出心得，現匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集2015年12月至2016年12月免疫學檢驗資料為研究樣本。檢驗項目具體為：HCV-Ab、HAV-Ab、TP-Ab、乙型肝炎五項以及HIV-Ab。數據涵蓋具體檢驗結果和影響因素，樣本總數為8800。

1.2 方法

1.2.1 檢驗前質控工作：確保質量為樣本收集前提，在進行該項工作時，應全面考慮樣本收集時間段，止血帶使用情況和采血姿勢。當對近期使用過激素類藥物患者收集血清時，應當注意其體位改變情況和血液收集時間，避免出現激素峰值。在保存標本時，應當針對性保存，開始免疫檢驗之前，應對相關儀器進行校正與核對，另外也要定期對稀釋棒、吸管以及反應板等定期檢查，以降低實驗誤差。盡量避免使用不同種類試劑盒，以免影響檢測數據。

1.2.2 檢驗中質控工作。室間質量評價法（EQA）：每3個月進行衛生部和上級檢驗中心下發標本，依照相關要求，實施檢驗工作。

室間質量評價法（IQC）：使用夾心法酶免試劑盒，對艾滋病病毒以及肝炎病毒實施檢測。在進行試劑選擇過程中，應當注意好有效期限和保存條件，盡量選擇同一廠家試劑盒。在醫院自行配置試劑時，應當依照相關標準進行。

1.2.3 檢驗后質控工作：所有待檢驗樣本均應通過初檢，檢驗者應對結果進一步審查[2]。若第一次結果為陽性或者疑似陽性，應安排復檢，每次檢測均應使用室內質量控制血清。值得說明的是，在一段時間內 ，實驗室需保留結果，做好相關記錄工作，方便日后查詢。

1.3 統計學原理：本實驗使用SPSS20.0專業統計學軟件，使用線性回歸分析法，探析自變量與因變量之間的關系，當P＜0.05時，證實組間數據存在顯著差異。

2 結 果

經線性回歸分析可知，實驗室溫度和濕度、檢驗者經驗、試劑平衡時長、洗液更換詳情、標本質量為影響檢驗質量的關鍵性因素，組間數據存在顯著差異，P＜0.05。見表1。

3 討 論

公允性強的免疫檢驗結果，可為疾病診斷和治療提供理論依據。在實施免疫檢驗工作過程中，相關人員應當對檢驗結果影響因素給予必要重視。影響免疫檢驗因素主要分為內源性和外源性兩種。詳細為：

3.1 影響因素

3.1.1 內源性因素。常見內源性因素主要有：高水平非特異性免疫球蛋白、異嗜性抗體、部分自身抗體以及補體、類風濕因子等。通常來講，當前臨床使用的血清樣本內均含有一定內源性干擾因素，導致結果可能為假陽性。為了全面預防ELISA法測定過程中受到類風濕因子影響，可通過稀釋血清標本法，降低該物質濃度。由于類風濕因子濃度下降，可保證檢驗結果可靠性，另外，也可以通過改變酶標抗體法提升檢驗精準性，首先使用已發生變性的IgG封閉樣本內類風濕因子，后對抗原加以測定，進而消除干擾[3]。

3.1.2 外源性因素。檢驗室溫度濕度、洗液更換詳情、試劑平衡時間、檢驗者素質以及樣本質量等均為影響免疫結果精準性的外源性因素。

血液標本為免疫檢驗樣本的主要形式，由于這種樣本的特點，決定了其容易發生細菌污染以及凝固不全現象，另外，長時間放置樣本，也會對檢驗結果造成影響。為了預防標本變性，應積極防止溶血，確保檢驗質量。使用質量不合格的采血器具和不良采血習慣，是導致這種現象發生的重要原因。由于血紅蛋白內含有血紅素基團，令其具備與過氧化物相似的性質，使用HRP視為標記酶的ELISA實驗中，如果血紅蛋白濃度較高，很容易在溫育過程中發生吸附固定相情況，后與HRP發生顯色反應，影響結果。

表1 線性回歸結果情況

值得說明的是，在觀察實驗過程內，使用電化學發生免疫分析法對NSE加以檢測，溶血對于該項檢測結果影響最為顯著。若溶血濃度達到1 g/L Hb時，NSE水平會顯著提升，血紅蛋白水平越高，結果受影響概率越大，在通常情況下，溶血度每上升1 g/L，NSE結果就會提升15～35 ng/mL。由此可見，若溶血度過大，最好重新采血，以免影響檢測結果。

3.2 質量控制方式：結合本次實驗相關研究結果，可以就下述幾個方面，進行實驗室質量控制，詳細為：①將酶標板放到4 ℃或25 ℃的孵箱內，其顯示時間差約10 min，若實驗室濕度在40%以下，由于存在靜電作用，塑料器皿附著帶電微粒，令標本受到污染，因此應將濕度控制在30%～60%，溫度保持在18～25 ℃。②標本應現用現處理，防止長時間擱置，細菌污染，反復凍融，溶血和凝固不全現象發生。③控制好試劑平衡時長，檢驗之前應保證實際溫度和室溫相一致，以30 min為宜。④選擇質量可靠的采血器。⑤完成檢驗工作之后，應盡數傾出洗液，并使用蒸餾水洗凈儲液桶，及時更換新的洗液。⑥院方定期開辦講座，提升工作人員的個人素質，防止采血過程中發生不良現象。綜上所述，影響免疫檢驗質量的因素諸多，實驗室溫度、檢驗者經驗以及試劑平衡時間為最主要影響因素，在實施臨床免疫檢驗過程中，檢驗者應依照相關標準進行，重視檢驗過程內的細節問題，這對于保證檢驗質量來講，有著相當重要的現實意義。

[1] 譚遙,黃莉,劉凱,等.初探酶聯免疫斑點法檢測T細胞免疫功能質控要點[J].檢驗醫學與臨床,2014,11(23):3384-3385.

[2] 張婉婷,陳靈.影響酶增強免疫分析法測定丙戊酸血藥濃度質量控制的因素分析[J].中國醫院藥學雜志,2014,34(9):762-764.

[3] 張巧娣,謝而付,付煜,等.胰島素放射免疫檢測技術外部影響因素分析[J].檢驗醫學與臨床,2016,13(16):2256-2257.