EDTA依賴性血小板假性減少的分析與處理探討

楊婷

【摘要】目的：分析EDTA依賴性血小板假性減少的原因，總結處理經驗。方法：回顧性分析93198例患者，其中56例確診為EDTA依賴性PTCP。對診斷為EDTA-PTCP的患者重新抽取外周血，分別采用EDTA抗凝、檸檬酸鈉抗凝，在采血后重復計數。并檢測ALT、AST、ALP、UA等指標，進行相關性分析。結果：EDTA、檸檬酸鈉抗凝檢測，0、15、30、60、120、18 0min血小板計數呈逐漸下降趨勢，下降速度減緩，最后趨于平穩。15、30、60、120、180min，EDTA抗凝血小板計數低于檸檬酸鈉抗凝患者。EDTA-PTCP的患者采用EDTA抗凝后，鏡下有明顯的聚集，隨著時間的推移，可見的聚集明顯增多。男性的EDTA-PTCP檢出率高于女性，不同年齡EDTA-PTCP檢出率存在差異（P<0.05）。相關性分析顯示，PLT與ALT、AST、ALP、UA存在相關性（r=0.451、0.530、0.384、0.508，P

【關鍵詞】血小板假性減少;EDTA抗凝劑;檢驗質量管理

血小板檢測被廣泛用于血栓性疾病、血液病等疾病的診斷和療效評估。傳統的血小板手工計數法己被分析儀代替，儀器檢測具有快速、準確、隨機誤差小、測試項目多等優點。但是儀器檢測常會出現假性血小板減少（PTCP）的現象。導致PTCP發生的影響因素較多，包括EDTA-K2、冷凝集素、衛星現象、藥物以及采血操作不當等[1]。本文采用實驗研究和回顧性分析相結合的方法，分析在2016年1月～2017年12月期間診斷為EDTA依賴性血小板假性減少的56例患者，討論EDTA對血小板計數的影響，并總結處理對策。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2016年1月～2017年12月期間93198例門診、住院患者，其中56例確診為EDTA依賴性PTCP，男性40例、女性16例，年齡分布在24～71歲，平均年齡（50.3±8.4）歲。

1.2 儀器與試劑

主要包括貝克曼LH750全自動血細胞分析儀、日立7600全自動生化分析儀、奧林巴斯顯微鏡、檸檬酸鈉抗凝管與EDTA-K2抗凝管，所有試劑、校準品、質控品等均為原裝配套試劑。

1.3 方法

對診斷為EDTA-PTCP的患者重新抽取外周血，分別采用EDTA和檸檬酸鈉抗凝。分別在采血后O、15、30、60、120、180min重復計數，同時進行手工瑞氏染色血涂片檢查，顯微鏡下觀察是否出現聚集，記錄未校正以及校正后的指標。

對于EDTA-PTCP的患者，同時進行ALT、AST、ALP、UA等常規生化檢驗，并進行相關性分析。

1.4 統計學處理

采用SPSS20.0軟件進行統計學分析，血小板計數水平不服從正態分布，采用中位數與四分位距M（P25-P75）表示，非參數檢驗。性別比、不同年齡EDTA-PTCP檢出率采用X2檢驗比較，相關性分析采用Spearman相關性分析，以P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 不同抗凝方法不同時間血小板計數以及顯微鏡下表現

EDTA、檸檬酸鈉抗凝血小板計數，Omin檢測差異無統計學意義（P>0.05）。15、30、60、120、180min血小板計數呈逐漸下降趨勢，下降速度減緩，最后趨于平穩。15、30、60、120、180min，EDTA抗凝血小板計數EDTA低于檸檬酸鈉抗凝患者，差異具有統計學意義（P<0.05）（見表1）。EDTA-PTCP的患者采用EDTA抗凝后，鏡下有明顯的聚集，隨著時間的推移，可見的聚集明顯增多，至120min后幾乎覆蓋在整個顯微鏡視野內。

2.2 因素分析

男性的EDTA-PTCP檢出率高于女性，差異具有統計學意義（P<0.05），不同年齡EDTA-PTCP檢出率差異有統計學意義（P<0.05），見表2。

2.3 相關性分析

相關性分析顯示，PLT與ALT、AST、ALP、UA存在相關性（r=0.451、0.530、0.3 84、0.508，P<0.05）。

3 討論

本次研究中，2016-2017年的ED TA-PTCP檢出率約為0.06%，處于正常水平，與其它文獻報道的結果基本相符.發生率約為0.05%～0.2%不等[2-3]。本次研究顯示，EDTA-PTCP采用檸檬酸鈉抗凝可以有效的避免PLT因EDTA作用下降。同時研究顯示隨著時間的推移，兩種抗凝結果都會顯著下降，所以無論采用何種抗凝，都提倡及早送檢，避免因等待時間過長，導致PLT假性偏低。在實際檢測過程中，PLT偏低與送檢時間過長等原因有關，可能會掩蓋EDTA-PTCP，實際上EDTA-PTCP高于統計的結果。

相關性分析顯示，PLT與ALT、AST、ALP、UA存在相關性（r=0.451、0.530、0.3 84、0.508，P<0.05）， 反 映EDTA-PTCP可能與肝功能異常、高尿酸有關。這可能與機體在病理狀態下產生導致EDTA-PTCP的特殊蛋白、纖維蛋白原受體、糖蛋白（glycoprotein，GP）a II b、β IIIa有關。肝功能的變化對PLT活性影響較大，肝功能受損，患者更容易出現膽汁淤積，誘導肝臟內的P選擇素介導血小板聚集與凝集。血尿酸與心血管疾病、糖尿病關系密切，而這兩種疾病均與血小板假性降低有關，可能與心血管疾病、糖尿病所致的炎癥引起血小板表面蛋白變化有關。

有報道顯示[4]，在某些骨髓增殖性疾病疾病中，異常的功能的PLT在EDTA存在情況下也更容易出現血小板聚集。血小板凝集通常發生在血標本與EDTA抗凝劑接觸的幾分鐘之內，血液分析儀難以對血凝塊進行分類鑒別，儀器會進行報警。但是在實踐過程中，有部分血凝并不明顯，報警可能并不準確，白細胞直方因為血小扳凝集團生成一個特定的信號，但這種信號并不完全準確，有部分患者EDTA-PTCP被忽視。

4 小結

EDTA依賴性血小板假性減少多見于50歲以上男性;對于血小板偏低的患者，首先血涂片顯微鏡下鏡檢，發現凝集者需要采用檸檬酸鈉抗凝重測，以判斷是否為EDTA依賴性PTCP，并采用多種方法進行糾正。

參考文獻

[1]楊江民.XS-5001全自動血細胞分析儀測定血小板假性減少原因分析及糾正方法探討[J].青海醫藥雜志，2017，47 （11）： 41-42.

[2]郭謙，王曉健，曹榮，等.對EDTA-K2依賴性假性血小板減少不同檢測方法結果的比較[J].山西職工醫學院學報，2018，28 （01）： 17-20.

[3]羅磊，朱建鋒，王蓓麗，等.震蕩法在糾正EDTA依賴的假性血小板減少中的應用[J].中國臨床醫學，2018， 25 （01）： 100-102.

[4]余海濤。淺談EDTA-K2依賴性假性血小板減少癥對血小板計數的影響[J].醫藥前沿，2017，7 （06）：218-219.