廣西牛羊主要呼吸道疫病的血清學(xué)調(diào)查

韓林梅 ，吳翠蘭 ，李 軍 ?，余艷娟 ，潘 艷 ，李常挺 ，陶 立 ，曾 蕓 ?

（1.廣西大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院 530004；2.廣西獸醫(yī)研究所 廣西獸醫(yī)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 530001；3.桂林市水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)局 541199）

牛呼吸道疫病綜合征是由傳染性牛鼻氣管炎病毒、牛支原體等病原與宿主自身應(yīng)激相互作用形成的一種呼吸系統(tǒng)疫病[1]。該病是歐洲的三大牛病之一；在澳大利亞的中大型肉牛場，有70%以上的臨床疫病和50%的死亡率是由呼吸道疫病引起[2]；美國全國牛場主協(xié)會也將牛呼吸道疫病綜合征列為養(yǎng)牛業(yè)的頭等大病。在我國，隨著“北牛南育”模式的不斷發(fā)展，牛呼吸道疫病綜合征的發(fā)病率也在不斷上升，對我國養(yǎng)牛業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

羊呼吸道疫病主要是由綿羊肺炎支原體、溶血曼氏桿菌和化膿隱秘桿菌等呼吸道條件性致病菌引起，通常是由天氣、生理壓力和細(xì)菌的聯(lián)合作用等不利因素共同作用的結(jié)果，僅通過臨床癥狀觀察，很難確定具體的感染病原。

近年來，隨著廣西農(nóng)業(yè)供給側(cè)結(jié)構(gòu)性改革的深入，部分地市為了實(shí)現(xiàn)當(dāng)?shù)匦竽翗I(yè)增效和養(yǎng)殖農(nóng)民增收，出臺了牛羊養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展扶持政策，牛羊養(yǎng)殖規(guī)模得到迅速發(fā)展，但隨之而來的是牛羊疫病也逐年增加，尤其是以呼吸道癥狀為主要特征的疫病給養(yǎng)殖戶造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為此，本研究針對危害牛羊養(yǎng)殖業(yè)最嚴(yán)重的呼吸道疫病—傳染性牛鼻氣管炎，牛支原體，綿羊肺炎支原體進(jìn)行血清學(xué)調(diào)查，從血清學(xué)方面調(diào)查了其感染情況，為上述疫病的防控提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品來源

樣品來自廣西6個牛羊養(yǎng)殖重點(diǎn)城市的牛羊血清。每個城市每年采集200份，2016年和2017年兩年共采集2400份牛血清和2400份羊血清。采樣的牛場均未進(jìn)行傳染性牛鼻氣管炎和牛支原體的疫苗免疫。采樣的羊場未進(jìn)行羊支原體肺炎疫苗的免疫。

1.1.2 主要儀器與試劑

酶標(biāo)儀SPARK 10M購自澳大利亞SPARK公司；離心機(jī)購自德國 eppendorf公司；移液器(單道、8道、12道）購自德國 eppendorf公司；4℃醫(yī)用冰箱購自中科美菱；-20℃冷凍冰柜購自澳柯瑪股份公司；純水儀購自北京卓信博澳公司；傳染性牛鼻氣管炎病毒gE抗體檢測試劑盒購自美國IDEXX公司；牛支原體肺炎抗體檢測試劑盒購自加拿大Biovet公司；綿羊肺炎支原體抗體檢測試劑盒購自美國KERNEL公司。

1.2 方法

分別按照各抗體檢測試劑盒的使用說明書進(jìn)行傳染性牛鼻氣管炎病毒抗體、牛支原體抗體和綿羊肺炎支原體抗體的檢測，按說明書進(jìn)行檢測結(jié)果的判斷。

2 結(jié)果

2.1 傳染性牛鼻氣管炎的抗體檢測結(jié)果

廣西6市2016年和2017年傳染性牛鼻氣管炎的檢測結(jié)果顯示，廣西6個市2400份血清的傳染性牛鼻氣管炎抗體個體平均陽性率為36.45%（875/2400），場群平均陽性率為72.18%（96/133）。2016年和2017年廣西6市牛血清的傳染性牛鼻氣管炎個體陽性率分別為 27.33%(328/1200)，45.58%(547/1200)；群體陽性率分別為 58.93%(33/56)，81.82%(63/77)（表 1）。經(jīng) t檢驗(yàn)，2017 年傳染性牛鼻氣管炎的個體陽性率和群體陽性率均高于2016年，呈差異顯著和差異極顯著。

表1 2016年～2017年廣西6市傳染性牛鼻氣管炎的檢測結(jié)果

圖1 2016年～2017年廣西6市IBRV的感染趨勢

2016年～2017年廣西6個市傳染性牛鼻氣管炎的感染趨勢，總體呈現(xiàn)出不同程度的上升（圖1），6個市中，以BS市在的傳染性牛鼻氣管炎感染最為嚴(yán)重。對2017年和2016年的傳染性牛鼻氣管炎感染率進(jìn)行t檢驗(yàn)，BS市差異極顯著（P＜0.01）；GG市、HZ 市、LZ 市、NN 市差異顯著（P＜0.05）；LB 市差異不顯著(P＞0.05)。

2.2 牛支原體的抗體檢測結(jié)果

廣西6市2016年～2017年牛支原體檢測結(jié)果顯示，個體抗體陽性率為 30.92%（742/2400），群體陽性率為 67.18%（86/128）。2016年和2017年廣西6市牛支原體抗體個體陽性率分別為23.33%（280/1200），38.5%（462/1200），群體陽性率分別為 59.2%（36/61），74.62%（50/67）（表 2）。 經(jīng) t檢驗(yàn)，2017 年牛支原體的個體陽性率和群體陽性率均高于2016年，呈差異顯著和差異極顯著。

表2 2016年～2017年廣西6市牛支原體的抗體檢測結(jié)果

2016年～2017年廣西6個市牛支原體的感染趨勢，總體呈現(xiàn)出的是不同程度的上升（圖2），HZ市在6個市中的牛支原體感染最高，LZ市在6個市中的牛支原體感染最低。對2017年和2016年的牛支原體感染率進(jìn)行t檢驗(yàn)，HZ市、GG市、HZ市、LB市、NN 市差異顯著（P＜0.05）,LZ 市差異不顯著(P＞0.05)。

圖2 2016年～2017年廣西6市牛支原體的感染趨勢

對2016年～2017年采集的2400份牛血清進(jìn)行傳染性牛鼻氣管炎抗體和牛支原體抗體的雙陽性結(jié)果統(tǒng)計結(jié)果顯示，其雙重感染率為12.21%（293/2400）（表3）。其中，在傳染性牛鼻氣管炎抗體陽性的牛血清中，牛支原體抗體也為陽性的比率為33.48%(293/875)；而在牛支原體抗體陽性的牛血清中，傳染性牛鼻氣管炎抗體也為陽性的比率為39.48%(293/742)。經(jīng)t檢驗(yàn)，兩者差異不顯著。

2.3 綿羊肺炎支原體的抗體檢測結(jié)果

廣西6市2016年和2017年綿羊肺炎支原體的檢測結(jié)果顯示，廣西6個市2400份血清的綿羊肺炎支原體抗體個體陽性率為 40.66%（976/2400），場群陽性率為 77.14%（81/105）（表 3）。2016年和2017年廣西6市羊血清的綿羊肺炎支原體個體陽性率分別為 32.2%（386/1200）和 49.2%（590/1200）；群體陽性率分別為72.88%(43/59)和82.61%(38/64)。經(jīng)t檢驗(yàn)，2017年綿羊肺炎支原體的個體陽性率和群體陽性率均高于2016年，呈差異極顯著和不顯著。

表3 2016年～2017年廣西綿羊肺炎支原體的抗體檢測結(jié)果

2016年～2017年廣西6個市綿羊肺炎支原體的感染趨勢，總體呈現(xiàn)出的是不同程度的上升（圖3）。GG市在6個市中的綿羊肺炎支原體感染最為嚴(yán)重，LZ市感染最低。對2017年和2016年的綿羊肺炎支原體感染率進(jìn)行t檢驗(yàn)，BS市、GG市、HZ市、LZ市、LB 市、NN 市差異均不顯著（P＞0.05）。

圖3 廣西2016年～2017綿羊肺炎支原體的感染趨勢

3 討論

近年來，廣西牛羊養(yǎng)殖業(yè)得到政府的大力扶持，但是在規(guī)模和數(shù)量上遠(yuǎn)不及北方地區(qū)。由于廣西本地牛羊良種有限，不足以滿足自身需求，需要從周邊省份或者內(nèi)蒙、山東、吉林、新疆等牛羊養(yǎng)殖大省引進(jìn)牛羊。本研究結(jié)果顯示，2016年～2017年廣西傳染性牛鼻氣管炎的平均個體抗體陽性率為36.45%，其抗體陽性率雖較北方低[3]，但是2017年廣西6市傳染性牛鼻氣管炎的抗體陽性率與2016年相比，同比增長66.77%，說明傳染性牛鼻氣管炎已經(jīng)嚴(yán)重感染廣西養(yǎng)牛業(yè)。究其原因可能有以下兩點(diǎn)：其一，養(yǎng)殖戶從外地引進(jìn)的牛在混群前未做傳染性牛鼻氣管炎的感染檢測，致使攜帶傳染性牛鼻氣管炎病毒的牛在本場傳播病毒；其二，可能運(yùn)輸工具未經(jīng)消毒又繼續(xù)運(yùn)輸牛群，導(dǎo)致病毒引入本地牛場。傳染性牛鼻氣管炎主要感染肉牛，以犢牛最為易感，若牛受到傳染性牛鼻氣管炎感染將會長期或終身帶毒，對牛場構(gòu)成持續(xù)性威脅。本研究結(jié)果顯示，傳染性牛鼻氣管炎已在廣西廣泛流行，需要引起相關(guān)部門對該病的預(yù)防工作的重視。

廣西獸醫(yī)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室于2013年首次分離到廣西地區(qū)牛支原體，并證實(shí)牛支原體已經(jīng)成為導(dǎo)致廣西肉牛引種回來后爆發(fā)牛呼吸道疫病綜合征的主要病原[4,5]。Fu等[6]報道2011年廣西奶牛牛支原體的感染陽性率在3.3%～14.89%之間，而本研究結(jié)果顯示，2016年～2017年其陽性率分別為23.33%和38.5%，這表明牛支原體在廣西地區(qū)呈地方性流行，感染強(qiáng)度較2011年增加。

綿羊肺炎支原體在世界各國都普遍存在，特別是養(yǎng)羊業(yè)發(fā)達(dá)的澳大利亞、以及歐美等國家。本研究結(jié)果顯示，2016年～2017年廣西的綿羊肺炎支原體抗體陽性率總體為40.6%，遠(yuǎn)高于廣西獸醫(yī)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室在2010年的檢測數(shù)據(jù)（抗體陽性率18.89%）[7]。出現(xiàn)這種情況可能主要有以下幾點(diǎn)原因：其一，廣西區(qū)內(nèi)缺乏優(yōu)良品種，需要大批引種；其二，頻繁的市場貿(mào)易；其三，飼養(yǎng)管理水平低以及養(yǎng)殖戶缺乏相關(guān)的專業(yè)知識。由于廣西肉羊養(yǎng)殖業(yè)處于發(fā)展階段，必需加強(qiáng)對該病的防控。

2016年～2017年廣西6市傳染性牛鼻氣管炎、牛支原體、綿羊肺炎支原體的群體感染率和個體感染率每年都均以不同程度的速度上升，側(cè)面反映出廣西牛羊養(yǎng)殖的發(fā)展，不僅給廣西地區(qū)帶來了機(jī)遇，還帶來了挑戰(zhàn)。為此，解決好廣西養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展帶來的問題仍需各相關(guān)部門共同努力。