線葉金雀花的研究進(jìn)展＊

馬 青，唐民科

（北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院 北京 102488）

1 化學(xué)成分

線葉金雀花中富含酚酸類及黃酮類化學(xué)成分。其中酚酸類成分中4種為羥基苯甲酸類，包括4-羥基苯甲酸、原兒茶酸、香草酸以及丁香酸，4種為苯丙酸類，包括對(duì)羥基桂皮酸、咖啡酸、阿魏酸以及4-羥基-3,5-二甲氧基桂皮酸[2]。黃酮類成分包括槲皮素、蘆丁、異槲皮苷、東方蓼黃素、異東方蓼黃素、木犀草素、牡荊素、異牡荊素、金圣草素、aspalathin和nothofagin等[3]。一般認(rèn)為，酚酸類成分是抗微生物、保肝、抗氧化等功能的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。黃酮類成分對(duì)抗氧化應(yīng)激、解痙、抗病毒等作用具有重要意義。值得一提的是，線葉金雀花中含有自然界中少見的碳-碳聯(lián)結(jié)的雙氫查爾酮苷成分：aspalathin和nothofagin，其是抗氧化活性的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，并作為線葉金雀花質(zhì)量控制的指標(biāo)[4]。

2 藥理作用

2.1 自由基清除及抗氧化作用

過量的活性氧（reactive oxygen species，ROS）或自由基會(huì)影響機(jī)體的抗氧化防御系統(tǒng)，氧化性損傷產(chǎn)物積累，引發(fā)多種神經(jīng)退行性疾病。線葉金雀花由于含有較大比例的多酚及黃酮類化合物，所以可能是抗氧化劑的良好來源。Kroyer G T.通過folin-ciocalteu試劑法及DPPH自由基清除法比較線葉金雀花與綠茶水提取液的總多酚含量及清除自由基的能力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，線葉金雀花水提取液的總多酚含量（315 mg·g-1）顯著高于綠茶水提取液（209 mg·g-1），自由基清除率半數(shù)有效劑量EC50（138 mg·g-1）顯著高于綠茶水提取液的EC50（424 mg·g-1），表明線葉金雀花具有高含量的總多酚和顯著的抗氧化及自由基清除能力，可以作為天然食品抗氧化添加劑[5]。此外，Yoo，Kyung Mi與Joubert E也發(fā)現(xiàn)線葉金雀花水提取液可清除超氧陰離子和羥基自由基[6-7]。

Hong，In-Sun等通過利用慢性約束或固定導(dǎo)致的慢性心理應(yīng)激動(dòng)物模型觀察氧化應(yīng)激與活性氧（ROS）或自由基的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)線葉金雀花可防止脂質(zhì)過氧化（lipid peroxidation，LPO），調(diào)節(jié)谷胱甘肽代謝（reduced glutathione，GSH和GSH/GSSG，oxidized glutathione），調(diào)節(jié)抗氧化酶（superoxide dismutase，SOD和catalase，CAT）活性的變化，緩解氧化導(dǎo)致的損傷，證明線葉金雀花可以改善氧化應(yīng)激損傷[8]。

Awoniyi研究線葉金雀花調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激的作用。通過給予所有動(dòng)物線葉金雀花提取液10周，并在最后2周時(shí)腹腔注射叔丁基過氧化氫制備氧化應(yīng)激（OS）動(dòng)物模型，發(fā)現(xiàn)在睪丸組織中超氧化物歧化酶（SOD）活性顯著升高，谷胱甘肽水平顯著增加，活性氧（ROS）水平顯著減少，同時(shí)測(cè)定表征脂質(zhì)過氧化程度的硫代巴比妥酸反應(yīng)物質(zhì)（TBARS）明顯降低。其認(rèn)為線葉金雀花提取液可以通過增加抗氧化損傷的保護(hù)效果，降低脂質(zhì)過氧化從而在睪丸組織中形成抗氧化防御機(jī)制[9]。

2.2 心血管保護(hù)作用

眾所周知，作為一線降壓藥物的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑，降壓作用溫和、持久，可保護(hù)靶器官，用于治療高血壓和心臟病。Persson I A等通過讓17名健康志愿者接受單次口服劑量的400ml綠茶、紅茶和線葉金雀花，在0、30、60和180分鐘時(shí)測(cè)定血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（angiotensin converting enzyme，ACE）活性和一氧化氮（nitric oxide，NO）濃度，觀察線葉金雀花保護(hù)心血管作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在30、60 min后，ACE被顯著抑制，表明線葉金雀花可能通過抑制ACE的活性來發(fā)揮保護(hù)心血管的作用[10]。

Marnewick等通過讓40個(gè)志愿者每天服用6杯線葉金雀花，持續(xù)6周，觀察線葉金雀花對(duì)生物化學(xué)和氧化應(yīng)激參數(shù)的成人心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)影響。通過測(cè)定抗氧化活性總多酚含量，氧化還原狀態(tài)（總谷胱甘肽-total glutathione，TGSH，還原型：氧化型谷胱甘肽-GSH：GSSG），脂質(zhì)代謝指標(biāo)（總膽固醇水平-TC，甘油三酯水平-TG，低密度脂蛋白含量-LDL和高密度脂蛋白含量-HDL）和肝、腎功能，顯示線葉金雀花可顯著改善脂質(zhì)輪廓以及氧化還原狀態(tài)，減少發(fā)生心臟病相關(guān)的心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)[11]。

Persson通過探討線葉金雀花與血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（ACE）和一氧化氮（NO）之間的關(guān)系解釋線葉金雀花對(duì)于心血管系統(tǒng)的保護(hù)作用。通過觀察線葉金雀花對(duì)體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）作用，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過一段時(shí)間后其可以呈劑量依賴性抑制ACE活性，劑量依賴性增加NO含量，證實(shí)線葉金雀花可能具有預(yù)防和改善心血管疾病的潛力[12]。

(1) 模型尺寸的確定。本文利用ABAQUS軟件對(duì)整個(gè)基礎(chǔ)進(jìn)行建模，模型相關(guān)尺寸，通過參考基礎(chǔ)相關(guān)設(shè)計(jì)及施工資料進(jìn)行確定。根據(jù)風(fēng)機(jī)基礎(chǔ)設(shè)計(jì)資料，外部及風(fēng)機(jī)自身荷載直接作用于基礎(chǔ)頂面T型法蘭中心位置，風(fēng)機(jī)錨桿基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)參數(shù)如表3所示。

2.3 腦血管保護(hù)作用

腦缺血再灌注（cerebral ischemia reperfusion，CIR）是最常見的腦血管病類型，屬于缺血性腦血管疾病，約占腦血管病的70%-80%，主要是指由于腦部缺血導(dǎo)致腦細(xì)胞受損，恢復(fù)血流再灌注后，缺血性損傷進(jìn)一步加重的現(xiàn)象。高發(fā)病率，高復(fù)發(fā)率，高致殘率以及高死亡率是其主要特點(diǎn)，使其備受關(guān)注。CIR是一個(gè)復(fù)雜的病理級(jí)聯(lián)反應(yīng)過程，涉及多方面因素，主要包括氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞內(nèi)鈣超載、興奮性氨基酸毒性、血腦屏障受損、凋亡通路以及氮化應(yīng)激等。其中研究發(fā)現(xiàn)氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)是導(dǎo)致CIR的兩個(gè)重要因素，而線葉金雀花具有較好的抗氧化應(yīng)激及抗炎癥損傷的特性，所以其對(duì)于CIR的治療具有深刻意義。

體內(nèi)研究證實(shí)，線葉金雀花對(duì)CIR小鼠腦組織具有保護(hù)作用，該作用可能與其抗氧化應(yīng)激、抗炎癥損傷反應(yīng)有關(guān)。其能促進(jìn)CIR小鼠神經(jīng)功能恢復(fù)，具體表現(xiàn)為：顯著減少腦梗死體積，改善神經(jīng)功能（神經(jīng)功能評(píng)分），協(xié)調(diào)肢體運(yùn)動(dòng)性（平衡木實(shí)驗(yàn)），改善感覺功能（轉(zhuǎn)角實(shí)驗(yàn)），提高學(xué)習(xí)記憶能力（Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)）；還可以顯著升高腦組織中的SOD、CAT活性及GSH含量，顯著降低MDA和GSSG含量，促進(jìn)GSH-Px活性，減輕腦缺血再灌注引起的氧化應(yīng)激，提高腦組織抗氧化系統(tǒng)的功能；顯著降低TNF-α、IL-1β與ICAM-1含量以及降低MPO活性，減輕腦缺血再灌注引起的炎癥反應(yīng)，減少炎癥因子、抑制相關(guān)酶活性[13]。Akinrinmade O等還通過使用標(biāo)準(zhǔn)方法評(píng)估神經(jīng)行為缺陷，腦水腫，血腦屏障損傷，細(xì)胞凋亡，脂質(zhì)過氧化和總抗氧化能力，發(fā)現(xiàn)食用線葉金雀花的動(dòng)物可明顯減輕腦水腫和神經(jīng)細(xì)胞凋亡，顯著降低脂質(zhì)過氧化水平，增加總抗氧化能力，改善神經(jīng)行為從而對(duì)缺血性腦損傷提供神經(jīng)保護(hù)作用[14]。

2.4 降血糖作用

線葉金雀花可治療糖尿病大鼠的氧化應(yīng)激損傷，用于預(yù)防和治療糖尿病性血管并發(fā)癥，特別是用來抑制活性氧對(duì)于眼膜系統(tǒng)的過氧化作用。Ulicná O等通過觀察鏈脲霉素誘導(dǎo)糖尿病大鼠的血漿和不同組織中的晚期糖基化終產(chǎn)物（AGE）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）的含量，發(fā)現(xiàn)線葉金雀花可以顯著降低其含量，特別是眼部MDA[15]，說明線葉金雀花可防止鏈脲霉素誘導(dǎo)糖尿病大鼠的氧化應(yīng)激的影響。

Kawano A等通過檢查培養(yǎng)的L6肌管對(duì)葡萄糖攝取的影響以及培養(yǎng)的RIN-5F胰腺β-細(xì)胞在體外對(duì)胰島素分泌的影響研究線葉金雀花中特有黃酮類aspalathin對(duì)葡萄糖代謝的影響，得出結(jié)論為aspalathin通過刺激肌肉組織中的葡萄糖攝取和胰腺β細(xì)胞的胰島素分泌，對(duì)2型糖尿病中的葡萄糖體內(nèi)平衡具有有益的作用[16]。

激活NLRP3炎性體可對(duì)脂肪組織，骨骼肌胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等產(chǎn)生影響，從而引起胰島素抵抗性，同時(shí)影響胰島β細(xì)胞的功能及胰島素的分泌，因此抑制NLRP3炎性體的激活有望成為2型糖尿病的治療的新靶點(diǎn)。線葉金雀花可清除活性氧簇，影響腎臟細(xì)胞中NLRP3炎性小體的激活，抑制白細(xì)胞介素（IL-1β、IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）炎性因子的釋放，從而發(fā)揮對(duì)糖尿病腎病大鼠的保護(hù)作用[17]。

動(dòng)脈粥樣硬化癥為常見的糖尿病并發(fā)癥，而血管炎癥在動(dòng)脈粥樣硬化癥的起始和發(fā)展進(jìn)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。Aspalathin和nothofagin是線葉金雀花中發(fā)現(xiàn)的兩種主要的抗氧化活性物質(zhì)。Sae-Kwang Ku等通過評(píng)估Aspalathin或nothofagin可以抑制人類臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs）和小鼠高葡萄糖（high sugar，HG）誘導(dǎo)的血管炎癥，得出Aspalathin或nothofagin可能在糖尿病并發(fā)癥的治療中具有顯著的作用[18]。

2.5 抗癌、抗誘變作用

線葉金雀花可通過改變細(xì)胞的氧化狀態(tài)、致癌物質(zhì)的代謝酶類、減少致癌物質(zhì)與生物大分子的結(jié)合、抑制細(xì)胞的增殖和凋亡等方式發(fā)揮抑癌和抗誘變的作用。van der Merwe J D等通過比較南非線葉金雀花、蜜樹茶及茶樹茶（黑、烏龍和綠茶）的抗誘變活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，多酚類化合物具有抗誘變的作用[19]。Marnewick等用線葉金雀花、蜜樹茶和綠茶測(cè)定小鼠皮膚癌發(fā)生時(shí)的調(diào)節(jié)作用，結(jié)果表明線葉金雀花提取物可以明顯地抑制皮膚腫瘤形成[20]。

Sissing L等調(diào)查監(jiān)測(cè)了線葉金雀花、蜜樹茶、山茶對(duì)甲基芐基亞硝胺（methylbenzy-lnitrosamine，MBN）誘導(dǎo)的食管鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生的調(diào)制作用，發(fā)現(xiàn)線葉金雀花可以抑制腫瘤的發(fā)展，為其作為癌癥預(yù)防劑提供了依據(jù)[21]。Marnewick J.通過觀察線葉金雀花對(duì)于甲基芐基亞硝胺（MBN）誘導(dǎo)的大鼠食管鱗狀細(xì)胞癌的作用，發(fā)現(xiàn)總?cè)轭^狀瘤平均值的下降與總多酚的減少有關(guān)，線葉金雀花提取物中多酚成分的減少會(huì)降低乳頭狀瘤的抑制作用，因此可將線葉金雀花作為癌癥預(yù)防劑[21]。

2.6 抗炎作用

脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）誘導(dǎo)的急性肝損傷過程涉及氧化應(yīng)激和促炎細(xì)胞因子的釋放。研究調(diào)查了線葉金雀花提取物對(duì)LPS誘導(dǎo)的急性肝損傷的改善效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，線葉金雀花可以減弱LPS誘導(dǎo)的肝損傷，抑制炎癥反應(yīng)，推測(cè)該作用可能與調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激以及抑制促炎細(xì)胞因子釋放有關(guān)[22]。

紅棕櫚油（red palm oil，RPO）富含必需脂肪酸和脂溶性抗氧化劑，而線葉金雀花含有獨(dú)特組成的黃酮類化合物。它們的組合可以導(dǎo)致針對(duì)某些病理狀況例如炎癥的增強(qiáng)保護(hù)。通過觀察紅棕櫚油和線葉金雀花的組合顯示大鼠的抗炎效果，結(jié)果表明，RPO和線葉金雀花單獨(dú)補(bǔ)充時(shí)顯示出在全身水平的抗炎作用，而它們的組合在心肌組織中可增強(qiáng)抗炎作用。因此認(rèn)為，這兩種天然食物物質(zhì)的組合在炎癥起主要作用的臨床相關(guān)病癥中可能是有益的[23]。

2.7 保肝作用

線葉金雀花具有肝臟保護(hù)功能。Ulicná O等通過研究線葉金雀花對(duì)由四氯化碳所誘導(dǎo)的大鼠肝損傷模型的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)在肝病患者的飲食中使用線葉金雀花可作為植物肝臟保護(hù)劑[24]。Ajuwon Olawale Razaq等通過對(duì)叔丁基過氧化氫（tert-butyl hydroperoxide，t-BHP）誘導(dǎo)的肝臟和腎臟氧化應(yīng)激損傷的研究發(fā)現(xiàn)線葉金雀花的補(bǔ)充能夠減輕t-BHP誘導(dǎo)的肝臟腎臟變化，表明其能夠防止肝和腎毒性氧化損傷[25]。由于腹腔注射脂多糖（LPS）后引發(fā)急性肝損傷。氧化應(yīng)激和促炎細(xì)胞因子的釋放都與LPS誘導(dǎo)的急性肝損傷的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。所以Ajuwon O R等通過將線葉金雀花提取物作用于急性肝損傷動(dòng)物，發(fā)現(xiàn)其可以顯著降低LPS誘導(dǎo)血清AST和LDH以及ALT水平，并且可以引起血漿和肝臟的MDA含量降低，全血和肝臟的GSH與GSSG比值下降，以及各種抗氧化酶的變化的注意。TNF-α和IL-6表達(dá)明顯受到抑制，表明線葉金雀花可以通過抑制氧化應(yīng)激以及炎癥損傷而有效改善脂多糖誘導(dǎo)的急性肝損傷[26]。

2.8 消化系統(tǒng)保護(hù)作用

線葉金雀花已廣泛用于腹部痙攣和腹瀉。Gilani AH等通過用兔空腸組織實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示線葉金雀花中黃酮及其他有效成分的生理活性物質(zhì)可以對(duì)消化系統(tǒng)產(chǎn)生抑制作用。表明線葉金雀花具有顯性K（ATP）通道活化和弱Ca（++）拮抗劑機(jī)制的組合，因此證明其在多動(dòng)性胃腸道疾病中的應(yīng)用[27]。線葉金雀花還可用于腸道炎性疾病。Baba H等建立大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型，通過給與線葉金雀花干預(yù)，使得潰瘍性結(jié)腸炎癥狀好轉(zhuǎn)，并且測(cè)得血清SOD水平明顯升高，尿中8-羥基-2'-脫氧鳥苷水平明顯下降。由此說明線葉金雀花可以通過其抗氧化活性防止體內(nèi)DNA損傷和炎癥，改善潰瘍性結(jié)腸炎[28]。

2.9 脂肪代謝

線葉金雀花含有豐富的茶多酚及類黃酮成分，這些成分可以抑制脂肪的生成并影響脂肪代謝，從而可有效預(yù)防糖尿病及肥胖癥。Micheline Sanderson等通過體外培養(yǎng)3T3-L1脂肪細(xì)胞，探索線葉金雀花對(duì)于脂肪細(xì)胞分化的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，線葉金雀花可以增加ATP含量，減少瘦素分泌，抑制脂肪細(xì)胞分化，可能是通過抑制 PPARα，PPAR γ，SREBF1，F(xiàn)ASN，AMPK 的mRNA的表達(dá)實(shí)現(xiàn)[29]。

植物衍生的多酚類物質(zhì)可以阻止肥胖和相關(guān)脂質(zhì)代謝性疾病的發(fā)病，而線葉金雀花是一個(gè)含有豐富的無熱量和/或興奮性成分的多酚源，R Beltrán-Debón通過研究線葉金雀花水提取液中的25種酚類化合物發(fā)現(xiàn)，血清膽固醇顯著降低，甘油三酯和游離脂肪酸的濃度下降，脂肪細(xì)胞的大小和數(shù)量的發(fā)生變化，并且可以完全預(yù)防由飲食所誘導(dǎo)的肝臟脂肪變性[30]。這些表明線葉金雀花水提取液可以激活腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）以及調(diào)節(jié)細(xì)胞能量平衡，所以日常飲食中添加多酚類化合物可有助于脂質(zhì)代謝異常等疾病。

2.10 其他作用

食用線葉金雀花有望增強(qiáng)身體耐力和減少身體疲勞。因?yàn)閍spalathin具有抗氧化活性，可增加肌肉組織對(duì)于葡萄糖的攝取及利用。這種有益的效果可能由肝臟和骨骼肌中增加的糖原累積誘導(dǎo)[31]。

在線葉金雀花的化學(xué)成分中，金圣草素顯示選擇性支氣管擴(kuò)張劑效應(yīng)，其可通過兔空腸，主動(dòng)脈和豚鼠氣管和心房等組織得到驗(yàn)證。此外，線葉金雀花還具有支氣管擴(kuò)張，解痙和降血壓作用，主要是通過具有選擇性支氣管擴(kuò)張作用的K（ATP）通道活化介導(dǎo)，因此其可作為治療充血性呼吸系統(tǒng)疾病的潛在藥物[32]。

腎上腺的類固醇激素輸出在維持激素穩(wěn)態(tài)中是至關(guān)重要的，激素失衡與許多臨床病癥相關(guān)，包括高血壓，心血管疾病，代謝綜合征以及胰島素抵抗所導(dǎo)致的2型糖尿病等。線葉金雀花可影響類固醇激素生物合成，通過鹽皮質(zhì)激素，糖皮質(zhì)激素和雄激素通路，從而可能有助于緩解由糖皮質(zhì)激素水平升高產(chǎn)生的負(fù)面影響[33]。

Aspalathin（Asp）和nothofagin（Not）是線葉金雀花中的兩個(gè)主要的查爾酮類活性物質(zhì)，研究發(fā)現(xiàn)他們具有較強(qiáng)的抗氧化活性。Ku SK等[34]通過監(jiān)測(cè)活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）、凝血酶原時(shí)間（PT），和凝血酶活性（IIa因子，F(xiàn)IIA）和激活的因子X（FXa）反映線葉金雀花中Aspalathin（Asp）和nothofagin（Not）的抗凝血活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Aspalathin（Asp）和nothofagin（Not）可延長(zhǎng)APTT、PT，抑制凝血酶和FXa活性，抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中凝血酶和FXa的產(chǎn)生，還可以抑制凝血酶催化纖維蛋白聚合和血小板聚集，因此認(rèn)為線葉金雀花具有抗血栓活性，可以為開發(fā)新型抗凝藥物奠定基礎(chǔ)。

此外，線葉金雀花還具有溫和的植物雌激素功能[35]、體內(nèi)和體外促進(jìn)產(chǎn)生抗原特異性抗體調(diào)節(jié)免疫功能[36,37]、減少細(xì)胞損傷和增強(qiáng)抑菌功能以及增加精子活性和運(yùn)動(dòng)能力促進(jìn)生殖功能[38-39]等多種作用。

3 結(jié)語與展望

線葉金雀花的傳統(tǒng)應(yīng)用已經(jīng)有300多年的歷史。民間多用于治療哮喘，絞痛，濕疹，頭痛，惡心和輕度抑郁癥等。現(xiàn)臨床上主要用作抗高血壓藥，免疫刺激劑，瀉藥，鎮(zhèn)靜劑和解痙劑以及用于治療動(dòng)脈粥樣硬化和糖尿病等。研究顯示其具有改善氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)損傷、降低血糖、保護(hù)肝臟、抗癌癥以及抗誘變等作用。近年來，線葉金雀花因其較強(qiáng)的抗氧化性、安全性較好及適用于多種慢性疾病的預(yù)防與調(diào)整而受到廣泛關(guān)注，但目前對(duì)于線葉金雀花的研究還比較有限，對(duì)于其強(qiáng)抗氧化性及抗炎性的應(yīng)用還不完全深入。希望隨著研究的不斷深入，可以進(jìn)一步完善其功效，為后續(xù)發(fā)展成具有健康促進(jìn)作用的半成品添加物及預(yù)防慢性代謝性疾病的相關(guān)產(chǎn)品提供理論依據(jù)。