固相萃取技術(shù)在茶葉農(nóng)藥殘留檢測中的應(yīng)用

陳華鳳，陳 霞，劉 剛，譚 眉，王 毅*，劉南君

(1.四川省資陽市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測檢驗(yàn)中心，四川 資陽 641300；2.四川省食品藥品檢驗(yàn)檢測院,四川 成都 610100)

1 前言

使用化學(xué)農(nóng)藥是目前防治茶樹病蟲害的主要手段。準(zhǔn)確測定茶葉中的農(nóng)藥殘留量是保證茶葉的產(chǎn)品質(zhì)量，在出口競爭中處于不敗之地的關(guān)鍵，為了減少茶葉中雜質(zhì)對檢測的影響，需要選擇適宜的前處理凈化方式。目前國家標(biāo)準(zhǔn)檢測茶葉中的農(nóng)藥殘留主要采用固相萃取(SPE)技術(shù)進(jìn)行樣品的凈化處理，與液液萃取(LLE)相比，SPE技術(shù)具有溶劑使用量少，凈化速度快、回收率高、重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn)。用于茶葉農(nóng)藥殘留前處理的固相萃取吸附劑主要有Florisil吸附劑、石墨化炭吸附劑、氨基吸附劑、乙二胺-N-丙基吸附劑(PSA)以及復(fù)合型吸附劑，充分了解各類固相萃取吸附劑的特點(diǎn)以及適用范圍對于建立分析方法至關(guān)重要。

2 茶葉農(nóng)殘檢測前處理中的固相萃取技術(shù)

2.1 Florisil吸附劑

Florisil吸附劑適用于從非極性溶劑中萃取極性化合物，目前主要用于有機(jī)氯農(nóng)藥和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的前處理。鄭楊等[1]以丙酮/正己烷為提取液，經(jīng)Florisil固相萃取柱凈化，同時測定茶葉中7種有機(jī)氯類和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留，方法回收率為82.3%～109.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.3%～10.22%。李紅等[2]以丙酮/石油醚為提取液，經(jīng)Florisil固相萃取小柱凈化，同時測定7種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留，方法回收率為80.8%～105.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.8%～8.9%。

2.2 石墨化炭黑吸附劑

石墨化炭黑對平面芳香化合物具有很強(qiáng)的選擇吸附性，目前主要用于有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的凈化處理。劉文聰?shù)萚3]以乙酸乙酯和丙酮為提取液，石墨化炭黑固相萃取柱凈化，建立了同時測定滅線磷、地蟲硫磷、甲基硫環(huán)磷等的方法，方法回收率為85.5%～108.5%。梅文泉等[4]采用乙腈提取，石墨化炭黑固相萃取小柱凈化，同時測定茶葉中9種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，當(dāng)添加濃度為0.02～1.0mg/kg時，平均回收率為75.76%～107.9%。

2.3 氨基吸附劑和乙二胺-N-丙基(PSA)吸附劑

氨基吸附劑的主要官能團(tuán)是氨丙基，其主要作用力是極性作用和弱陰離子交換作用。PSA吸附劑的主要官能團(tuán)是乙二胺-N-丙基，該填料的選擇性與NH2吸附劑類似，同時具有極性作用和弱陰離子交換作用，但其離子交換能力強(qiáng)于氨基填料。此外，PSA吸附劑具有較強(qiáng)的螯合作用，可以去除金屬離子的干擾。雖然氨基吸附劑和PSA吸附劑都具有較好的去除基質(zhì)干擾物的能力，但其很少單獨(dú)使用，往往與石墨化炭黑或者C18吸附劑等聯(lián)合使用。

2.4 復(fù)合型吸附劑

茶葉中含有較多的色素、有機(jī)酸、茶多酚及其它雜質(zhì)，單純使用2.1～2.3所述的吸附劑在多農(nóng)殘檢測時往往凈化效果不佳，為了達(dá)到最佳的凈化效果并實(shí)現(xiàn)多農(nóng)殘同時檢測，國內(nèi)外學(xué)者開始研究將兩種或多種吸附劑組合用于茶葉多農(nóng)殘檢測的前處理，其基本思路是將具有不同性質(zhì)的填料進(jìn)行組合裝填，通過優(yōu)化裝填順序和裝填量使其滿足相應(yīng)農(nóng)殘的檢測要求。

龐國芳院士系統(tǒng)研究了硅酸鎂、石墨化碳、中性氧化鋁、石墨化碳/硅酸鎂、石墨化碳/氨基、石墨化碳/中性氧化鋁等吸附劑對茶葉色素的凈化效果。研究結(jié)果表明，石墨化碳/氨基吸附劑去除色素的效果最好，且石墨化碳在下層，氨基吸附劑在上層的裝填順序?yàn)樽罴选顣曾P[5]等采用乙腈提取茶葉中30種有機(jī)氯及菊酯類農(nóng)藥，ENVI-Carb+NH2固相萃取小柱凈化，測定結(jié)果表明，添加回收率為90.6%～119.9%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.3%～5.9%。陳建航等[6]采用乙腈提取茶葉中的34種有機(jī)磷、有機(jī)氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥，同時使用石墨化碳/PSA和石墨化碳/NH2固相萃取小柱進(jìn)行凈化處理，測試結(jié)果表明，2種固相萃取小柱的凈化效果相當(dāng)，34種農(nóng)藥的平均回收率為70%～124%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.2%～14.9%。游飛明等[7]采用丙酮超聲提取茶葉中16種有機(jī)磷農(nóng)藥，PSA/活性炭固相萃取柱凈化，方法回收率為62.8%～109.1%。胡貝貞等[8]采用丙酮-二氯甲烷混合溶劑提取茶葉中的氟蟲腈、吡蟲啉、啶蟲脒、噻嗪酮、三唑酮、三唑醇、丙溴磷、噠螨酮等8種農(nóng)藥，提取液經(jīng)石墨化炭/NH2固相萃取小柱凈化，測試結(jié)果表明，氟蟲腈在1～100g/L，其余7種農(nóng)藥在5～200g/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，氟蟲腈在2、5、50g/kg添加水平，其余7種農(nóng)藥在10、50、100g/kg添加水平下的平均回收率為75.5%～115.0%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.7%～7.7%。

雖然文獻(xiàn)報(bào)道利用石墨化碳/氨基固相萃取小柱凈化處理多種類型農(nóng)殘均可獲得較好的回收率數(shù)據(jù)，但茶葉中的茶多酚、咖啡堿等雜質(zhì)仍對檢測存在干擾。龐國芳院士課題組在前期工作的基礎(chǔ)上又研究了丙磺酸、C18和酰胺化聚苯乙烯填料用于凈化茶葉中的其他干擾物。研究結(jié)果表明，以酰胺化聚苯乙烯作為第三種填料制備的凈化小柱(Cleanert TPT)凈化效果最佳。實(shí)驗(yàn)證實(shí)，Cleanert TPT凈化柱一次凈化即可使百余種農(nóng)殘達(dá)到較優(yōu)的凈化效果和普遍較高的回收率。蔡亞萍等[9]采用乙腈提取，Cleanet TPT小柱凈化，建立了高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測茶葉中滅多威、除蟲脲和殺螟丹的分析方法。測試結(jié)果表明，3種農(nóng)藥在0.1～10g/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)呈良好線性，回收率為82%～105%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.8%～5.3%。劉冰等[10]采用乙腈提取，Cleanert TPT固相萃取柱凈化，建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜同時測定18種農(nóng)藥的檢測方法，檢測結(jié)果表明，加標(biāo)水平為10，50，100μg/kg時，18種農(nóng)藥的平均回收率為70%～109%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.2%～15%。蘇建峰等[11]采用乙腈均質(zhì)超聲波提取，Cleanert TPT柱凈化，建立同時測定有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲酯、氨基甲酸乙酯類295種農(nóng)藥殘留的分析方法。測試結(jié)果表明，方法回收率為68%～99%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.5%～8.2%。

3 總結(jié)

目前，固相萃取技術(shù)已成為茶葉農(nóng)藥殘留分析中應(yīng)用最多的樣品前處理方法，其應(yīng)用實(shí)例不勝枚舉。隨著人們對固相萃取技術(shù)的理解不斷加深，新型固相萃取材料將不斷問世，新技術(shù)、新材料的使用將會使茶葉的凈化效果變得更好，基質(zhì)干擾更小，檢測靈敏度更高。

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