袁初蕾,鄧尚貴,勵(lì)建榮,霍健聰*
1(浙江海洋大學(xué) 食品與醫(yī)藥學(xué)院,浙江 舟山,316000 )2(渤海大學(xué) 化學(xué)化工與食品安全學(xué)院,遼寧 錦州,121000)
魚(yú)鰾是水產(chǎn)加工重要副產(chǎn)物,約占胴體質(zhì)量2%左右。據(jù)2016年《中國(guó)漁業(yè)年鑒》統(tǒng)計(jì),僅浙江省海水魚(yú)產(chǎn)量即接近400萬(wàn)t,產(chǎn)生的的魚(yú)鰾產(chǎn)量即接近0.8萬(wàn)t。魚(yú)鰾的主要成分是膠原蛋白,具有很高的食用和藥用價(jià)值[1-3]。明代《本草綱目》中記載:魚(yú)鰾有破傷風(fēng)痙,止嘔血,散瘀血,消腫毒等功效。但當(dāng)前國(guó)內(nèi)對(duì)魚(yú)鰾的利用除少量鮮食外,主要仍以廢棄物形式丟棄。因此如何實(shí)現(xiàn)這類蛋白資源的高效利用成為國(guó)內(nèi)外研究熱點(diǎn)。
目前,國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)魚(yú)鰾的研究主要集中于魚(yú)鰾膠原蛋白提取、魚(yú)鰾生物活性肽的制備與特性研究等領(lǐng)域[4-5]。大黃魚(yú)是舟山傳統(tǒng)四大海產(chǎn),養(yǎng)殖大黃魚(yú)產(chǎn)量近年來(lái)穩(wěn)定上升,產(chǎn)生了大量魚(yú)鰾資源。但目前除段振華等分析了海南市場(chǎng)上幾種常見(jiàn)魚(yú)鰾的基本營(yíng)養(yǎng)成分外[6],關(guān)于大黃魚(yú)魚(yú)鰾的營(yíng)養(yǎng)及安全性評(píng)價(jià)研究基本處于空白。
基于上述情況,本研究以大黃魚(yú)、帶魚(yú)和鮐魚(yú)3種大宗海魚(yú)的魚(yú)鰾為研究對(duì)象,比較了3種海魚(yú)魚(yú)鰾的蛋白質(zhì)、氨基酸與脂肪酸組成和含量,以及礦物元素含量等,旨在系統(tǒng)全面了解3種海魚(yú)魚(yú)鰾的營(yíng)養(yǎng)及安全特性,以更好地開(kāi)發(fā)利用大黃魚(yú)鰾。
大黃魚(yú)、帶魚(yú)和鮐魚(yú)購(gòu)于舟山市臨城老碶菜場(chǎng),大黃魚(yú)要求鮮活,帶魚(yú)和鮐魚(yú)要求鮮度達(dá)到一級(jí)標(biāo)準(zhǔn);17種氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)品,為日本W(wǎng)ako公司產(chǎn)品;無(wú)機(jī)元素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,購(gòu)于國(guó)家鋼鐵材料測(cè)試中心鋼鐵研究總院;H2SO4、甲醇等試劑購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán)上海化學(xué)試劑有限公司,分析純。
氨基酸自動(dòng)分析儀,日本日立L8800;超低溫冰箱,日本SanyoMDF-U32V(N);超低溫冷凍干燥,美國(guó)LABCONCOFreeZone 4.5 L;超純水器,德國(guó)賽多利斯Airum611di;氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,美國(guó)AgilentTechnologiesHP6890GC/5973MS;自動(dòng)脂肪萃取儀,瑞士Buchi B-811;高通量密閉微波消解系統(tǒng),美國(guó)CEM MARS-X;聚四氟乙烯消解罐,上海冶金研究院規(guī)格:100 mL;恒溫干燥箱,上海精宏DHG-9240A。
為減少不飽和脂肪酸氧化,樣品制備時(shí)采用真空冷凍干燥。具體操作為將新鮮大黃魚(yú)、帶魚(yú)和鮐魚(yú)魚(yú)鰾取出,清水洗凈后剪碎置于培養(yǎng)皿中,保鮮膜封口后放入超低溫冰箱中(-60 ℃)冷凍過(guò)夜后冷凍干燥,并研磨成粉末(水分含量約2.76%),放入干燥器內(nèi)備用。
1.4.1 氨基酸分析
稱取魚(yú)鰾粉末樣品0.100 g加入有蓋試管中,而后精確量取并加入10 mL 6 mol/L HCl,110℃恒溫箱內(nèi)水解24 h,冷卻后用蒸餾水定容至50 mL,0.45 μm濾膜過(guò)濾;吸取200 μL濾液轉(zhuǎn)移到大口離心管中,于60℃烘箱內(nèi)烘干,加入1 mL 0.02 mol/L HCl后混勻即得樣品液;樣品液使用日立L-8800全自動(dòng)氨基酸分析儀測(cè)定。
1.4.2 氨基酸標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
用標(biāo)準(zhǔn)樣品配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液,壓濾上機(jī)測(cè)試,以峰面積為f(x)值,檢測(cè)濃度(μmoL/L)為x值,得到氨基酸標(biāo)準(zhǔn)曲線。
蛋白質(zhì)的氨基酸評(píng)分(amino acid score,AAS)與化學(xué)評(píng)分(chemical score,CS)按照公式(1)和(2)進(jìn)行。營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的評(píng)定依據(jù)是1973年FAO/WHO建議的每克氨基酸評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)模式(%,dry)[8]和雞蛋蛋白模式(%,dry)[9],分別按下列公式計(jì)算氨基酸評(píng)分(AAS)、化學(xué)評(píng)分(CS)、必需氨基酸指數(shù)(EAAI)。

(1)

(2)

(3)
式中:n為比較的必需氨基酸數(shù);t為樣品必需氨基酸含量;s為參照標(biāo)準(zhǔn)必需氨基酸含量。
取一定量魚(yú)鰾粉末,用脂肪提取儀自動(dòng)提取。取獲得的油脂50 mg,加入1%硫酸甲醇溶液20 mL,水浴回流至油珠消失。將反應(yīng)產(chǎn)物冷卻至室溫,加入3倍體積的蒸餾水,用乙醚萃取3次,合并乙醚萃取液用水洗至中性,經(jīng)無(wú)水Na2SO4干燥后蒸去部分乙醚,即得該油的脂肪酸甲酯乙醚溶液。反應(yīng)產(chǎn)物直接進(jìn)樣作GC及GC/MS分析;GC條件為:HP-5MS石英毛細(xì)管柱(30 mm×0.25 mm×0.25 mm);柱溫:起始溫度150 ℃,程序升溫3 ℃/min,升至26 ℃保持30 min;柱流量為1.0 mL/min;進(jìn)樣口溫度250 ℃;柱前壓100 kPa;進(jìn)樣量0.4 mL;分流比30∶1;載氣為高純氦氣。MS條件為:電離方式EI;電子能量70 eV;傳輸線溫度250 ℃;離子源溫度230 ℃;四級(jí)桿溫度150 ℃;質(zhì)量范圍35~500 m/z;采用wiley7n.l標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)檢索定性。
準(zhǔn)確稱取樣品0.200 0 g于聚四氟乙烯消解罐中,加入6 mL HNO3和2 mL H2O2,旋緊消解罐上蓋微波消解45 min。消解完畢后將消解罐置于通風(fēng)櫥中,待溫度降至室溫,旋開(kāi)消解罐上蓋,于210 ℃電熱板上趕酸2 h,用超純水定容至50 mL,稀釋一定倍數(shù)后用ICP-MS測(cè)定,同時(shí)做空白。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用 SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析,試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
3種魚(yú)鰾的氨基酸組成及含量結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 三種海魚(yú)魚(yú)鰾氨基酸含量的比較 單位:g/kg
注:*鮮味氨基酸;同行肩標(biāo)字母不同標(biāo)識(shí)差異顯著(p<0.05)。
由表1結(jié)果可知,除由酸解法導(dǎo)致的色氨酸分解未檢出外,其余17種常見(jiàn)的氨基酸在3種魚(yú)鰾中均有檢出。大黃魚(yú)魚(yú)鰾的總氨基酸含量為92.96 g/100 g,顯著高于帶魚(yú)(59.28 g/100 g)和鮐魚(yú)(26.56 g/100 g),且總氨基酸含量存在顯著性差異(p<0.05);除組氨酸外,其余氨基酸均顯著高于鮐魚(yú)(p<0.05),表明大黃魚(yú)魚(yú)鰾是一類氨基酸含量較高的蛋白原料。大黃魚(yú)魚(yú)鰾中谷氨酸、天冬氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸、甘氨酸和酪氨酸等6種呈味氨基酸含量高達(dá)58.55 g/100 g,占氨基酸總量的62.98%,而鮐魚(yú)和帶魚(yú)魚(yú)鰾中呈味氨基酸含量?jī)H為40.39%和53.65%。呈味氨基酸含量與比例是衡量蛋白質(zhì)品質(zhì)指標(biāo)之一,大黃魚(yú)魚(yú)鰾中呈味氨基酸含量和比例均高于其余2種樣品,這賦予其良好的風(fēng)味品質(zhì),這也是舟山地區(qū)消費(fèi)者喜食大黃魚(yú)魚(yú)鰾的原因之一;大黃魚(yú)魚(yú)鰾中甘氨酸和丙氨酸含量極為豐富(分別達(dá)到25.51 g/100 g和10.66 g/100 g),而甘氨酸具有維持中樞神經(jīng)系統(tǒng)的穩(wěn)定和前列腺健康及提高免疫力,降低高膽固醇和高血脂等功能[12],丙氨酸可以加速機(jī)體對(duì)攝入的乙醇的分解代謝,是一類天然的肝臟保護(hù)劑[13],即表明大黃魚(yú)魚(yú)鰾在維持人體健康方面具有一定潛力;此外,大黃魚(yú)魚(yú)鰾的氨基酸指數(shù)(EAAI)最高,3種魚(yú)鰾中含量最低的氨基酸在鮐魚(yú)魚(yú)鰾中為蛋氨酸,在大黃魚(yú)和帶魚(yú)魚(yú)鰾中均為組氨酸;含量最高的氨基酸都為甘氨酸。大黃魚(yú)魚(yú)鰾中甘氨酸比例高達(dá)27.44%,比帶魚(yú)和鮐魚(yú)魚(yú)鰾分別高8.83%、17.69%,且大黃魚(yú)魚(yú)鰾中精氨酸、脯氨酸、丙氨酸的含量都較鮐魚(yú)和帶魚(yú)魚(yú)鰾高。精氨酸在醫(yī)藥工業(yè)用于治療由于精液不足和精子缺乏引起的男性不育癥,同時(shí)還具有促進(jìn)創(chuàng)傷愈合,免疫調(diào)節(jié)和促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育的作用[14]。這與研究表明魚(yú)鰾在補(bǔ)腎益精方面的效果相符[15-16]。因此表明大黃魚(yú)魚(yú)鰾是一種具有很高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的食品。

表2 魚(yú)鰾的氨基酸與雞蛋蛋白、FAO/WHO氨基酸標(biāo)準(zhǔn)模式比較 單位:mg/kg
對(duì)魚(yú)鰾進(jìn)行氨基酸評(píng)分,結(jié)果如表3所示。從表3中可以看出在采用的2種評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)中,大黃魚(yú)魚(yú)鰾的氨基酸評(píng)分(AAS)和化學(xué)評(píng)分(CS)高于其余2種魚(yú)鰾,其中評(píng)分最高的氨基酸為蛋氨酸+胱氨酸1.37(AAS)和0.78(CS)。根據(jù)AAS可以判定,大黃魚(yú)魚(yú)鰾和帶魚(yú)魚(yú)鰾的第一限制氨基酸為異亮氨酸,第二限制氨基酸為亮氨酸,鮐魚(yú)魚(yú)鰾的第一限制氨基酸為蘇氨酸;以CS為判定標(biāo)準(zhǔn)大黃魚(yú)魚(yú)鰾和帶魚(yú)的第一限制氨基酸為異亮氨酸,第二限制氨基酸為亮氨酸,鮐魚(yú)的第一限制氨基酸為異亮氨酸,第二限制氨基酸為纈氨酸。

表3 三種魚(yú)鰾中氨基酸的AAS、CS比較Table 3 The comparison of AAS and CS of swim bladder
注:a-第一限制氨基酸;b-第二限制氨基酸。
由表4可知,3種魚(yú)鰾中都檢出 17 種脂肪酸,其中6 種飽和脂肪酸(SFA),6 種單不飽和脂肪酸(MUFA),5 種多不飽和脂肪酸(PUFA)。其中,大黃魚(yú)魚(yú)鰾中質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高的脂肪酸分別為DHA (28.38%)和EPA(19.37%),不僅高于帶魚(yú)魚(yú)鰾(20.75%、15.88%)和鮐魚(yú)魚(yú)鰾(19.82%、13.38%),其DHA+EPA也顯著高于羅非魚(yú)(10.9%)、鯪魚(yú)(10.1%)、鯽魚(yú)(2.7%)[17]、海鱸魚(yú)(19.20%)[18]、秋刀魚(yú)(16.44%)[19]、鰳魚(yú)(11.14%)[20]等其他淡水魚(yú)或海水魚(yú)的肌肉組織;此外大黃魚(yú)魚(yú)鰾的SFA為29.40%,顯著低于帶魚(yú)和鮐魚(yú)魚(yú)鰾(p<0.05),而PUFA則顯著高于帶魚(yú)和鮐魚(yú)魚(yú)鰾(p<0.05)。EPA和DHA是衡量脂肪質(zhì)量的重要指標(biāo),具有降低膽固醇,抗炎癥和調(diào)節(jié)免疫功能的作用[21],由此可見(jiàn),大黃魚(yú)魚(yú)鰾脂肪酸具有一定的營(yíng)養(yǎng)保健功效。

表4 魚(yú)鰾的脂肪酸組成 單位:%
注:同行肩標(biāo)字母不同標(biāo)識(shí)差異顯著(p<0.05)。
由表5可知,各樣品的礦物元素含量均較為豐富,但大黃魚(yú)魚(yú)鰾中的必需礦物元素含量均高于其余2種魚(yú)鰾,其中大黃魚(yú)魚(yú)鰾中K含量為2 299.81 mg/kg,其次是Na(720.55 mg/kg)、Mg(406.34 mg/kg)和Ca(327.77 mg/kg)元素,還含有Fe、Zn、Mn、Cu等微量元素;這些元素含量均高于鳙魚(yú)(2 011.01、330.13、37.11、164.97 mg/kg)、鰱魚(yú)(1 873.82、273.91、119.96、189.28 mg/kg)[22]、黃顙魚(yú)(1 482、253、286g、315 mg/kg)[23]、黃條鰤(1 950.00、534.00、307.00、125.00 mg/kg)[24]、鯧魚(yú)(577.6、380.2、111.98、72.5 mg/kg)[25]。Na元素和K元素在人體中的作用是可控制細(xì)胞、組織液和血液中的電解質(zhì)平衡,使神經(jīng)和肌肉保持適當(dāng)?shù)膽?yīng)激水平;Ca參與身體骨質(zhì)的構(gòu)建是骨骼、牙齒主要成分[26]。因此,適量食用魚(yú)鰾可以補(bǔ)充人體必需的礦物元素。

表5 魚(yú)鰾的礦物元素比較 單位:mg/kg
注:“-”表示未檢出;同行肩標(biāo)字母不同標(biāo)識(shí)差異顯著(p<0.05)。
在3種魚(yú)鰾中Pb、Hg、As等有害礦物元素均有檢出,但對(duì)比GB 2762—2012《食品中污染物限量》中關(guān)于魚(yú)類重金屬含量的限定指標(biāo)(Pb≤1.0 mg/kg,甲基汞≤0.5 mg/kg,As≤0.5 mg/kg),大黃魚(yú)魚(yú)鰾等3種魚(yú)鰾的重金屬含量均未超標(biāo),其中帶魚(yú)魚(yú)鰾中為Pb(0.13 mg/kg)、Hg(0.02 mg/kg)、 As(0.05 mg/kg);大黃魚(yú)魚(yú)鰾中為Pb(0.05 mg/kg)、As(0.07 mg/kg);鮐魚(yú)魚(yú)鰾為Pb(0.05 mg/kg)、Hg(0.04 mg/kg)、As(0.03 mg/kg);本研究中所選取的大黃魚(yú)魚(yú)鰾重金屬安全性較好,這可能是因?yàn)榇簏S魚(yú)養(yǎng)殖水體質(zhì)量較好,尤其是Pb等3種代表性重金屬含量顯著低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),由此可見(jiàn)魚(yú)鰾是可以放心食用的水產(chǎn)品。
對(duì)3種魚(yú)鰾的氨基酸組成、脂肪酸組成和礦物元素含量進(jìn)行了分析,得出:大黃魚(yú)魚(yú)鰾中的優(yōu)勢(shì)氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、精氨酸)使其在補(bǔ)腎益精、提高免疫的功效方面具有很高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值;呈味氨基酸含量豐富,表明其具有較好的食用品質(zhì);大黃魚(yú)魚(yú)鰾的脂肪酸以單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸為主,含量分別達(dá)到13.09%和55.13%。魚(yú)鰾中含礦物元素種類較多,大黃魚(yú)魚(yú)鰾中的K、Na、Ca、Fe、Zn含量較高,其中Ca和Fe元素顯著高于帶魚(yú)和鮐魚(yú)魚(yú)鰾是良好的補(bǔ)鈣和補(bǔ)鐵食物來(lái)源;且大黃魚(yú)魚(yú)鰾中Pb、Cd、Hg、As含量均未超出國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定含量,可以放心食用。總體而言,大黃魚(yú)魚(yú)鰾是一種蛋白質(zhì)、脂肪酸和礦物元素含量豐富的生物資源,在食用方面具有很高的開(kāi)發(fā)價(jià)值。
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