涂曉玲 ,史夢佳 ,張 卿 ,陳麗嬌 ,2,程文健 ,2,梁 鵬 ,2
藍圓鲹(Decapterus maruadsi),又稱池魚、巴浪魚,屬于鱸形目,鲹科,圓鲹屬的一種,主要分布于西北太平洋區,包括日本、韓國,以及中國東海、中國臺灣等海域,屬于暖水性中上層魚類[1];其生長速度較快,肉質易腐爛變質,屬于產量較大的低值魚類。已有研究表明,藍圓鲹屬于高蛋白、低脂肪的優質海洋魚類資源,具有較高的營養價值、食用價值和經濟價值[2]。
根據中國漁業統計年鑒,2016年藍圓鲹全國捕撈產量60.09×104t,相比較2015年增長2.34%[3]。目前,藍圓鲹主要以鮮銷為主,其加工制品主要集中在咸干品、動物飼料、休閑食品[4-5]、調味品[6-7]、魚糜制品[8]等;而以藍圓鲹作為原料加工成魚粉、酶解蛋白粉的相關研究較少。
魚粉是低值魚的主要加工途徑之一,其制備方法因地區、原料種類及數量的不同而有所差異,其共同的方法為脫水(干燥)和脫油的過程[9]。隨著食品科技的發展,魚粉及其派生品作為蛋白質的補充品,受到很多人的關注。食用魚粉營養豐富,可水解為氨基酸強化食品基料和奶粉代用品,也可開發成營養湯、調味品及魚蛋白飲料等產品[10]。目前,我國魚粉行業中蛋白質品質較高的魚粉主要依賴于進口,因此急需要以低值魚類開發本土高品質魚粉產品。此外,用蛋白酶水解低值魚加工成魚蛋白粉也是低值魚類深加工利用的重要途徑之一,酶解方法不僅可以高效利用魚類蛋白資源,而且還可以獲得具有特殊活性功能的蛋白多肽,如降血壓肽[11]、抗氧化肽[12]、抗凝血肽[13]等。因此,酶解也成為了低值魚類高值化利用的重點方向之一。
為了深度利用藍圓鲹資源,試驗分別運用脫脂干燥及酶解獲得2種藍圓鲹加工產品,分別為脫脂魚粉和酶解蛋白粉。通過常規營養成分分析方法,分析這2種產品的營養組分,并進一步基于氨基酸組成評價2種產品的營養價值,旨在為藍圓鲹資源的進一步深加工利用提供依據。
冰鮮藍圓鲹,購自福州金山大潤發超市;復合蛋白酶(酶活100 U/mg),購自北京索萊寶科技有限公司;氫氧化鈉、鹽酸、乙醚等,均為化學分析純,均購自國藥集團化學試劑有限公司。
L-8800型氨基酸分析儀,日本日立公司產品;LGJ-12S型真空冷凍干燥器,北京松原華興公司產品;T6型新世紀紫外可見分光光度計,北京普析通用儀器有限責任公司產品;KDN系列凱氏定氮儀,浙江托普儀器有限公司產品;M6型原子吸收光譜儀,美國Thermo儀器公司產品;BS224S型電子天平,北京賽多利斯科學儀器有限公司產品。
1.3.1 脫脂藍圓 魚粉及藍圓 酶解蛋白粉的制備
將冰鮮藍圓鲹解凍后去除頭、尾、脊刺及內臟等組織,用去離子水清洗后經勻漿后置于冰箱于-25℃下冷凍,置于真空冷凍干燥機中干燥30 h,經粉碎得到藍圓鲹魚粉,再用無水乙醇脫脂、真空干燥獲得脫脂藍圓鲹魚粉。
將冰鮮藍圓鲹解凍后去頭尾、脊刺及內臟,洗凈勻漿后,放入容器中加水攪拌均勻(肉水比為1∶5),加入復合蛋白酶(酶添加量為5 020 U/g),酶解溫度50℃,酶解時間3.5 h,酶解后滅酶,離心抽濾后經冷凍干燥制得藍圓鲹酶解蛋白粉。
1.3.2 幾種基本成分的測定方法
水分,采用GB 5009.3—2010方法測定;粗蛋白質,采用GB 5009.5—2010方法測定;粗脂肪,采用GB/T5009.6—2003方法測定;灰分,采用GB5009.4—2010方法測定;P,采用GB/T 5009.87—2003方法測 定 ; Cu, Zn, Na, K, Ca,Se, Pb, Fe, Mg,Mn,采用GB 5009.268—2016方法測定;氨基酸的組成和含量,采用氨基酸自動分析儀檢測。
1.3.3 氨基酸營養價值評價
脫脂藍圓鲹魚粉及藍圓鲹酶解蛋白粉的氨基酸營養價值評價通過氨基酸評分(AAS)[14]和化學評分(CS)[14]、必需氨基酸指數 (EAAI)[15]、氨基酸比值系數[16]和氨基酸比值系數分[16]的計算結果綜合評價。其具體公式如下:

式中:Ax——樣品蛋白質某一必需氨基酸的含量,mg/g;
Ay——WFO/FAO評分模式中氨基酸含量,mg/g。

式中:Ax——樣品蛋白質中某一種氨基酸含量,mg/g;
Ex——標準雞蛋蛋白中相應某一種氨基酸的含量,mg/g。

式中:p——樣品蛋白;
s——標準蛋白(雞蛋);
n——比較的氨基酸數。
氨基酸比值系數(RCAA)和氨基酸比值系數分(SRCAA) 為:

式中:Ax——樣品蛋白質某一必需氨基酸的含量,mg/g;
Ay——WFO/FAO評分模式中氨基酸含量,mg/g。

脫脂藍圓鲹魚粉與酶解蛋白粉基本營養成分分析見表1。
從表1中可以看出,脫脂藍圓鲹魚粉的粗蛋白含量為77%,高于魚粉一級品粗蛋白含量的標準;粗脂肪、粗灰分、水分含量分別為4.6%,8.5%,9.7%,均符合魚粉國家標準一級品的要求。藍圓鲹蛋白粉的蛋白含量(濕基)72%,略高于河蚌蛋白粉[17]的70.25%和中性蛋白酶酶解的吉尾魚蛋白粉66.37%[18]。可見,分別運用脫脂干燥和酶解工藝得到的這2種加工產品均具有高蛋白和低脂肪的特點。魚粉中的粗脂肪會引起油脂氧化,發生酸敗,進而影響其營養價值,因此采用脫脂工藝和酶解工藝可以獲得營養價值較高且穩定性較好的低脂產品。

表1 脫脂藍圓鲹魚粉與酶解蛋白粉基本營養成分分析/%
脫脂藍圓鲹魚粉和酶解蛋白粉的礦物質含量見表2。

表2 脫脂藍圓鲹魚粉和酶解蛋白粉的礦物質元素含量/mg·kg-1
由表2可見,二者均含有人體必需的常量元素鉀 (K)、磷 (P)、鈉 (Na)、鎂 (Mg)、鈣 (Ca)。其中,常量元素中K含量最高,蛋白粉的K含量高于脫脂魚粉,高于鰱魚酶解蛋白粉(6.91 mg/g)[19],Ca含量高于花生蛋白粉(830 mg/kg)[20]。Na,K是維持神經、肌肉興奮性,細胞膜通透性和所有細胞正常功能的必要條件。Ca是構成牙齒和骨骼的重要成分,具有調節細胞膜的透性、肌肉的收縮與舒張等多種生理功能。二者常量元素含量依次為K>Na>Ca>Mg>P>Mn,微量元素含量依次為 Zn>Fe>Se>Cu。二者礦物質含量及分布規律差異較小,說明脫脂藍圓鲹魚粉與藍圓鲹酶解蛋白粉均含有豐富的礦物質元素。
脫脂藍圓鲹魚粉和酶解蛋白粉的氨基酸組成和含量見表3。

表3 脫脂藍圓鲹魚粉和酶解蛋白粉的氨基酸組成和含量/mg·g-1
2種產品中氨基酸種類齊全,包含7種人體必需氨基酸和9種非必需氨基酸。脫脂魚粉中的必需氨基酸含量占總氨基酸含量的33%,酶解蛋白粉中的必需氨基酸含量為32%,這與陳曉婷等人[3]測得藍圓鲹肌肉中必需氨基酸含量39.98%接近,說明這2種加工工方式均保留了藍圓鲹本身的氨基酸營養價值。與洪鵬志等人[21]的黃鰭金槍魚頭酶解蛋白粉37.2%接近,而高于鱘魚魚頭酶解蛋白粉的18.63%[22]。結果表明,2種產品必需氨基酸含量均接近WHO/FAO推薦的模式(推薦值為35.38%)[23]。
氨基酸的種類和含量決定了蛋白質的品質,2種產品谷氨酸含量最高,其次是天冬氨酸和賴氨酸。魚肉味道鮮美的程度主要由肌肉中鮮味氨基酸(天門冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、脯氨酸)的含量和組成來決定[18]。從表3數據可以計算出,脫脂藍圓鲹魚粉和藍圓鲹酶解蛋白粉中上述鮮味氨基酸總量在氨基酸總量中占比分別為47.4%,46.4%,其中在2種產品中呈鮮味的特征氨基酸天門冬氨酸和谷氨酸占比分別為24.3%,24.5%;呈甘味的特征氨基酸(甘氨酸和丙氨酸)含量占比為13.1%和11.9%;同甘味有關的絲氨酸和脯氨酸均占比為10%。說明2種藍圓鲹加工產品具有濃郁的海鮮風味。
在食品中,蛋白質的營養價值取決于必需氨基酸的種類、數量和比例。試驗采用雞蛋蛋白和FAO/WHO標準模式對脫脂藍圓鲹魚粉和藍圓鲹蛋白粉的氨基酸進行評價。
脫脂藍圓鲹魚粉及藍圓鲹酶解蛋白粉的必需氨基酸組成評價見表4。

表4 脫脂藍圓鲹魚粉及藍圓鲹酶解蛋白粉的必需氨基酸組成評價
從表4中數據結果可知,二者第一限制性氨基酸均為纈氨酸,含量分別為32.3,29.4 mg/g,氨基酸評分分別為0.65,0.59;必需氨基酸中賴氨酸的含量豐富,含量分別達到68.6,62.1 mg/g,氨基酸評分分別達到1.37,1.24,高于FAO/WHO的推薦值;而賴氨酸是我國主食的限制氨基酸,將魚蛋白粉添加到食品中作為輔助飲食,可以調節食品的氨基酸組成,從而提高食品中蛋白質的營養價值;另外,添加該產品可以彌補植物蛋白粉賴氨酸缺乏的問題。
蛋白質中氨基酸的種類、比例對于蛋白質的營養價值非常重要。根據氨基酸比值系數法計算出的RCAA值越接近于1,越說明該食品蛋白質氨基酸組成比例越接近FAO/WHO推薦的氨基酸模式,說明營養價值更高,能更好地滿足人體的營養需求,當RCAA>1表示該氨基酸含量相對過剩,RCAA<1表示含量相對不足。
由表5可知,脫脂藍圓鲹魚粉與藍圓鲹酶解蛋白粉第一限制性氨基酸均是纈氨酸,第二限制性氨基酸是蛋氨酸+胱氨酸,而藍圓鲹肌肉中限制性氨基酸為色氨酸和纈氨酸[3],說明脫脂和酶解均可保留藍圓鲹較高營養價值的蛋白質。從研究結果中可以看出,二者除限制性氨基酸外,其余氨基酸均超過或接近FAO/WHO評分模式中同種氨基酸的含量,可見脫脂藍圓鲹魚粉與藍圓鲹酶解蛋白粉均可作為良好的蛋白質源。
試驗對海洋低值魚類藍圓鲹采用脫脂和酶解2種工藝處理,采用標準的生化方法測定了脫脂藍圓鲹魚粉和酶解蛋白粉的主要營養成分,并對其氨基酸營養價值進行評價。研究結果可知,2種加工產品蛋白質含量較高、氨基酸配比合理,第一限制性氨基酸均為纈氨酸,鮮味氨基酸總量在氨基酸總量中占比分別為47.4%和46.4%,SRCAA分別為73.1和74.3,營養價值較高,具有濃郁的海鮮風味;均具有豐富的礦物質元素,其中K含量最高,Ca含量豐富,微量元素中Zn含量最高,可以進一步開發作為營養補充劑。此外,與脫脂魚粉相比,酶解蛋白粉水溶性好,富含易吸收小肽氨基酸,具有功能特性的特點,根據不同的市場需求,將2種深加工產品運用到不同的領域,這對于藍圓鲹資源的高值化利用具有深遠的意義。

表5 脫脂藍圓鲹魚粉及藍圓鲹酶解蛋白粉的氨基酸比值系數和氨基酸比值系數分
[1]蔣日進,徐漢祥,金海衛,等.東海藍圓鲹的攝食習性 [J].水產學報,2012,36(2):216-227.
[2]陳曉婷,吳靖娜,路海霞,等.藍圓鲹肌肉中營養成分分析與評價 [J].漁業現代化,2016,43(1):56-61.
[3]農業部漁業漁政管理局.中國漁業統計年鑒 [M].北京:中國農業出版社,2017:39.
[4]黃志勇,王玉東,莊廣錦.藍圓鲹等低值魚魚柳絲的加工 [J].集美大學學報(自然科學版),1999(3):38-41.
[5]陳君,霍健聰.低值藍圓鲹休閑魚片的試制 [J].科學養魚,2011(11):68-69.
[6]方忠興,翁武銀,王美貴,等.添加水產下腳料對藍圓鲹發酵魚露的影響 [J].食品科學,2010,31(23):132-137.
[7]楊遠帆.利用藍圓鲹和羅非魚制備海鮮調味基料的研究 [D].杭州:浙江大學,2009.
[8]張浩.藍圓鲹冷凍魚糜加工關鍵工藝研究 [D].福州:福建農林大學,2014.
[9]黃志斌.水產品綜合利用工藝學 [M].北京:中國農業出版社,1996:125-130.
[10]白福玉,鄭華,蔣愛民.低值水產品及水產副產品的加工與綜合利用 [J].農產品加工(學刊),2007(4):76-79.
[11]舒冰,孫建華,伍善廣,等.酶解藍圓鲹蛋白制備降血壓肽的工藝研究 [J].海洋科學,2013,37(3):45-49.
[12]蔣海萍.藍圓鲹蛋白制備抗氧化肽的研究 [D].南寧:廣西大學,2014.
[13]周浩純,顧晗可,單丹婷,等.響應面法優化酶促水解藍圓鲹蛋白制備抗凝血肽的研究 [J].食品工程,2017(3):52-56.
[14]FAO.Amino acids content of foods and biological data on proteins[J].Nutritional Studies FAO Rome,1970 (24):5-6.
[15]Bano I, Raiarathram Chang ST, Quimio TH.Pleurotus mushroom as a nutritions food[M].Tropical Mushroom:Biological Nature and Cultivation Methods.Hong Kong:The Chinese University Press,1982:363-380.
[16]朱圣陶,吳坤.蛋白質營養價值評價——氨基酸比值系數法 [J].營養學報,1988(10):187-190.
[17]郭福軍.河蚌蛋白粉的制備及其抗氧化活性的研究 [D].無錫:江南大學,2014.
[18]張靜,郝記明,吉宏武,等.吉尾魚酶解蛋白粉的營養組成與評價 [J].現代食品科技,2008,24(4):387-389.
[19]王麗.鰱魚蛋白粉的酶法制備及其美拉德反應研究 [D].無錫:江南大學,2013.
[20]叢濤.不同工藝花生蛋白質粉的營養價值評論和調節脂代謝作用的研究 [D].北京:中國人民解放軍軍事醫學科學院,2009.
[21]洪鵬志,楊萍,章超樺,等.黃鰭金槍魚頭酶解蛋白粉營養評價及其應用 [J].食品工業科技,2007(4):210-212.
[22]段濤,田素娟,程波,等.人工養殖鱘魚魚頭酶解蛋白粉的營養評價 [J].飼料工業,2011,32(16):48-51.
[23]Kennedy B M.Amino acid content of foods and biological data on proteins[J].Journal of Nutrition Education,1971 (3):118-120.◇