肺癌骨轉移患者檢測血清Ⅰ型膠原交聯N-端肽以及鈣調神經磷酸酶的臨床意義

莊小捷，熊鄢蘭，付華珍

(1、宜春市人民醫院，江西 宜春 336000；2、上高縣中醫院，江西 宜春 336400)

肺癌是指來源于肺部的原發性惡性腫瘤，目前已成為全球重要的公共衛生問題。與其他大多數惡性腫瘤一樣，肺癌易導致多種臟器轉移，其中骨轉移較為常見[1，2]。目前臨床診斷肺癌骨轉移主要依賴影像學檢查技術，但影像學檢查技術診斷肺癌骨轉移存在不足之處，因此臨床上有必要探索其他方法或技術用于肺癌骨轉移的診斷[3]。本研究旨在探討肺癌骨轉移患者檢測血清Ⅰ型膠原交聯N-端肽（NTx）以及鈣調神經磷酸酶（CaN）的臨床意義，現報告如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選取2016年9月-2017年4月宜春市人民醫院腫瘤內科收治的42例肺癌骨轉移患者（骨轉移組）、65例肺癌非骨轉移患者（非骨轉移組）以及同期在該院進行體檢的50例健康體檢者（對照組）作為研究對象。骨轉移組、非骨轉移組均經病理組織學檢查確診為肺癌，骨轉移均經99mTc-MDP SPECT/CT全身骨顯像確診，入組前無抗腫瘤治療史、無外傷性骨折病史，入組前3個月內未使用影響骨代謝的藥物，排除合并骨質疏松癥、骨關節疾病的患者，合并免疫系統疾病的患者。上述3組研究對象基線資料比較差異無統計學意義（P＞0．05）。

1．2 研究方法 空腹抽取研究對象靜脈血4～5ml，離心分離血清，吸取血清置于Eppendorf管中，-20℃凍存，待標本收集結束后統一進行檢測。檢測前將血清平衡至室溫，嚴格按照試劑盒說明書操作，終止顯色后采用酶標儀在450nm處讀取吸光度，根據標準品濃度及其對應吸光度采用Excel軟件繪制雙對數標準曲線，根據待測樣品吸光度求得其NTx、CaN濃度。

1．3 儀器與試劑 安徽中科中佳科學儀器有限公司KDC-40低速離心機，南京德鐵實驗設備有限公司HBS-1096C酶標儀，美國雷杜公司RT-3000全自動洗板機，芬蘭百得公司Prolineplus單道可調移液器，上海潤裕生物科技有限公司NTx試劑盒，上海晶都生物技術有限公司CaN試劑盒。

1．4 統計學分析 采用SAS 9．0統計軟件，三組研究對象之間血清NTx及CaN水平比較采用單因素方差分析、兩兩比較q檢驗，兩個指標診斷肺癌骨轉移靈敏度、特異度的比較采用配對設計χ2檢驗，P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結果

2．1 三組研究對象血清NTx及CaN水平的比較骨轉移組、非骨轉移組、對照組血清NTx、CaN水平比較差異有統計學意義 （P＜0．01），骨轉移組血清NTx、CaN水平顯著高于非骨轉移組、對照組 （P＜0．01），非骨轉移組與對照組血清 NTx、CaN 水平比較差異無統計學意義（P＞0．05）。 見表 1。

表1 三組研究對象血清NTx及CaN水平的比較

表1 三組研究對象血清NTx及CaN水平的比較

分組骨轉移組非骨轉移組對照組樣本量（例） NTx（nmol/L） CaN（U/ml）42 65 50 47．8±25．3 22．9±9．1 20．2±8．6 1612±437 590±194 538±169

2．2 血清NTx及CaN診斷肺癌骨轉移的臨床價值ROC曲線分析顯示，血清NTx診斷肺癌骨轉移的最佳閾值為31．7nmol/L，其靈敏度、特異度分別為88．1%（37/42）、92．2%（106/115）。 血清 CaN 診斷肺癌骨轉移的最佳閾值為806U/ml，其靈敏度、特異度 分 別 為 78．6%（33/42）、87．8%（101/115）。 血 清NTx診斷肺癌骨轉移的靈敏度、特異度顯著高于CaN，差異有統計學意義（P＜0．05）。

2．3 血清NTx及CaN聯合檢測診斷肺癌骨轉移的臨床價值 采用平行試驗進行分析，即血清NTx≥31．7nmol/L或 CaN≥806U/ml則可診斷肺癌骨轉移，結果可見血清NTx及CaN聯合檢測診斷肺癌骨轉移的靈敏度、特異度分別為97．6%（41/42）、86．1%（99/115）。

3 討論

肺癌是目前臨床上發病率、死亡率均較高的惡性腫瘤之一[4]。如前所述，肺癌患者極易發生骨轉移，目前臨床診斷肺癌骨轉移主要依賴影像學檢查技術，如電子計算機斷層掃描（CT）、發射型計算機斷層掃描（ECT）、正電子發射計算機斷層顯像（PET-CT）、磁共振成像（MRI）等[5-8]。 值得注意的是，影像學檢查技術診斷肺癌骨轉移存在不足之處。其一，影像學檢查技術的靈敏度較低，往往需骨質破壞到一定程度才可顯像[9，10]。其二，影像學檢查技術的設備昂貴，在基層醫院難以大規模推廣應用。其三，影像學檢測過程中產生放射性物質，有產生環境污染的風險?；谏鲜鲈颍R床上有必要探索其他方法或技術用于肺癌骨轉移的診斷。

隨著醫學技術的發展，血清學標志物逐步應用于肺癌骨轉移的診斷，并且目前已涌現出有一定臨床價值的血清學標志物，如NTx、CaN等。既往研究認為，90%的人類骨質由膠原構成，在破骨細胞吸收骨質過程中，膠原纖維可以降解成為NTx、Ⅰ型膠原交聯C-端肽 （CTx）、Ⅰ型膠原C-端肽（ICTP）、吡啶交聯等物質，而惡性腫瘤骨轉移的本質就是破骨細胞吸收骨質，這使得上述骨代謝產物與惡性腫瘤骨轉移有著密切的聯系[11]。在上述骨代謝產物中，NTx包含定位于α-2交聯N-端的獨特氨基酸序列，該序列是骨膠原與其他組織型膠原相區別的重要標志，因此NTx被認為是診斷惡性腫瘤骨轉移特異性較高的指標之一[12，13]。CaN由CaNA、CaNB兩個亞基組成，它是目前已知的唯一一個受Ca2+/鈣調蛋白調節的絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶，在體內參與多種細胞功能調節。研究認為，CaN與惡性腫瘤骨轉移密切相關，有高骨轉移傾向的肺癌細胞株SBC-5細胞中有CaN高表達[14，15]。綜上所述，本研究探索血清NTx、CaN診斷肺癌骨轉移具有重要的臨床意義。

在本研究中，初步研究結果顯示骨轉移組血清NTx、CaN水平顯著高于非骨轉移組、對照組（P＜0．01），非骨轉移組與對照組血清 NTx、CaN 水平比較差異無統計學意義（P＞0．05）。進一步分析顯示，血清NTx診斷肺癌骨轉移的靈敏度、特異度分別為88．1%、92．2%，而血清CaN診斷肺癌骨轉移的靈敏度、特異度分別為 78．6%、87．8%，血清 NTx 診斷肺癌骨轉移的靈敏度、特異度顯著高于CaN（P＜0．05）。采用平行試驗對這兩個指標進行聯合分析，結果顯示聯合檢測診斷肺癌骨轉移的靈敏度、特異度分別為 97．6%、86．1%。 綜上所述，血清 NTx以及CaN均可以用于肺癌骨轉移的診斷，血清NTx診斷肺癌骨轉移的診斷性能優于CaN，采用平行試驗聯合檢測這兩個指標可以取得較好的靈敏度、特異度。

[1]朱禮．肺癌骨轉移血清腫瘤標志物水平及放療對血清PINP和β-CTX 水平的影響分析[J]．河北醫學，2017，23（3）：394-398．

[2]董熠，魏月華，胡偉國，等．非小細胞肺癌孤立性骨轉移的治療[J]．國際腫瘤學雜志，2017，44（1）：60-62．

[3]李磊，李殿明．血清堿性磷酸酶和血清鈣水平測定對原發性肺癌骨轉移的臨床診斷價值[J]．蚌埠醫學院學報，2017，42（2）：158-161．

[4]王穎穎，趙靜．探討肺癌腫瘤標志物聯合檢測在診斷中的意義[J]．實驗與檢驗醫學，2016，34（5）：639-642．

[5]劉海燕，陳傳濤，張兆凱，等．螺旋CT多期掃描對肺癌多發骨轉移的診斷價值研究[J]．中國 CT 和 MRI雜志，2017，15（11）：5-7．

[6]李文兵，劉 躍，趙穎，等．ECT聯合相關指標診斷肺癌骨轉移的價值[J]．現代中西醫結合雜志，2013，22（13）：1451-1452．

[7]周建明，毛朝明，朱麗，等．18F-FDGPET/CT、99mTc-MDP 全身骨顯像及其聯合CT對肺癌骨轉移的診斷價值比較 [J]．醫學影像學雜志，2017，27（10）：1902-1907．

[8]朱劍峰，李志輝，朱紅靜，等．SPECT與MRI在不同病理類型肺癌的骨轉移診斷準確性對比分析 [J]．中國現代醫學雜志，2014，24（27）：93-96．

[9]孫秀娟，王火強．PET-CT對肺癌骨轉移診斷的研究進展[J]．國際腫瘤學雜志，2012，39（8）：598-600．

[10]陳申，馬銳．肺癌骨轉移的診斷進展[J]．醫學與哲學，2014，35（14）：51-54．

[11]Tamiya M，Tokunaga S，Okada H，et al．Evaluation of Bone Metastasis Using Serial Measurements of Serum N-Telopeptides of Type I Collagen in Patients with Lung Cancer：A Prospective Study[J]．Anticancer Res，2015，35(7)：3987-3993．

[12]喬丹，王智煜，文孝婷，等．血清-NTx對肺癌、乳腺癌患者診斷骨轉移及預后評價價值的Meta分析 [J]．臨床腫瘤學雜志，2015，20（3）：212-216．

[13]周正軍，張憲．真血清NTx在肺癌骨轉移早期診斷中的臨床價值研究[D]．泰安：泰山醫學院，2011．

[14]周菁，龐海林，張峰，等．鈣調神經磷酸酶Aα對不同骨轉移潛能小細胞肺癌細胞株黏附作用的影響 [J]．現代腫瘤醫學，2013，21（6）：1167-1171．

[15]馬寧強，張賀龍．鈣調神經磷酸酶(CaN)在肺癌骨轉移中的作用[D]．西安：第四軍醫大學，2011．