人體血液中乙醇測定方法探析

顧亞琴

摘 要：自我國新的刑法修正案頒布實施將醉酒駕駛機動車納入刑事犯罪以來，機動車駕駛人員體內血液中乙醇的測定成了此類案件定罪量刑的關鍵證據。而人體中乙醇的檢測方法也會直接影響最終結論。為此，本文主要探析目前常用的幾種血液中乙醇檢測方法，以期能對今后人體血液乙醇檢測的研究提供參考和借鑒。

關鍵詞：乙醇 毒物分析技術 毒理學 頂空氣相色譜法

中圖分類號：R115 文獻標識碼：A 文章編號：1672-3791（2018）09（a）-0225-02

乙醇也稱酒精，是各種酒類飲料的主要成分。乙醇在人體內主要經過胃和小腸代謝，在0.5～3h內可完全被人體吸收。乙醇進入人體后，95%～98%經會通過肝代謝先被氧化成乙醛，再進一步被氧化成乙酸，其余部分2%～5%，主要以原體形態的由尿液呼氣和汗液排出體外。大量飲用高濃度酒會造成急性酒精中毒，嚴重者會危及生命健康。同時，飲酒過量也會對社會造成較大危害，如酒后駕車造成的交通事故。

1 化學法

lieben碘仿反應，是有機分析上常用的化學反應方法。碘仿反應常被用來測定新合成的化合物結構特點和鑒別未知物成分結構的主要方法。碘仿是一種難溶于水的黃色固體，具有特殊臭味，作為鑒別比氯仿和溴仿好并且反應非常靈敏。其在為乙醇檢測的原理是在堿性條件，碘可以氧化乙醇。乙醇和碘反應生成碘仿，淺黃色沉淀。也可用碘和氫氧化鈉溶液來鑒別乙醛或甲基酮。

此外，還有conway法（微量擴散法）在液體檢材中，加入適量飽和碳酸鈉溶液作為乙醇釋放劑，促使檢材中的乙醇揮發。用重絡酸鉀——硫酸溶液吸收氣相中的乙醇蒸氣，并把乙醇氧化成乙酸再通過自身吸收劑的顏色反應來判斷檢材中是否含有乙醇。此外還有可以作為乙醇定性的檢測方法，如vitali反應，主要采用氫氧化鉀和二硫化碳及鉬酸銨溶液的顏色反應鑒別，靈敏度為1∶100。化學法總體操作簡便，成本較低，對實驗室要求不高，容易普及，但是化學法靈敏度相對較低，易受外界環境因素的影響，準確性低。

2 酶法

酶法自動分析目前已經廣泛使用，常用的酶學測定法有兩種，分別是ADH法及乙醇氧化酶法，其原理為選用三（羥甲基）氨基甲烷-鹽酸作為緩沖體系，乙醇在乙醇脫氫酶催化作用下轉化成乙醛，并生成還原型輔酶Ⅰ。用吸光度法檢測340nm波長處的變化，同時對照參考值標準得到乙醇的濃度值。乙醇氧化酶法，其試劑組成較為簡易，不足之處是檢測的特異性弱，特別是甲醇對檢測過程的干擾大，易出現假陽性。ADH法相對特異， 受到甲醇或異丙醇等物質的干擾細微，并且ADH相對更容易獲取，成本較低。目前，已有此類商品化試劑盒供應，檢測方便快捷。酶法的不足之處在于對于反應溫度條件比較苛刻，易受其他化學類物質的干擾。

3 氣相色譜法

頂空氣相色譜法是在氣相色譜儀進樣口前面增加一個頂空進樣裝置的一種色譜化學成分檢測分析技術。常解釋為將頂空進樣器與氣相色譜儀聯用的儀器。用于分析易揮發的微量成分，如對甲醇、乙醇等揮發性有機溶劑。頂空氣相色譜法目前主要用于我國交通事故駕駛人員及肇事人員血液中酒精定性定量確證分析，以及中西醫藥投入市場前對其殘留物品的檢測分析、司法案件中有毒氣體和揮發性毒物的認定分析等，它可以將被測樣品 （氣-液和氣-固）加熱平衡后，提取其中揮發氣體部分進入氣相色譜儀。具有操作方法簡單、過程迅速、分析結果準確可靠的特點。

采用頂空氣相色譜法，可直接對血料中的乙醇定性定量檢測。國家公安部司法部已頒布相應的檢測技術規范，也是現行推廣和使用較多的方法之一。其原理是利用乙醇的易揮發性，以叔丁醇為內標，用頂空氣相色譜火焰離子化檢測器進行檢測，并與平行操作的乙醇對照品進行比較分析，以保留時間進行定性分析；以峰面積為依據，用內標法進行定量分析。色譜法是一種物理或物理化學分離分析方法。

該方法操作簡單易行，穩定性好，雜質干擾小。相對直接氣相色譜法，大幅減少了對色譜柱的損害，同時也無需進行復雜的樣品提成與純化，從而大大降低分析的成本，提高精準度和精密度。但是，在操作過程中也要注意確保頂空平衡溫度及平衡時間的一致性，這直接關系到分析測定的準確可靠性。

4 色-質聯用法

自1957年J.C.Holmes和F.A.Morrell首次實現氣相色譜和質譜聯用以后，這個技術的發展日新月異。氣質聯用法是同時將氣-液色譜和質譜的特點結合起來，用于確診被檢樣本中不同物質定性和定量的檢測分析途徑，其具有GC的高分辨率和質譜的高靈敏度。氣相色譜是把混合樣本中的不同成分，按時間分離出來，而質譜則給出的是每個組分結構的具體信息。在所有聯用技術中氣質聯用（即GC/MS）的發展最為完善，應用最為廣泛。現在從事化學分析和毒物分析的實驗室及檢測機構都把GC/MS法作為檢測定性分析的核心技術手段之一，同時GC/MS也被用于定量分析。另一方面，目前市面上銷售的有機質譜儀、傅立葉變換質譜（FTMS）、離子阱質譜，還有飛行時間質譜（TOF），磁質譜、四極桿質譜等分析儀器，均能和氣相色譜聯用。還有一些其他的氣相色譜和質譜連接的方式，如氣相色譜-燃燒爐-同位素比質譜等。當前色-質聯用法已經成為檢測分析復雜混合物最為有效的手段之一。氣相色譜和質譜由接口相連。氣質聯用法普遍運用于藥品的檢測、毒物的分析、生物樣品中藥物與代謝產物定性定量分析及未知樣品成分的確定。氣-質譜聯用法結合了色譜定量和質譜定性的所有優秀性能特點，快捷靈敏，特異性強，已普遍運用于易揮發性有機物的檢測和分析，但是該方法檢出限比不上頂空氣相色譜法而且氣相色譜質譜儀比較昂貴，維護保養麻煩，不能普及使用。

在人體血液中乙醇的測定工作中，由于使用分析設備檢測方法，檢測人員測量環境以及被檢樣本的不同，產生得測量結果通常存在不確定性。因此，仍需要進一步的研究和發展。

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