液基細胞學與HPV分型聯合檢測對早期宮頸癌的篩查意義

趙 君 趙 媛

宮頸癌是女性常見惡性腫瘤之一，發病率僅次于乳腺癌，是危害女性健康的疾病，應當給予較高的重視。約90%的宮頸癌與高危型HPV感染有關，因此對已婚女性進行HPV檢測，有助于降低高危型HPV感染婦女宮頸癌的發生風險，具有重要的意義[1]。本研究采用液基細胞學技術(TCT)聯合HPV分型檢測對已婚婦女進行宮頸病變篩查，旨在探討TCT聯合HPV分型檢測對早期宮頸癌篩查的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選擇2014年1月至2016年5月我院婦科門診診治的慢性宮頸炎患者714例。入選患者均為已婚婦女，年齡20～65歲，平均(32.5±11.2)歲，無妊娠，無宮頸手術病史，無子宮切除，無其他婦科腫瘤，同意進行TCT及HPV檢測。

1.2 樣本采集

選擇月經干凈后3～7天，取材前48 h禁止性生活，前72 h禁止沖洗陰道及使用陰道藥物。患者取膀胱截石位，使用陰道窺器暴露宮頸，將專用宮頸細胞采集刷伸入宮頸管內，順時針旋轉3～5圈取出，裝入專用的細胞保存液收集管中，標記好患者詳細信息。

1.3 TCT檢測

采用湖北亞光技術有限公司的甩片機制片，蘇木精-伊紅(HE)染色后鏡檢，采用TBS報告系統報告，包括非典型鱗狀上皮細胞(ASC)[無明確診斷意義的非典型鱗狀上皮細胞(ASC-US)和不除外高度病變的非典型鱗狀上皮細胞(ASC-H)]、低度鱗狀上皮內病變(LSIL)[宮頸輕度不典型增生(CIN-Ⅰ)]、高度鱗狀上皮內病變(HSIL)[宮頸中度不典型增生(CIN-Ⅱ)和宮頸重度不典型增生(CIN-Ⅲ)]和鱗狀細胞癌(SCC)。

1.4 HPV-DNA分型檢測

將保存液中的標本離心，取沉淀物，采用PCR-反向點雜交法檢測HPV-DNA，試劑盒來自深圳亞能生物公司，共檢測23個HPV基因型，分別為高危型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82，低危型：HPV6、11、42、43、81、83。

1.5 病理學檢查

將TCT和HPV-DNA任一檢測陽性或二者均陽性者進行陰道鏡取活檢檢查，病理組織結果分為正常或炎癥、宮頸上皮內瘤變(CIN)和宮頸癌，其中CINⅠ相當于TCT診斷中的LSIL，CINⅡ和CINⅢ相當于TCT診斷中的HSIL[2]。

1.6 統計學方法

所得數據應用SPSS 22.0進行統計學分析，計數資料采用χ2檢驗，計量資料采用t檢驗。

2 結果

2.1 HPV感染在各年齡段分布

在HPV感染的各年齡組中，20～30歲組和51～60歲組的感染率較高，分別為36.7%和39.7%，各年齡組感染率差異有統計學意義(χ2=14.974，P=0.039)。見表1。

表1 HPV-DNA感染在各年齡段分布

2.2 兩種檢測方法陽性率比較

TCT檢測陽性率為25.8%，HPV-DNA檢測陽性率為29.7%，略高于TCT檢測，但二者差異無統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 兩種檢測方法檢出情況比較/例

2.3 TCT檢測異常結果與病理診斷結果對照

TCT檢測異常與病理診斷結果對照顯示：ASC-US中70.6%為慢性宮頸炎癥，LSIL中54.2%為CINⅠ，HSIL中31.6%為CINⅡ，50.0%為CINⅢ，SCC中有1例病理診斷為CINⅢ，其余5例與病理診斷結果一致，見表3。

表3 TCT檢測陽性結果與病理診斷結果對照(例，%)

2.4 HPV-DNA陽性與病理診斷結果對照(表4)

HPV-DNA高危型感染者中病理診斷為宮頸癌5例，占6.5%，高于HPV-DNA低危型感染者宮頸癌的發生率(0.7%)，差異有統計學意義(P<0.05)。

表4 HPV-DNA陽性與病理診斷結果對照(例，%)

2.5 TCT聯合HPV-DNA分型檢測診斷宮頸癌的價值

TCT聯合HPV-DNA分型檢測診斷宮頸癌的敏感度高于TCT和HPV-DNA單獨檢測，特異度高于HPV-DNA單獨檢測，假陽性率低于HPV-DNA單獨檢測，假陰性率低于TCT和HPV-DNA單獨檢測，差異有統計學意義(P<0.05)。見表5。

表5 TCT聯合HPV-DNA分型檢測診斷宮頸癌的價值/%

注：與TCT聯合HPV-DNA檢測比較，*為P<0.05。

3 討論

宮頸癌是發病率僅次于乳腺癌的婦科惡性腫瘤，從宮頸癌前病變發展到宮頸癌至少需要10年時間，可見宮頸癌是可預防的疾病，而預防的關鍵是明確誘發宮頸癌的因素及做好癌前病變的篩查[3]。HPV的持續感染是宮頸癌發生的主要原因，尤其是高危型HPV的感染與宮頸癌的發生密切相關[4-5]，流行病學研究顯示HPV的持續感染是宮頸癌發生的必要條件，換句話說，無HPV感染，就不可能發生宮頸癌[6]。在不同的年齡段，HPV感染的風險是不同的，本研究結果顯示在20～30歲和51～60歲的感染率較高，出現兩個感染的高峰。30歲以前的女性處于性活躍期，頻繁的性生活增加了HPV的感染機會，此年齡段的HPV高感染率與性行為有關，且呈現出單一HPV類型感染的類型。50～60歲女性處于更年期，雌激素水平的下降，免疫功能的降低，致使自身清除HPV病毒的能力下降，此年齡段女性HPV感染類型中雙重感染和多重感染的類型增多。

隨著宮頸癌篩查在臨床的廣泛開展，宮頸癌的發病率及死亡率呈現下降的趨勢。宮頸癌的癌前病變存在可逆轉的特點[7-8]，及早診斷與恰當處理對預防宮頸癌至關重要，研究顯示早期宮頸癌的治愈率幾乎可以達到100%[9]。TCT檢查是目前廣泛應用與宮頸癌篩查的技術，能發現癌前病變，同時可以區分陰道病病原菌感染的類型，但是資料顯示TCT檢測對CINⅡ級以上的病變檢測的敏感度不高[10]，易出現假陽性或假陰性的結果，給患者造成心理負擔。本研究中TCT檢測陽性的患者中，1例分型為SCC的患者經宮頸組織病理診斷結果顯示為CINⅢ，而1例分型為HSIL的患者病理診斷結果顯示未宮頸癌，提示TCT檢測具有漏檢及誤檢的可能，做為單一篩查宮頸癌的手段其準確性有待提高。HPV病毒感染的檢測在一定程度上彌補TCT檢測敏感性及特異性不高的不足[11]。HPV檢測取材方便，用于TCT檢測的標本同樣可以用于HPV的檢測，兩種檢測手段聯合檢測不僅可以明確已出現宮頸病變的婦女，同時可以預測可能患病的婦女，利于及早進行干預。本研究結果顯示聯合TCT和HPV-DNA分型檢測提高了診斷宮頸癌的敏感度和特異度，同時降低了假陽性率和假陰性率。HPV不僅在不同年齡度婦女的感染率有差異，其感染的不同HPV類型對宮頸的病變宜有顯著不同。大部分女性感染HPV是一過性的，只有少部分發展為持續性感染，且這部分感染的HPV類型以高危型HPV-DNA為主[12]。目前認定與宮頸癌宮頸上皮內瘤樣病變有關的高危型HPV-DNA共有17個型，分別為HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82[13-15]。本研究選用的HPV-DNA檢測試劑包括這17種高危類型，結果顯示212例HPV-DNA陽性的標本中，高危型HPV-DNA感染77例，占36.3%。本組病例中，6例患者最終診斷為宮頸癌，其中高危型HPV-DNA感染5(6.5%)例，低危型HPV-DNA1(0.7%)例，提示高危型HPV-DNA感染的患者宮頸癌的發生率顯著高于低危型HPV-DNA感染，可見對HPV分型檢測可以評估感染患者的罹患宮頸癌的風險程度，達到對不同感染型別HPV患者區分治療的目的。

綜上所述，TCT聯合HPV-DNA分型檢測可以提高診斷宮頸癌的敏感性和特異性，對宮頸癌的早發現、早治療有重要臨床意義。

[1] 趙 娟,楊銀忠,張朝明.人乳頭瘤病毒檢測對宮頸病變的診斷價值〔J〕.實用癌癥雜志,2016,31(1):53-55.

[2] 霍文婧,梁茂盛,韓存芝.人乳頭瘤病毒聯合薄層液基細胞檢查在子宮頸疾病篩查中的應用〔J〕.腫瘤研究與臨床，2016,28(2):103-106.

[3] Wang SY,Yang HW,Zhang HT,et al.A surface plasmon resonance-based system to genotype human papillomavirus〔J〕.Cancer Genet Cytogenet,2010,200(2):100-105.

[4] 夏小艷,鐘 焱,李耀軍.10117例女性公務員宮頸高危型HPV感染與TCT相關性分析〔J〕.中國醫學創新，2015,12(30):99-101.

[5] 徐明堂,何春年,許長田,等.宮頸鱗狀上皮病變中人如乳頭瘤病毒16/18存在狀態的研究〔J〕.中華病理學雜志，2013,42(6):400-401.

[6] Arbyn M,Ronco G,Anttila A,et al.Evidence regarding human papillomavirus testing in secondary prevention of cervical cancer〔J〕.Vaccine,2012,30(Suppl 5):F88-F99.

[7] Pimple S,Muwonge R,Amin G,et al.Cytology versus HPV testing for the detection of high-grade cervical lesions in women found positive on visual inspection in Mumbal India〔J〕.Int J Gynaecol Obstet,2010,108(3):236-239.

[8] Dahlstrom LA,Ylitalo N,Sundstrom K,et al.Prospective study of human papillomavirus and risk of cervical adenocarcinoma〔J〕.Int J Cancer,2010,127(8):1923-1930.

[9] 盧振華.宮頸癌篩查技術綜述〔J〕.檢驗醫學與臨床,2011,8(2):206-208.

[10] Cuzick J,Arbyn M,Sankaranarayanan R,et al.Overview of human papillomavirus-based and other novel options for cervical cancer screening in developed and developing countries〔J〕.Vaccine,2008,26(Suppl 10):K29-K41.

[11] 鐘萍萍,顧依群,王 軍,等.DNA定量分析在宮頸癌篩查中的應用〔J〕.中華病理學雜志,2013,42(7):469-470.

[12] McAdam M,Sakita J,Tarivonda L,et al.Evaluation of a cervical cancer screening program based on HPV testing and LLETZ excision in a low resource setting〔J〕.PLoS One,2010,5(10):e13266.

[13] 揭偉霞,薛武進,史志華,等.宮頸上皮內瘤變與宮頸癌患者人乳頭狀瘤病毒感染的臨床分析〔J〕.中華醫院感染學雜志,2016,26(6):1380-1381,1392.

[14] 趙平森,賈潤清,林利芳,等.廣東省梅州市24450例女性HPV感染與基因分型〔J〕.中華實驗和臨床病毒學雜志，2016,30(3):311-314.

[15] 王 睿,卜范峰,田欣欣,等.山東地區女性人乳頭瘤病毒感染亞型、多重感染情況及年齡分布差異〔J〕.中國生物制品學雜志,2016,29(1):57-60.