結腸癌患者術前血清中細胞因子的表達對預后的意義

劉 博 張 欣 翟 艷

結腸癌是一種高發性腫瘤，在西方國家中，結腸癌占所有癌癥的10%以上[1]。在中國，結腸癌的發病率也顯著增加。目前，判斷結腸癌預后常用的方法就是監測淋巴結轉移的情況[2]。然而，現在并沒有預測遠端轉移和局部復發的可靠指標。一些常見的結腸癌預后因子主要是分子和生化標志物，但是高昂的檢測成本限制了其在臨床的廣泛應用[3]。

細胞因子是一種由淋巴細胞分泌的具有免疫調節功能的激素，其中IL-6已被證實和多種腫瘤相關[4-7]。CRP也是一種常見細胞因子，在乳腺癌中可作為患者存活的獨立預后因素[8]，但在結腸癌中，循環CRP水平和預后的關系尚無定論[9]。此外，結腸癌患者術前血清中EGF和腫瘤中EGFR水平之間的關系也很少有研究報道。在本研究中，我們通過回顧性分析Ⅲ期結腸癌患者術前血清中細胞因子(EGF、IL-6和 CRP)的水平，研究了其與患者預后的關系。

1 材料與方法

1.1 一般資料

收集2013年9月至2016年9月于我院經結腸癌根治術的83例Ⅲ級結腸癌患者的臨床資料，其中男性47例，女性36例；≥60歲患者61例，<60患者22例；根據TNM分期標準，Ⅲ期79例，Ⅳ期4例。N1患者73例，N2患者10例。淋巴血管侵犯患者13例。所有患者均接受標準輔助化療83例。臨床資料來源于患者術后復查，檢查項目包括血清癌胚抗原(CEA)、胸部X線攝影、腹部計算機斷層掃描(CT)、結腸鏡檢查、腹部超聲檢查、血常規、血清中腫瘤標志物檢查。所有患者均接受了標準輔助化療。

1.2 納入與排除標準

納入標準：患者年齡18～80歲；手術前未發現遠端轉移且術后病理檢查確診為結腸癌；術前無呼吸或循環系統重大疾病；無術前化療史。排除標準：年齡<18歲或者>80歲的患者；手術中發現多發轉移或肝轉移，無法根治切除；其他臟器有重大疾病的患者；隨訪時間在3個月以下。

1.3 血清樣本的處理

收集患者術前血液樣本，在3 000 r/min條件下離心處理5 min。移除血清并將樣品保存于-80 ℃條件下，以備生化分析。

1.4 細胞因子的檢測

通過EGF和IL-6的免疫試劑盒(上海生工生物工程有限公司)檢測EGF和IL-6的含量，依照試劑盒說明書進行操作。通過免疫比濁法測定血清中CRP的含量。

1.5 免疫組化測定EGFR的含量

通過檢測細胞膜棕黃色沉淀判斷EGFR的表達水平，其中，0分表示無著色、1+表示弱膜著色、2+表示中等程度膜著色、3+表示強的完全膜著色。

1.6 統計分析

研究的終點設定在根治切除后，且在腫瘤復發之前。無病生存期定義為從根治切除后直到腫瘤復發的時間。通過t檢驗對兩樣本平均值進行比較，使用方差分析進行多樣本間比較。通過χ2檢驗或Fisher精確概率法進行樣本間率的比較。通過Cox比例模型進行多變量分析。使用SPSS 13.0軟件進行統計分析。

2 結果

2.1 術前血清中細胞因子的水平

EGF、IL-6和CRP水平的中位數分別為183.2(10～221)pg/mL、8.81(0.01～305)pg/mL和1.27(0.5～5.0)mg/dL。

2.2 術前血清中細胞因子水平與無病生存率的相關性分析

術前IL-6水平高于9 pg/mL與無病生存率顯著相關(P<0.05)，CRP和EGF水平與無病生存率并無顯著關系(P=0.227；P=0.304)。見表1。

表1 患者術前血清中細胞因子和無病生存之間的關系(例，%)

2.3 血清EGF水平與腫瘤組織EGFR以及血清IL-6水平的相關性分析

在83例患者中，EGFR陽性61例(73.5%)，陰性22例(26.5%)。腫瘤中EGFR的陽性與血清中EGF水平之間并無顯著相關性(γ=0.234,P=0.479)。此外，EGF與IL-6之間也沒有顯著相關性(γ=0.211,P=0.297)。見表2。

表2 血清EGF水平與腫瘤組織EGFR陽性的相關性/例

3 討論

近年來，結腸癌的外科手術技術和藥物治療得到了長足的進展，然而，患者的預后依然很不理想[9-10]。造成這種情況的原因之一就是預測預后的指標的缺乏。所以，發現并驗證預后相關指標，對患者的總體生存和無病生存率進行預測是很有必要的。

研究已經證實，IL-6與很多種癌癥的發生與發展都有緊密的聯系，其在臨床診斷中的作用也被越來越多地認識到[11]。在我們的研究中，IL-6在Ⅲ級結腸癌患者血清中是高表達的，這與前人的研究是一致的[12]。本研究旨在發現IL-6對結腸癌患者預后的意義，以及其與EGF、EGFR之間的關系。EGFR通路可誘導核因子kappaB的活性，促進驗證因子的表達，包括IL-6和IL-8[13]。然而，在本研究中，患者術前血清中EGF的水平與血清IL-6的水平(P=0.297)與腫瘤組織EGFR的表達(P=0.479)并無顯著的相關性。

腫瘤患者IL-6高表達的原因包括癌胚抗原介導的Kupffer細胞分泌IL-6，以及慢性應激導致的腫瘤相關巨噬細胞分泌IL-6。相應的，我們的研究發現，術前血清中高水平的IL-6與無病生存率有關(P=0.027)。這可能與IL-6通過自分泌的途徑增加腫瘤細胞運動能力有關。另外，通過旁分泌途徑，腫瘤細胞分泌的IL-6能夠刺激間質細胞分泌肝細胞生長因子，而肝細胞生長因子與腫瘤細胞上的干細胞因子受體結合后，也會增加腫瘤細胞的運動能力。目前，國內關于Ⅲ級結腸癌患者術前血清中IL-6的水平與預后的關系的研究還很少有報道。我們的研究表明，IL-6有潛力作為預測低生存率的預后生物指標之一。對于CRP，雖然已有研究證明了其與結腸癌復發的關系[14]，但是在我們的研究中并未發現CRP與無病生存的關系。所以，今后的研究需要進一步增大樣本量以驗證本研究結果。

綜上所述，術前血清中IL-6的水平對于Ⅲ級結腸癌患者預后的判斷具有重要價值。IL-6有潛力作為判斷不良預后的指標。而IL-6的水平與EGF的水平以及腫瘤組織中EGFR的陽性與否并沒有顯著相關性。所以，術前檢測血清IL-6的水平有助于預后的預測。

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