FOXJ1及SATB-1在胃癌組織中的蛋白表達情況及其與腫瘤分期、轉移的相關性

李延新 杜 雄

已有研究表明，FOX家族蛋白與核基質結合蛋白(SATB-1)參與到細胞凋亡，惡性腫瘤轉化過程，因此本研究旨在探究FOXJ1及SATB-1在胃癌組織中的蛋白表達情況及其與腫瘤分化、轉移、臨床預后的相關性，以期為胃癌早期診斷提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 標本來源

收集我院2013年2月至2015年4月收治的180例經外科手術切除并經病理確診的胃癌組織標本及相應的癌旁正常組織(鏡下診斷無癌組織浸潤)作為對照組，其中包含男性114例，女性66例，平均年齡(57.72±4.1)歲；所有手術標本在半小時內采集后立即儲存中液氮。TNM分期參考美國癌癥聯合委員會(AJCC)分期標準。

1.2 納入、排除標準

納入標準：①所有病例在術前均未行放化療；②病例資料完整，均與家屬簽署知情同意書。該研究獲得我院倫理委員會批準；排除標準：①合并嚴重臟器功能不全；②合并其他惡性腫瘤。

1.3 方法

1.3.1 免疫組織化學 采用免疫組織化學(SP法)檢測胃癌組織及癌旁正常組織中FOXJ1及SATB-1蛋白的表達情況，所有操作步驟嚴格按照試劑盒說明書(SP試劑盒購于武漢博士德生物有限公司)。操作步驟簡述如下：常規切片后烤片、二甲苯脫蠟，梯度酒精脫水、滅活內源性過氧化物酶，抗原修復、滴加已稀釋好的一抗(兔抗人SATB1多克隆抗體、鼠抗人FOXJ1單克隆抗體均購于美國Abcam公司)、4 ℃孵育過夜、加二抗室溫孵育，滴加辣根過氧化物酶標記的鏈霉卵白素孵育、使用DAB顯色(DAB顯色試劑盒購于武漢博士德生物有限公司)，蘇木精復染，脫水并封片。

1.3.2 結果判定 SATB-1是核轉錄因子，定位于細胞核，細胞核呈橘黃色為陽性表達。FOXJ1蛋白染色以細胞質出現淡黃色至棕黃色顆粒為陽性。參照Sinicrope[1]評分標準對蛋白進行半定量：根據陽性細胞染色強度及細胞陽性率綜合評分，兩者得分相乘，總分(0～3)分為陰性表達，總分(4～12)分為陽性表達。染色強度評分：未出現陽性染色計0分；弱染色1分；中等染色2分；強染色3分；細胞陽性率評分：隨機選取5個視野，陽性細胞數≤5%計0分；6%～25%計1分；26%～50%計2分；51%～75%計3分；≥75%計4分。由兩名病理科副主任醫師獨立閱片。

1.4 統計學分析

應用SPSS 17.0軟件，計數資料用卡方檢驗對比分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 FOXJ1及SATB-1在胃癌組織及癌旁正常組織中表達量的差異

經免疫組織化學SP法檢測發現FOXJ1蛋白在胃癌組織中陽性表達率為48.33%，顯著低于其在正常組織中的陽性表達率(94.44%，P<0.01)；SATB-1蛋白在胃癌組織中陽性表達率為58.33%，顯著高于其在正常組織中的陽性表達率(9.44%，P<0.01)，見表1。

2.2 FOXJ1及SATB-1蛋白表達與胃癌臨床病理參數的相關性

統計學分析結果表明：不同性別、年齡及不同腫瘤位置患者的FOXJ1蛋白表達水平比較無統計學差異(P>0.05)，而與腫瘤浸潤深度、分化程度、淋巴結轉移、遠端轉移、臨床分期等顯著相關。浸潤深度大、分化程度低、已發生淋巴結轉移或遠端轉移、臨床分期為Ⅲ、Ⅳ期患者FOXJ1蛋白陽性表達率顯著較低(P<0.05)。SATB-1蛋白表達水平與患者年齡、性別、腫瘤位置等無相關性(P>0.05)，而浸潤深度深、已發生淋巴結轉移或遠端轉移、臨床分期為Ⅲ、Ⅳ期患者SATB-1蛋白陽性表達率顯著較高(P<0.05)，見表2。

表1 FOXJ1及SATB-1在不同組織中表達水平的差異(例，%)

3 討論

研究表明在惡性腫瘤的增殖、發展過程中常伴隨著原癌基因與抑癌基因的調控紊亂，進而導致相應蛋白的異常表達[2]。研究腫瘤病理過程中蛋白質表達變化有助于發現腫瘤病變中關鍵的調控蛋白，通過定向調節該蛋白的表達水平，控制腫瘤病變，這也是腫瘤靶向治療的基礎。本文采用免疫組化的方法檢測FOXJ1及SATB-1在胃癌組織中的蛋白表達情況及其與腫瘤分化、轉移、臨床預后的相關性，結果表明：FOXJ1蛋白在胃癌組織中陽性表達率顯著低于其在正常組織中的陽性表達率，而SATB-1蛋白在胃癌組織中陽性表達率顯著高于其在正常組織中的陽性表達率。進一步研究蛋白表達水平與臨床病理的相關性發現：不同性別、年齡及腫瘤位置患者的FOXJ1、SATB-1蛋白表達水平比較無統計學差異。腫瘤浸潤深度大、發生淋巴結，遠端轉移、臨床分期為Ⅲ、Ⅳ期患者的FOXJ1蛋白陽性表達率顯著較低，SATB-1蛋白陽性表達率顯著較高。

FOXJ1蛋白是FOX蛋白家族中的一員，FOX家族在腫瘤的發生發展過程中起重要的調控作用。已有研究表明，FOXJ1可通過促進上皮間質轉化及金屬蛋白酶7的表達，進而促進肝癌轉移；FOXQ1在多種腫瘤病變中扮演促癌基因角色，加快腫瘤惡化。與其他成員的作用不同，FOXJ1蛋白在不同的腫瘤類型及發展階段呈現異質性表達，在肝癌患者組織中FOXJ1蛋白表達上調，然而在卵巢癌和子宮內膜癌中FOXJ1蛋白表達水平顯著下調，且具有明顯的浸潤和促轉移作用[3]。在胃癌組織中FOXJ1蛋白發揮抑癌基因作用，該研究結果與劉秀鵬[4]、袁春鑾等[5]的報道一致。目前，關于FOXJ1蛋白的異質性表達還沒有明確的機制解釋，仍需進一步研究。核基質結合蛋白(SATB-1)是1種組織特異性表達的核基質結合蛋白，其廣泛參與細胞分化、凋亡、腫瘤的發生過程，能夠調控與腫瘤發生相關的上千余種基因的表達，被譽為“基因組織者”。研究顯示SATB-1能夠上調原癌基因表達的同時下調抑癌基因表達，在結腸癌、肝癌、前列腺癌等惡性腫瘤中呈現高表達，且與腫瘤侵襲、轉移能力密切相關[6-7]，本研究中SATB-1在胃癌組織中呈現出相似的特性。

表2 FOXJ1、SATB-1蛋白表達與胃癌臨床病理參數的相關性/例

綜上所述，FOXJ1及SATB-1蛋白參與胃癌的發生發展過程中，且與腫瘤分化、轉移等病理指標密切相關，可作為預測腫瘤惡性程度及轉移傾向的臨床指標。

[1] Sinicrope FA,Ruan SB,Cleary KR,et al.bcl-2 and p53 oncoprotein expression during colorectal tumorigenesis〔J〕.Cancer Res,1995,55(2):237-241.

[2] Phang CW,Karsani SA,Sethi G,et al.Flavokawain C inhibits cell cycle and promotes apoptosis,associated with endoplasmic reticulum stress and regulation of MAPKs and akt signaling pathways in HCT 116 human colon carcinoma cells〔J〕.Plos One,2016,11(2):e0148775.

[3] 王 靜.FOXJ1在胃癌惡性生物學表型中的作用和機制〔D〕.第四軍醫大學,2014.

[4] 劉秀鵬,趙素芳,胡晶晶,等.FOXJ1在胃癌組織中的表達及其與臨床病理特征和預后的相關性〔J〕.海南醫學,2016,27(2):192-194.

[5] 袁春鑾,孫志超,張 磊,等.SATB1陽性患者胃癌臨床病理特征分析及預后〔J〕.實用臨床醫藥雜志,2016,20(3):52-55.

[6] 胥 穎,董丹丹,李 科,等.核基質結合區結合蛋白質1在胃癌中的表達及其與臨床病理特征的關系〔J〕.實用醫院臨床雜志,2016,13(2):60-62.

[7] 劉淮東,高 超.SATB1、KISS1在胃腺癌組織芯片中的表達及其臨床意義〔J〕.臨床腫瘤學雜志,2016,21(1):52-56.