中孕期血清AFP和free β-HCG水平與子癇前期的相關性

陳益明，盧莎，何佩，顧琳媛，張艷珍，褚雪蓮，連結靜，張敏

（1.杭州市婦產科醫院 產前診斷中心，浙江 杭州 310008；2.杭州市婦產科醫院 產科，浙江 杭州310008；3.杭州市余杭區婦幼保健院 產前篩查中心，浙江 杭州 311100）

子癇前期是妊娠期特有的疾病，全球孕婦發病率為3%～8%，是妊娠期嚴重的并發癥之一，以妊娠20周后出現高血壓、蛋白尿為特征[1]。有研究表明中孕期孕婦血清AFP升高與子癇前期有關[2-3]。為了解中孕期血清AFP和游離人絨毛膜促性腺激素β亞基（free β subunit of human chorionic gonadotropin，free β-HCG）水平與后期發生子癇前期的相關性，本研究通過檢測91例子癇前期和同時期100例中孕期正常孕婦血清AFP和free β-HCG水平，并比較其濃度分布情況。

1 對象和方法

1.1 對象 2015年1月至2016年8月在杭州市婦產科醫院門診常規產前檢查并分娩的子癇前期孕婦91例為子癇前期組，根據后期發病程度[4]將其分為子癇前期組（n=55）和重度子癇前期組（n=36），同時期經隨訪確認正常分娩孕婦中隨機抽取100例作為對照組。診斷標準[5]：所有研究對象均無原發性高血壓及糖尿病等并發癥，無肝、腎疾病，均為單胎妊娠，并且各組年齡、孕期分布差異均無統計學意義（P＞0.05），但體質量差異有統計學意義（F=6.849，P=0.001），見表1。本研究經醫院倫理委員會審核批準，所有研究對象均在檢查前知情同意并簽字。

1.2 取材 參加產前篩查的孕婦均接受B超檢查和必要的產前檢查，妊娠15～20+6周在各定點醫院抽取空腹靜脈血2～3 mL，靜置30 min后，以2 500 r/min速度離心10 min并分離血清，保存于2～8 ℃冰箱，于1周內送檢。

表1 3組中孕期孕婦基礎指標比較（±s）

表1 3組中孕期孕婦基礎指標比較（±s）

組別 n 年齡（歲） 孕期（d） 體質量（kg）對照組 100 28.52±3.62 119.12±6.10 54.93± 7.33子癇前期組 55 29.90±4.52 117.56±4.72 59.06±10.92重度子癇前期組 36 30.60±3.00 117.39±3.99 60.44± 9.43 F 3.015 2.183 6.849 P 0.052 0.116 0.001

1.3 試劑和儀器 使用美國PerkinElmer公司的1235 Auto DELFIA自動時間分辨熒光免疫分析儀進行檢測，配套AFP和free β-HCG雙標試劑盒、增強液、洗液、質標品和標準品，均由杭州博圣生物技術有限公司配送，測定方法采用時間分辨熒光免疫法，檢測步驟按說明書進行。

1.4 AFP水平切割（cut off）值 子癇前期組、重度子癇前期組與對照組中孕期血清不同濃度AFP水平cut off值判斷標準為2.0[3]。

1.5 統計學處理方法 采用SPSS21.0統計軟件進行統計學處理。以中位數倍數（multiple of median，MoM）表示所測量的AFP和free β-HCG水平。計量資料進行正態性檢驗，正態分布數據采用±s表示，多組比較采用單因素方差分析；檢出率比較采用單向有序列聯表秩和檢驗，組內比較采用Kruskal-Wallis H檢驗，組間比較采用Mann-Whitney U檢驗。相關分析采用非條件logistic回歸分析，逐步分析采用Wald法進行。采用ROC曲線評價AFP和free β-HCG的篩查效能。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組血清AFP和free β-HCG表達水平 3組AFP表達水平比較差異有統計學意義（F=6.885，P＜0.001）。子癇前期組、重度子癇前期組AFP水平均高于對照組，差異均有統計學意義（F=9.578，P=0.001；F=15.448，P=0.014）；而子癇前期組和重度子癇前期組比較差異無統計學意義（F=0.179，P=0.685）。3組free β-HCG表達水平比較差異無統計學意義（F=2.930，P=0.056）。見表2。±s）

表2 3組血清AFP和free β-HCG表達水平（

2.2 子癇前期和重度子癇前期與AFP和free β-HCG的關系 經非條件logistic回歸分析，孕婦的血清AFP水平是子癇前期和重度子癇前期的危險因素（P＜0.05）。見表3。

2.3 子癇前期組、重度子癇前期組血清AFP和free β-HCG的效能分析 子前期組血清AFP（MoM）和free β-HCG（MoM）的AUC分別為0.649和0.589（95%CI：0.560～0.738，P=0.002），AFP（MoM）cut off值為2.0時，對應的靈敏度為10.90%，特異度為97.00%，見圖1；重度子癇前期組血清AFP（MoM）和free β-HCG（MoM）的AUC為0.720和0.574（95%CI：0.627～0.812，P＜0.001），AFP（MoM）cut off值為2.0時，對應的靈敏度為2.80%，特異度為97.00%，見圖2。

表3 子癇前期和重度子癇前期AFP和free β-HCG的非條件logistic回歸分析

圖1 中孕期血清AFP和free β-HCG診斷子癇前期ROC曲線

圖2 中孕期血清AFP和free β-HCG診斷重度子癇前期ROC曲線

3 討論

本研究結果顯示，子癇前期組、重度子癇前期組AFP水平高于對照組，差異有統計學意義，與文獻[6-7]報道一致。BREDAKI等[8]研究了單胎妊娠12周、22周和32周孕婦血清AFP水平和子癇前期關系，結果在發展成子癇前期的孕婦中，血清AFP的MoM值在孕11～13周及孕19～24周時上升，并非在孕30～34周，并且數值與分娩孕周呈負相關。在妊娠11～13周和孕19～24周進行孕婦因素和血清AFP聯合篩查的方式相比單純的孕婦基本因素能夠更好地預測子癇前期。

高水平的血清AFP、HCG與低水平的游離雌三醇作為預測早發型重度子癇前期患者的標志物，較晚發型重度子癇前期更為顯著[9]。本研究子癇前期組和重度子癇前期組之間AFP的MoM值差異均無統計學意義，子癇前期組與對照組的free β-HCG水平差異無統計學意義，而DAVIDSON等[10]研究發現與對照組比，先兆子癇組孕婦HCG水平顯著升高者，后來發展為先兆子癇增加24%。

本研究發現不同體質量孕婦及不同濃度AFP水平比較，差異無統計學意義。MORSSINK等[11]研究也表明，65例妊娠高血壓或先兆子癇中有2例（占3.1%）孕婦的血清AFP（MoM）≥2.5，在1 943例正常婦女中發現了27例（占1.4%），2組間差異無統計學意義；6例（占9.2%）孕婦的HCG≥2.5，而1 943例正常婦女中發現了89例（占4.6%）HCG≥2.5，2組間差異也無統計學意義，說明中孕期異常的血清AFP或HCG水平與孕婦后期出現高血壓疾病的風險增加之間沒有臨床意義。而本研究非條件logistic回歸分析結果顯示，孕婦的AFP、體質量和孕期是子癇前期、重度子癇前期的主要危險因素。經Wald法逐步分析后，結果為體質量和孕期為子癇前期、重度子癇前期的危險因素，但兩者的OR值均在0.896～1.090之間，對子癇前期、重度子癇前期實際影響有限，因此，只有AFP是子癇前期和重度子癇前期的主要危險因素，其OR值分別為4.369和6.316。

沒有哪種檢測方法預測子癇前期的敏感性和特異性均高于90%，BMI＞34 kg/m2、AFP、纖連蛋白和子宮動脈多普勒檢查特異性達到90%以上，也只有多普勒檢查的敏感度超過60%，而且由于研究的質量不同，大多數檢測表現不佳[12]。本研究子癇前期組中孕期血清AFP（MoM）cut off值為2.0時，對應的靈敏度為10.90%，特異度為97.00%，重度子癇前期組血清AFP（MoM）cut off值為2.0時，對應的靈敏度為2.80%，特異度為97.00%。WALLER等[13]研究也表明，高水平的血清AFP與早產、先兆子癇和胎盤異常密切相關，由于檢測靈敏度太低，AFP單獨篩查子癇前期價值有限，需要與其它敏感標志物聯合應用。

綜合上述，中孕期婦女血清高水平AFP是妊娠子癇前期的主要危險因素，可預測后期孕婦發生子癇前期可能，但其檢測靈敏度偏低，單獨篩查子癇前期價值有限，需要與其他敏感標志物聯合應用。

[1]孔紅芳, 常亞清, 王芳, 等. HtrA與子癇前期相關性的研究進展[J]. 國際婦產科學雜志, 2017, 44(1)： 56-59.

[2]SPAGGIARI E, RUAS M, DREUX S, et al. Management strategy in pregnancies with elevated second-trimester maternal serum alpha-fetoprotein based on a second assay[J].Am J Obstet Gynecol, 2013, 208(4): 303.e1-7.

[3]OLSEN RN, WOELKERS D, DUNSMOOR-SU R, et al.Abnormal second-trimester serum analytes are more predictive of preterm preeclampsia[J]. Am J Obstet Gynecol, 2012.207(3): 228.e1-7.

[4]中華醫學會婦產科學分會妊娠期高血壓疾病學組. 妊娠期高血壓疾病診治指南(2015)[J]. 中華婦產科雜志, 2015,50(10)： 721-728.

[5]謝幸, 茍文麗. 婦產科學[M]. 8版. 北京： 人民衛生出版社,2013： 64-70.

[6]DEHGHANI-FIROUZABADI R, TAYEBI N, GHASEMI N,et al. The association between second-trimester maternal serum alpha-fetoprotein in 14-22 weeks and adverse pregnancy outcome[J]. Acta Med Iran, 2010, 48(4): 234-238.

[7]TACHE V, BAER R J, CURRIER R J, et al. Population-based biomarker screening and the development of severe preeclampsia in California[J]. Am J Obstet Gynecol, 2014, 211(4): 377.e1-8.

[8]BREDAKI F E, MATALIOTAKIS M, WRIGHT A, et al.Maternal serum alpha-fetoprotein at 12, 22 and 32 weeks’gestation in screening for pre-eclampsia[J]. Ultrasound Obstet Gynecol, 2016, 47(4): 466-471.

[9]SHENHAV S, GEMER O, VOLODARSKY M, et al. Midtrimester triple test levels in women with severe preeclampsia and HELLP syndrome[J]. Acta Obstet Gynecol Scand, 2003,82(10): 912-915.

[10]DAVIDSON E J, RILEY S C, ROBERTS S A, et al. Maternal serum activin, inhibin, human chorionic gonadotrophin and alpha-fetoprotein as second trimester predictors of preeclampsia[J]. BJOG, 2003, 110(1): 46-52.

[11]MORSSINK L P, HERINGA M P, BEEKHUIS J R, et al.The association between hypertensive disorders of pregnancy and abnormal second-trimester maternal serum levels of HCG and alpha-fetoprotein[J]. Obstet Gynecol, 1997, 89(5):666-670.

[12]CNOSSEN J S,TER RIET G, MOL B W, et al. Are tests for predicting pre-eclampsia good enough to make screening viable? A review of reviews and critical appraisal[J]. Acta Obstet Gynecol Scand, 2009, 88(7): 758-765.

[13]WALLER D K, LUSTIG L S,CUNNINGHAM G C, et al.The association between maternal serum alpha-fetoprotein and preterm birth, small for gestational age infants, preeclampsia, and placental complications[J]. Obstet Gynecol,1996, 88(5): 816-822.