建立HPLC法測定鹽酸法舒地爾注射液的含量

索英梅

摘 要： 目的：采用HPLC測定鹽酸法舒地爾注射液的含量。方法：采用HPLC法，色譜柱：色譜柱：Diamonsil （鉆石） C18柱 250×4.6mm，5μ，流動相：磷酸鹽緩沖液-乙腈（體積比為900：100），檢測波長：275nm，流速：1.0ml/min，進樣量：20μl，柱溫：室溫 。結果：鹽酸法舒地爾濃度范圍在7.5μg/ml～90μg/ml，線性回歸方程為y = 372461x+162205，r = 0.9999，濃度與峰面積呈良好的線性相關；平均回收率為100.17%，RSD為1.26%，重復性100.31%，RSD（%）為0.68%。溶液穩定性8小時內穩定較好，RSD（%）為0.17%；結論：該HPLC測定鹽酸法舒地爾注射液的含量方法簡便，準確度高，能準確的測定其含量。

關鍵詞： 高效液相色譜法；鹽酸法舒地爾注射液；含量測定

鹽酸法舒地爾注射液是一種高效的血管擴張藥，臨床用于治療腦血管痙攣引發的蛛網膜下出血，目前鹽酸法舒地爾注射液的含量測定方法多數還是紫外分光光度法和和高氯酸滴定法測定[1-4]。由于HPLC法靈敏度高，能準確的測定含量，因此本文建立了HPLC測定鹽酸法舒地爾注射液的含量。

1儀器與試藥

1.1儀器

島津LC-10AT，紫外檢測器；色譜柱 Diamonsil （鉆石） C18柱 250×4.6mm，5μ；梅特勒—托利多MS205DU十萬分之一電子天平。

1.2試藥

鹽酸法舒地爾對照品：來源：中國食品藥品檢定研究院，批號：100614-201603 純度：99.9%。

參比制劑：山東魯抗醫藥集團魯亞有限公司規格1.0g 批號161102

供試品批號：170401、170102、170403

磷酸二氫鉀 廠家：北京化工廠 批號2017021

無水磷酸氫二鈉、廠家：天津市光復精細化工研究所 批號20160206

乙腈（色譜純） 廠家：Honey well 批號171A1H

2方法與結果

2.1色譜條件

色譜條件與系統適用性試驗 色譜柱：Diamonsil （鉆石） C18柱 250×4.6mm，5μ，流動相：磷酸鹽緩沖液-乙腈（體積比為900：100），檢測波長：275nm，流速：1.0ml/min，進樣量：20μl，柱溫：室溫 。

2.2測定法

取本品，加水制成每1ml中約含鹽酸法舒地爾30μg的溶液，作為供試品溶液，精密量取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取法舒地爾對照品適量，加水制成每1ml中約含鹽酸法舒地爾30μg的溶液，搖勻，作為對照品溶液，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得[5，6]。

2.3方法學驗證

2.3.1線性與范圍

取鹽酸法舒地爾對照品15.06mg至10ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為儲備液。分別量取儲備液0.25ml，0.5ml，1ml，2ml，3ml，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，制成濃度分別為7.5ug/ml、15ug/ml、30ug/ml、60ug/ml、90ug/ml的供試品溶液。精密量取上述供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線。

結果：在7.5μg/ml～90μg/ml范圍內，鹽酸法舒地爾的線性回歸方程為y = 372461x+162205，r = 0.9999。Y軸截距與100%響應值的比值為1.55%，小于2%，且響應因子的RSD為0.33%。濃度與峰面積呈良好的線性相關。

2.3.2回收率試驗

對照品貯備液的制備 精密稱取鹽酸法舒地爾對照品15.11mg，加水溶解并稀釋至100ml，制成含鹽酸法舒地爾150ug/ml的溶液.

供試品貯備液的制備 取鹽酸法舒地爾原料（批號：含量：99.9%）15.31mg，加水至50ml，制成300ug/ml的溶液，作為供試品溶液。

供試品溶液制備 精密量取三份供試品溶液2.5ml，置50ml量瓶中，分別加入對照品貯備液3.0ml、5.0ml、7.0ml，加水定容至刻度，搖勻，分別作為供試品溶液Ⅰ（80%）、Ⅱ（100%）、Ⅲ（120%）。照上述含量測定法，在275nm的波長出分別測定峰面積。計算鹽酸法舒地爾含量。結果表明：三份樣品的回收率分別為100.11%、99.46%、100.05%，平均回收率為99.87%，：RSD為0.65%，均符合準確度試驗要求。

2.3.3 重復性考察

精密配制供試品6份，照含量測定方法測定，計算其RSD值，測定結果分別為：100.93%、100.67%、100.67%、99.31%、99.74%、101.01%。平均含量為100.31%，RSD（%）為0.68%。試驗結果表明，本方法重復性良好。

2.3.4精密度考察

取鹽酸法舒地爾對照品適量，加水制成每1ml含0.03mg溶液做為供試品溶液，連續進樣5次，記錄峰面積，結果：平均峰面積為2347.334，RSD為：0.23%本方法精密度良好。

2.3.5溶液穩定性試驗

取本品，照含量測定法加水制成每1ml中約含鹽酸法舒地爾30μg的溶液，于室溫（25℃）下放置，分別于0、2 、4 、6 、8小時后取樣，精密量取20ul注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結果8小時內的平均含量為99.59%，RSD為0.17%。結果表明供試品溶液在8小時較穩定，無需現配現制。

2.3.6供試品含量測定

精密量取三批供試品及參比制劑按照上述含量測定方法測定其含量。三批供試品含量分別是100.69%，99.99%，100.71%，參比制劑含量為101.38%。三批供試品及被仿制品含量均不少于90.0% 。

3結論

本文建立了HPLC法測定鹽酸法舒地爾的含量，并對其建立的方法進行方法學驗證，主要包括線性，重復性、準確度、精密度、溶液穩定性試驗等方面進行驗證。結果通過對三批供試品和參比制劑的檢驗，結果表明該方法能有效的測定鹽酸法舒地爾注射液的含量。

參考文獻

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