6%阿維·噻唑磷微囊懸浮劑高效液相色譜分析

陳玲玲，仲蘇林，吳建蘭，胥亞云，曹新梅，高梟穎

（聯(lián)合國(guó)南通農(nóng)藥劑型開(kāi)發(fā)中心，江蘇南通 226006）

阿維菌素（abamectin）由日本北里大學(xué)和美國(guó)Merck公司首先開(kāi)發(fā)，是廣泛使用的一類具有殺菌、殺蟲(chóng)、殺螨、殺線蟲(chóng)活性的十六元大環(huán)內(nèi)酯化合物[1]。噻唑磷（fosthiazate）為有機(jī)磷類殺蟲(chóng)、殺線蟲(chóng)劑，由日本石原產(chǎn)業(yè)研制。其主要通過(guò)抑制害蟲(chóng)乙酰膽堿酯酶的合成而起效，可用于防治各類根結(jié)線蟲(chóng)、蚜蟲(chóng)等[2]。聯(lián)合國(guó)南通農(nóng)藥劑型開(kāi)發(fā)中心將2種殺蟲(chóng)劑進(jìn)行復(fù)配，擴(kuò)大了兩者殺蟲(chóng)譜，使得2種藥劑相互補(bǔ)充，藥效明顯，且延緩了抗藥性的產(chǎn)生[3]。目前阿維菌素、噻唑磷單劑及其與其它藥劑復(fù)配制劑的檢測(cè)方法已有報(bào)道[2,4]，而利用高效液相色譜同柱測(cè)定兩者復(fù)配微囊懸浮劑的分析方法未見(jiàn)報(bào)道。本文采用反相高效液相色譜法，同時(shí)分離測(cè)定阿維菌素和噻唑磷。該方法操作簡(jiǎn)便、快捷，準(zhǔn)確度和精密度良好，適用于農(nóng)藥制劑分析。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器

安捷倫高效液相色譜儀（1200），帶二極管陣列檢測(cè)器（DAD）、在線脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、四元梯度泵及安捷倫化學(xué)工作站。

1.2 試劑

水，新蒸2次蒸餾水；甲醇、乙腈（色譜純）；阿維菌素標(biāo)樣（98.9%）、噻唑磷標(biāo)樣（98.6%），上海市農(nóng)藥研究所；6%阿維·噻唑磷微囊懸浮劑（1%阿維菌素＋5%噻唑磷），聯(lián)合國(guó)南通農(nóng)藥劑型開(kāi)發(fā)中心制。

1.3 色譜條件

色譜柱：Agilent Eclipse XDB C18不銹鋼柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈＋甲醇＋水。梯度洗脫：0～5 min，乙腈、甲醇、水三者體積比35∶25∶40；6～20 min，乙腈、甲醇、水三者體積比60∶25∶15；21～24 min，乙腈、甲醇、水三者體積比35∶25∶40。柱溫：室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)：245 nm；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：5 μL。在上述操作條件下，噻唑磷保留時(shí)間約為3.7 min，阿維菌素B1b保留時(shí)間約為13.5 min，B1a約為15.5 min。標(biāo)樣以及試樣典型高效液相色譜圖如圖1、圖2。

圖1 噻唑磷和阿維菌素標(biāo)樣色譜圖

圖2 6%阿維·噻唑磷微囊懸浮劑色譜圖

1.4 操作步驟

1.4.1 溶液配制

分別稱取噻唑磷標(biāo)樣0.3 g、阿維菌素標(biāo)樣0.06 g（均精確至0.000 2 g），置于50 mL容量瓶中，用甲醇超聲溶解，冷卻至室溫后用甲醇定容至刻度，即制得標(biāo)樣混合溶液。

稱取試樣約1.2 g（精確至0.000 2 g），置于50 mL容量瓶中，用甲醇超聲溶解15 min，冷卻至室溫后用甲醇定容至刻度，搖勻，過(guò)濾，即得到試樣溶液。

1.4.2 測(cè)定

在上述色譜操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入3針試樣溶液。將測(cè)得的3針試樣溶液峰面積平均值分別代入噻唑磷和阿維菌素線性回歸方程，分別計(jì)算樣品中噻唑磷和阿維菌素（B1a＋B1b）有效成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

對(duì)噻唑磷和阿維菌素標(biāo)樣溶液分別進(jìn)行紫外掃描，得到兩者紫外吸收光譜圖（圖3、圖4）。從圖中可以看出，噻唑磷在225 nm有較好吸收，阿維菌素在245 nm有較好吸收。因樣品中阿維菌素含量較低，考慮使兩者有效成分峰面積接近，故而選擇245 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

圖3 噻唑磷光譜圖

圖4 阿維菌素光譜圖

2.2 流動(dòng)相的選擇

阿維菌素的液相分析中，流動(dòng)相需用到乙腈[4]，在Agilent Eclipse XDB C18色譜柱上采用乙腈-甲醇-水體系作流動(dòng)相。以阿維菌素的流動(dòng)相進(jìn)行研究，存在溶劑峰干擾樣品峰的問(wèn)題，因此采用梯度洗脫（0～5 min，乙腈、甲醇、水體積比35∶25∶40；6～20 min，乙腈、甲醇、水體積比60∶25∶15；21～24 min，初始流動(dòng)相）。在此梯度條件下，色譜峰保留時(shí)間合適，有效成分完全分離，峰形對(duì)稱。

2.3 方法的線性相關(guān)性測(cè)定

用移液管分別移取1.4.1中標(biāo)樣溶液1.0,2.0,5.0,8.0,10.0 mL于5個(gè)25 mL容量瓶中，配制一系列噻唑磷和阿維菌素不同質(zhì)量濃度的混合標(biāo)樣溶液。在上述色譜條件下，測(cè)其相應(yīng)的峰面積值。以噻唑磷、阿維菌素的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，其峰面積為縱坐標(biāo)，分別繪制線性關(guān)系曲線，見(jiàn)圖5、圖6。線性回歸方程分別為y噻唑磷=921.17 x-13.224，y阿維菌素=8 283 x-7.442 2，相關(guān)系數(shù)分別為R2噻唑磷=0.999 5，R2阿維菌素=0.999 6。

圖5 噻唑磷線性關(guān)系圖

圖6 阿維菌素線性關(guān)系圖

2.4 方法精密度實(shí)驗(yàn)

對(duì)同一6%阿維·噻唑磷微囊懸浮劑樣品平行測(cè)定5次，測(cè)得噻唑磷和阿維菌素的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為5.02%和1.00%，標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.027和0.009，變異系數(shù)分別為0.54%和0.89%（表1）。從測(cè)定結(jié)果可以看出該方法具有較好的精密度。

表1 方法的精密度實(shí)驗(yàn)

2.5 方法準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)

稱取5個(gè)已知噻唑磷質(zhì)量分?jǐn)?shù)5.02%，阿維菌素質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.00%的試樣，分別用移液管準(zhǔn)確加入1.4.1中的混合標(biāo)樣溶液1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL，進(jìn)行添加回收率測(cè)定。測(cè)得噻唑磷的回收率為98.93%～100.61%，平均回收率為99.67%；阿維菌素的回收率為97.98%～100.41%，平均回收率為99.32%（表2）。

表2 方法準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法操作簡(jiǎn)便，能夠同時(shí)測(cè)定6%阿維·噻唑磷微囊懸浮劑中2種有效成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，擁有較好的精密度和較高的準(zhǔn)確度，可用于該復(fù)配制劑的質(zhì)量檢測(cè)。

[1]張敏恒.新型高效廣譜殺蟲(chóng)殺螨劑阿維菌素[J].農(nóng)藥,1998,37(3)：36-37.

[2]潘靜,徐妍,馬超,等.12%噻蟲(chóng)嗪·噻唑磷顆粒劑的高效液相色譜分析[J].現(xiàn)代農(nóng)藥,2017,16(1)：38-40.

[3]王戰(zhàn)清,謝瑞英,趙彥超,等.阿維菌素·噻唑磷殺蟲(chóng)劑組合物：ZL,201110127559.7[P].2011-12-07.

[4]梅寶貴,李秀杰.阿維菌素的液相色譜分析[J].化工標(biāo)準(zhǔn)、計(jì)量、質(zhì)量,2002(4)：35-36.