忍冬藤配方顆粒的制備工藝研究

余德發(fā) 于肖輝

（1江西康恩貝中藥有限公司 弋陽334400；2江西天施康中藥股份有限公司 鷹潭335000）

忍冬藤來源于忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥莖枝，具有清熱解毒、疏風(fēng)通絡(luò)之功效，主要用于溫病發(fā)熱、熱毒血痢、癰腫瘡瘍、風(fēng)濕熱痹、關(guān)節(jié)紅腫熱痛等病癥[1]，臨床證實它對風(fēng)濕、肝病也有一定效果[2～3]。隨著現(xiàn)代社會生活節(jié)奏的加快，傳統(tǒng)中藥湯劑已不能完全滿足大眾需求，而中藥配方顆粒在對部分病癥的治療中備受青睞。本研究在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，依據(jù)《中藥配方顆粒管理暫行規(guī)定》和《中藥飲片質(zhì)量標準通則（試行）》的要求，對忍冬藤配方顆粒的制備工藝進行了探討，以期為該品種配方顆粒的開發(fā)與應(yīng)用提供參考。現(xiàn)報道如下：

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent1200高效液相色譜儀（安捷倫科技有限公司）、202-OAB型電熱恒溫干燥箱（天津泰斯儀器有限公司）、DHG-9101-39A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海三發(fā)科學(xué)儀器有限公司）、DZF-6020型真空干燥箱（上海一恒科技有限公司）、HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州國華電器有限公司）、KQ3200DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）、AB265-S分析天平（METTLER TOLEDO）、SENCO旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海申生科技有限公司）、SHB-B95型循環(huán)式多用真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）、YF-118粉碎機（浙江永歷藥機有限公司）、TCS-300ACS電子秤及電子臺秤（浙江凱豐集團有限公司）。

1.2 試藥 綠原酸對照品（批號：110753-201314，純度96.6%）、馬錢苷對照品（批號：111640-201005，純度99.2%）均由中國藥品生物制品檢定所提供；忍冬藤飲片（批號：YP-RDT150701）由江西天施康中藥股份有限公司科技開發(fā)部提供。甲醇為色譜純，水為高純水，其他試劑均為分析純。

2 方法

2.1 水提正交試驗 參考傳統(tǒng)中藥煎煮的特點，以忍冬藤提取的主要因素：加水倍數(shù)（A）、提取時間（B）和提取次數(shù)（C），設(shè)計正交試驗，以得膏率、綠原酸及馬錢苷含量轉(zhuǎn)移率為考察指標，采用L9（34）正交試驗表優(yōu)選水煎提取忍冬藤的最佳提取工藝參數(shù)。

2.1.1 忍冬藤提取的因素水平 忍冬藤提取的主要因素有加水倍數(shù)、提取時間和提取次數(shù)。見表1。

表1 正交試驗因素水平表

2.1.2 正交試驗安排表 按上述因素水平表，采用L9（34）正交表，稱取50 g忍冬藤飲片共9份，安排正交試驗。精密量取25 ml藥液置于已恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，再置于60℃真空干燥箱中干燥至恒重，稱重，計算得膏率；將蒸發(fā)皿中干浸膏研細加50%甲醇溶解至25 ml容量瓶中定容，超聲30 min，放冷，加50%甲醇至刻度，搖勻，過濾，分別參照文獻[1]中的方法測定浸膏中綠原酸、馬錢苷的含量，并計算綠原酸、馬錢苷的轉(zhuǎn)移率，以綠原酸、馬錢苷轉(zhuǎn)移率和出膏率為考察指標篩選最佳提取工藝。分析結(jié)果：以得膏率計算，三因素的影響大小依次為C＞A＞B；以綠原酸轉(zhuǎn)移率、馬錢苷轉(zhuǎn)移率計算，影響大小均依次為C＞A＞B。綜合評分計算，三因素的影響大小依次為C＞A＞B。從省時、耗能及生產(chǎn)實際出發(fā)，并保障提取充分有效的前提下，綜合分析各因素對得膏率、綠原酸及馬錢苷轉(zhuǎn)移率的影響，擬定最佳工藝為C2B1A2，即水煎煮2次，每次30 min，第1次加10倍藥材量水、第2次加8倍藥材量水。見表2～ 表 6。

表2 正交試驗安排表

表3 綜合評分方差分析

表4 得膏率方差分析

表5 綠原酸轉(zhuǎn)移率方差分析

2.2 三批提取工藝驗證試驗 為進一步驗證所選條件的正確性與科學(xué)性，對所選最佳提取工藝進行驗證性試驗，以增加試驗可信度。取3份忍冬藤飲片，每份500 g，按照最佳工藝進行提取。結(jié)果，采用所選最佳工藝條件所得得膏率，綠原酸、馬錢苷轉(zhuǎn)移率相對穩(wěn)定，因此確定提取條件為：水煎煮2次，每次30 min，第1次加10倍藥材量水、第2次加8倍藥材量水。驗證性試驗所得干浸膏粉，按1∶0.25的比例加入糊精，以85%乙醇作為潤濕劑，制粒、烘干得成品。見表7。

表7 三批驗證試驗結(jié)果

表6 馬錢苷轉(zhuǎn)移率方差分析

2.3 減壓濃縮工藝考察 取忍冬藤飲片1 000 g，用選出的最優(yōu)提取工藝進行提取，得藥液約13 860 ml，取4份藥液，每份3 000 ml，按表8的參數(shù)進行濃縮，忍冬藤提取液在60℃與80℃條件下減壓濃縮，綠原酸、馬錢苷含量差異不大。因此，結(jié)合生產(chǎn)實際，選擇濃縮工藝為：80℃，真空度-0.08 MPa濃縮至相對密度為1.10（50℃測定）。見表8。

表8 減壓濃縮工藝考察結(jié)果

2.4 干燥工藝考察 根據(jù)忍冬藤主要有效成分綠原酸、馬錢苷理化性質(zhì)，選擇減壓干燥作為忍冬藤稠膏的干燥工藝，并考察干燥溫度、真空度對綠原酸、馬錢苷含量的影響，并及時測定干膏水分。取藥材適量，準確稱取，按照濃縮工藝考察項下80℃減壓濃縮制得浸膏，取4份，每份50 g，按表9所設(shè)定條件進行干燥工藝考察，測定水分及綠原酸、馬錢苷含量。結(jié)果忍冬藤稠膏中綠原酸、馬錢苷含量在60℃和80℃條件下減壓干燥均差異不大，結(jié)合生產(chǎn)實際情況，選擇干燥工藝為：80℃，真空度-0.08 MPa。見表9。

表9 干燥工藝考察結(jié)果

2.5 制粒工藝研究 以顆粒劑常用糊精作為忍冬藤配方顆粒制粒輔料，以一定濃度乙醇溶液作為潤濕劑，考察忍冬藤干膏與糊精在不同比例下，以及不同濃度乙醇溶液對制粒效果的影響。將上述試驗忍冬藤飲片提取濃縮干燥所得的干膏打粉，取該干膏粉240 g，平均分成6份，按表10加入適量糊精，以不同濃度乙醇作為潤濕劑，以18目藥典篩進行制粒，并在80℃循環(huán)風(fēng)烘箱中烘干，測定制粒過程中軟材性質(zhì)，顆粒成型性和顆粒的溶化性。結(jié)果忍冬藤干膏∶糊精比例為1∶（0.25～1.5），乙醇濃度為85%時，顆粒的成型性，溶化性均較好，因此確定忍冬藤配方顆粒的制備工藝為：取6 000 g忍冬藤藥材，加水，煎煮2次，第1次加10倍藥材量水、第2次加8倍藥材量水，每次30 min，在80℃，-0.06 MPa真空度下濃縮至一定濃度時，置于80℃，真空度-0.08 MPa下減壓干燥后，加適量糊精，以85%的乙醇為黏合劑制得1 000 g忍冬藤配方顆粒，即每克顆粒相當于原藥材6 g。見表10。

表10 輔料加入量考察

3 討論

試驗中對優(yōu)選后的工藝進行了三批中試工藝驗證研究，每批中試分別取忍冬藤18 kg，按確定的工藝條件進行，進行中試的忍冬藤經(jīng)按中國藥典2015年版標準方法進行測定，其綠原酸和馬錢苷含量分別為0.118%和0.171%。結(jié)果三批中試加入糊精量分別為1 450 g、1 530 g和1 580 g，成品率分別為95.7%、94.7%和95.3%，忍冬藤中的綠原酸轉(zhuǎn)移率分別為17.62%、17.72%、17.24%，馬錢苷轉(zhuǎn)移率分別為65.59%、65.48%、64.26%，表明本工藝穩(wěn)定可靠。

中醫(yī)藥是我國重要的衛(wèi)生資源，近年來隨著國家一系列促進中醫(yī)藥發(fā)展政策的出臺、人們生活水平提高和對健康養(yǎng)生意識的增強，中醫(yī)藥備受國內(nèi)外人士的青睞，而傳統(tǒng)的中藥湯劑已不能完全滿足大眾需求。近年來，有學(xué)者對中藥配方顆粒的臨床應(yīng)用進行了對比研究，結(jié)果顯示中藥配方顆粒與傳統(tǒng)湯劑對比，臨床療效無明顯差異。成海燕[4]采用中藥配方顆粒與傳統(tǒng)中藥湯劑各治療40例急慢性缺血性腦血管病患者，結(jié)果顯示中藥配方顆粒的總有效率為95%，傳統(tǒng)中藥湯劑總有效率為85%。黃琪等[5]對比四物湯傳統(tǒng)湯劑與配方顆粒治療血虛證的臨床療效，結(jié)果顯示兩者臨床療效相當。嚴威忠等[6]比較了獨活寄生湯傳統(tǒng)飲片湯劑和以配方顆粒組成的獨活寄生湯治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎87例的療效，結(jié)果顯示，二者臨床療效相近，配方顆?？傆行?7.27%，傳統(tǒng)湯劑總有效率79.07%。郭東亮等[7]比較了中藥配方顆粒與傳統(tǒng)中藥飲片湯劑治療胃潰瘍的臨床療效，結(jié)果表明中藥配方顆粒具有更加顯著的近期療效。張敏麗[8]研究表明中藥配方顆粒劑與飲片煎劑治療風(fēng)咳的臨床療效無顯著差異，且較飲片煎劑不良反應(yīng)發(fā)生率更低。中藥配方顆粒具有調(diào)配儲存方便、質(zhì)量可控、劑量精準和生產(chǎn)規(guī)范等優(yōu)點。然而，中藥配方顆粒制劑非傳統(tǒng)工藝方法，它的臨床療效仍需經(jīng)過長時間臨床應(yīng)用的驗證。中藥配方顆粒的制備工藝也要根據(jù)臨床驗證進行相關(guān)完善和修訂。