中藥在創面愈合中促創面生長因子表達的研究進展※

張文愷許 超姜 獻周紅云范 鑫涂冬鵬

（1 浙江中醫藥大學第二臨床醫學院，浙江 杭州 310053；2 浙江中醫藥大學附屬第二醫院骨傷科，浙江 杭州 310005）

作為人體正常的生物過程，創面愈合是通過止血、炎癥、增殖和重塑四個精確和高度程序化的階段實現的，其中四個階段必須以正確的順序和時間框架進行[1]。任何一個階段受到影響，創面愈合都將會受到干擾[2]。當創面愈合的階段發生干擾時，新血管的生成將會有助于許多惡性、缺血性、傳染性和免疫性疾病的發生[3]。創面愈合的關鍵階段需要傷口基部肉芽組織的新血管的生成，其中可溶性生長因子以及細胞-細胞和細胞-基質相互作用都在激活內皮細胞開始血管生成中發揮作用。隨后活化的內皮細胞、血小板、單核細胞和成纖維細胞釋放必要的血管生成生長因子，如血管內皮生成因子 （vascular endothelial growth factor，VEGF)，轉化生長因子 (transforming growth factor-beta，TGF-β)，允許內皮細胞通過細胞外基質侵入和遷移，增殖并形成新的未成樹小管[4]。通過近年來研究發現中藥促創面愈合的作用機制跟其能促進相關生長因子的分泌有關，故針對近幾年來中藥促進創面愈合的臨床及實驗研究內容展開綜述。

1 血管內皮生長因子 (VEGF)

在創面愈合的早期，VEGF不僅促進血管內皮細胞及血管外膜成纖維細胞增殖，并且還能調節血管通透性，使血管內皮細胞加速遷移，因而能促進創面新血管的生成，為創面提供營養物質，加快創面的愈合[5-6]。

于興兵等[7]為觀察地龍提取液對于糖尿病足的臨床療效，將符合標準的92例患者隨機分成治療組和對照組，發現使用地龍提取液的治療組創面愈合時間快于對照組，治療組患者血清VEGF的含量在治療第7 d起高于對照組，提出地龍提取液加速創面愈合可能跟提升VEGF的水平有關。李善華等[8]為探究玫及乳膏對大鼠Ⅲ期壓瘡潰瘍面新生肉芽組織中VEGF的影響及作用機制，將120只大鼠隨機選中80只，將選中的80只大鼠造模后分為模型組（外敷生理鹽水紗布組）和實驗組（玫及乳膏治療組），另外40只為對照組，并于治療的第1，3，7，14 d取新生肉芽組織檢測TGF-β1的含量，統計創面愈合時間及愈合率，結果顯示第14 d實驗組VEGF含量最高，實驗組與模型組在第7 d和14 d中VEGTGF-β1含量的差異有統計學意義，得出玫及乳膏能促進大鼠Ⅲ期壓瘡潰瘍面新生肉芽組織中VEGF的表達，提高創面修復速度及愈合率。張振等[9]將SD大鼠造模后隨機分3組，在造模后第1，3，7，10和14 d分析創面愈合率以及血管內皮生長因子的表達情況。發現傷后第3天（實驗組）創面外敷五谷蟲0.3 g組和（陽性對照組）創面外敷京萬紅軟膏0.3 g組中VEGF的表達高于（陰性對照組）每個創面外敷凡士林0.3 g組，且實驗組的表達高于陽性對照組，得出五谷蟲能促進大鼠背部急性創面愈合及上調創面血管內皮生長因子的表達。孫傳秀等[10]將32只新西蘭兔造模后隨機分成4組，其中（D組）骨髓基質干細胞（BMSCs）移植聯合中藥治療組潰瘍創面愈合迅速，且創面組織中VEGFmRNA和蛋白較其它組顯著增加，得出BMSCs移植配合中藥治療創面愈合的機制可能跟上調VEGF的表達有關。

2 轉化生長因子 （TGF-β）

TGF-β是調節各種細胞類型的增殖，分化和死亡的分泌蛋白，是一種有效的免疫抑制劑，并且TGF-β信號傳導的干擾與自身免疫，炎癥，和癌細胞有關。現已發現TGF-βs至少有6種亞型，且基本上都分布于所有的組織和器官[11]。在創面愈合過程中TGF-β為重要的調控因子，能夠引發炎癥反應，調節細胞外基質的生成及促進肉芽組織形成等[12]。如TGF-β作用于皮膚損傷處的成纖維細胞，促使其合成膠原蛋白、蛋白多糖等，并且抑制細胞外基質降解酶的產生，促進該酶降解物的分泌，從而增強細胞與基質的結合，促使創面局部纖維化及創面皮膚張力增加，進而促進創面的愈合[13]。由此可知TGF-β的表達對于創面愈合有著積極的作用。

成纖維細胞為創面肉芽組織中最主要的細胞之一，在整個創面愈合過程中有著重要的作用，其中TGF-β1對成纖維細胞有明確的靶向分化作用。ZHANG QI[14]等使用黃芪與生地黃質量比為2∶1的水煎提取物-NF3水煎劑作用于人成纖維細胞，與空白組相比，NF3水煎劑能促進人成纖維細胞的遷移與增殖，運用PCR技術發現TGF/Smad通路中一些基因改變，Western-blot檢測結果表明NF3水煎劑能上調TGF-β的表達，推測NF3促進成纖維細胞的增殖，其作用機制可能以上調TGF-β的表達來發揮作用。黃志官等[15]將大鼠造模后隨機分為3組，傷后第3天起給模型人參組使用人參煎劑灌胃，安靜組灌等量生理鹽水，健康對照組不給予任何對比處理，持續14 d常規觀察創面愈合情況，并在傷后第10天，17天斷尾取血檢測IL-1β，TNF-α，TGF-β1的含量，發現傷后第10天，17天人參組中IL-1β，TNF-α水平低于模型安靜組，人參組傷后第10天血清中TGF-β1明顯高于模型安靜組，且人參組創面愈合時間加快，得出人參對創面愈合的積極作用，可能跟改善創面炎癥免疫反應及TGF-β1、IL-1β等的相關通路表達有關。朱孟國等[16]運用自擬骨愈方聯合急診手術觀察跟骨SandersⅡ～Ⅲ型閉合骨折HIF-1α和VEGF表達的影響，發現觀察組手術時間，手術出血量及傷口愈合時間均少于對照組，且觀察組患者血清中TGF-β的含量顯著高于對照組，得出自擬骨愈方聯合急診手術治療可降低跟骨SandersⅡ-Ⅲ型閉合骨折的術后并發癥，加快創面愈合并促進骨折愈合。

3 成纖維細胞生長因子 (FGF)

20世紀30年代，成纖維細胞生長因子 (FGF)作為一種活性物質被發現，認為是由下丘腦，垂體分泌的多肽，目前發現24種不同種類的FGF，且存在于多種生物組織和器官中，其對消化系統、骨骼系統和皮膚軟組織具有多種功能，FGF主要包括酸性FGF(aFGF)和堿性FGF(bFGF)兩大類，現研究發現FGF是促進局部病灶形成的促進因子[17]，ZHANG X等[18]在OSM增強血管及改善心肌梗死后心功能的研究中提出bFGF通過促進微血管形成，影響細胞的增殖分化，改善創面供血等進而促進創面愈合。

郭光麗等[19]為探究紫歸解毒膏對大鼠創面修復作用的機理，將大鼠造模后隨機分3組，結果發現紫歸解毒膏組大鼠在傷后3 d，7 d中bFGF的表達高于馬應龍組和空白組，且創面愈合時3組中bFGF的含量均無差異，說明傷后的3 d，7 d中，紫歸解毒膏組上調了bFGF的表達，提出紫歸解毒膏促進創面愈合的機理可能跟促進組織修復細胞的增殖，上調肉芽組織中生長因子的表達有關。石慧青等[20]為闡明生肌象皮膏促進糖尿病大鼠潰瘍愈合的作用機制，將大鼠造模后，取第1，3，7，14，21 d創面肉芽組織檢測bFGF的表達，發現生肌象皮膏組與糖尿病凡士林組、糖尿病生理鹽水組比較，生肌象皮膏組明顯上調了創面肉芽組織中bFGF的表達。何利雷等[21]將大鼠造模后隨機分成3組，各組大鼠均在第3，7，14天取部分創面及少許周圍的正常皮膚，檢測其創面肉芽組織中bFGF的表達，發現3 d，7 d，14 d中健脾益氣組、活血化瘀組與模型組相比，其大鼠創面組織中bFGF含量均明顯增強，在3 d，7 d時健脾益氣組中bFGF的表達高于活血化瘀組，但在第14天2組bFGF含量無明顯差異，說明健脾益氣法對于創面損傷嚴重的軟組織，能增強其創面組織中bFGF的表達。呂長遙等[22]為揭示六合丹對家兔皮膚感染創面愈合過程中SP MMP-1及bFGF表達的影響，將大鼠造模后分成5組，從造模第1天起開始換藥，結果發現六合丹組的bFGF在換藥后3 d，7 d和14 d的表達均強于紫草油組和模型組。

4 表皮生長因子 （EGF）

表皮生長因子（EGF）是一種多功能的生長因子。對多種組織細胞都能誘導其生長、遷移，促使分化基因表達等作用。其缺乏或過度表達，則會破壞組織細胞增殖凋亡的動態平衡，導致疾病的發生。EGF在創面愈合過程中，對外胚層和內胚層來源的一些組織有促分裂和刺激合成代謝的作用，因而能提高創面愈合速率。EGF不僅能產生趨化信號促進創面修復，還是VEGF和FGF的有絲分裂原，同時能促基質內纖維蛋白，膠原蛋白，彈性蛋白等的合成，從而提高創面愈合速率[23]。

潘建西等[24]為探索中藥外用制劑促進創面愈合的機制，將50只大鼠造模后隨機分成5組，治療第7天發現高劑量生膚靈組中大鼠創面肉芽組織中EGF的含量明顯高于模型組，低劑量生膚靈組中大鼠創面肉芽組織中EGF的含量也明顯升高，且肉芽組織生長旺盛，得出生膚靈能夠刺激創面細胞產生表皮生長因子進而促進創面愈合。高恒清等[25]為探討中藥復發硝苦湯促進創面愈合和抑制創面過度瘢痕化的機理，將造模后的16只兔的64個創面隨機分為4組，治療后檢測結果顯示硝苦湯組創面的平均毛細血管數量較其他組均較高，且肉芽組織中EGF蛋白表達均高于其他組，得出中藥復發硝苦湯能夠促進兔背部人糞污染手術創面的愈合，并且其促進創面愈合的機理可能與上調EGF的表達有關。何德才等[26]探討外用中藥復方芪竭膏對大鼠創面愈合作用的機理，將造模后大鼠隨機分3組，結果顯示復方芪竭膏組創面愈合率明顯高于其他2組，其作用機制可能為上調EGF的表達來提高膠原蛋白的含量以促進創面愈合。

5 問題與展望

雖然近年來中藥在促進創面愈合中對促創面生長因子表達影響的研究取得了一些進展，但其研究思路和實驗方案的設計大部分都相同，沒有創新型的方案，所獲得的實驗數據大部分都有相似的結果，現對于更深入的實驗研究仍未被提出，所以其研究結果仍然止步于表面的研究。

中醫學對于創面愈合的治療效果顯著，為進一步推廣中醫藥的發展，為人民衛生健康事業做貢獻，對于今后的研究筆者認為應從以下幾個方面著手，第一：可以進行單味藥的實驗，篩選其最有促進作用的中藥，并聯合單味中藥進行不同的配伍，觀察其不同配伍條件下所產生的作用。第二：可以通過篩選出最有效的單味中藥中的有效成分，針對其中的一些有效成分進行實驗，篩選出對于創面愈合最有效的中藥有效成分，同時也可以做中藥不同有效成分組合治療創面愈合的研究。第三：對于已知能促進促愈因子分泌的方劑，應確定其主要以促進哪類因子分泌為主。