胃息肉中TGF-β1、Smad 3的表達(dá)及其與胃息肉癌變之間的相關(guān)性

師艾麗，李菲，陳啟龍，安俊平，宋蘇華

（1.徐州市腫瘤醫(yī)院消化科，江蘇 徐州 221005；2.徐州市腫瘤醫(yī)院病理科，江蘇 徐州 221005）

胃息肉是從胃黏膜表面突起延伸向胃腔的隆起性病變，多數(shù)在內(nèi)鏡檢查時(shí)偶然發(fā)現(xiàn)[1]。胃息肉可分為腫瘤性息肉和非腫瘤性息肉。目前認(rèn)為腺瘤性息肉與胃癌發(fā)生有密切關(guān)系。有報(bào)道稱，腺瘤性息肉的癌變率大約為15.69%～41.00%[2-3]。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β是一種對(duì)多種細(xì)胞具有刺激或抑制作用的多功能多肽類細(xì)胞因子，幾乎體內(nèi)的所有細(xì)胞都能產(chǎn)生TGF-β1。在胃癌組織中，TGF-β1及其受體的異常表達(dá)在促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展過(guò)程中發(fā)揮著重要作用[4]，但TGF-β1及其通路在胃息肉中的表達(dá)及其在胃息肉癌變中的作用研究甚少。現(xiàn)對(duì)本院2012年1月～2014年11月行胃鏡下息肉EMR摘除治療的胃息肉、胃癌及慢性胃炎患者行TGF-β1及Smad 3的表達(dá)監(jiān)測(cè)，以期為胃息肉癌變預(yù)測(cè)及早期胃癌的臨床診斷提供新的特異性的生物學(xué)標(biāo)志物，進(jìn)而為胃息肉的臨床處理策略提供選擇依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇本院2012年1月～2014年11月住院行胃息肉EMR切除的患者30例，其中男13例，女17例，平均年齡（53.3±11.7）歲，胃惡性腫瘤30例，其中男19例，女11例，平均年齡（64.6±9.4）歲，慢性胃炎20例，其中男12例，女8例，平均年齡（58.3±4.7）歲，對(duì)鏡下所發(fā)現(xiàn)的病變仔細(xì)觀察并記錄其形態(tài)及大型，采集每位患者的相關(guān)臨床資料，研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)同意，受試者均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化法檢測(cè)TGF-β1、Smad 3：采用免疫組化SP法。TGF-β1、Smad 3免疫組織化學(xué)檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自北京中杉生物公司。采用1∶100濃度稀釋。SP試劑盒，DAB購(gòu)自北京中杉生物公司。免疫組化操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。以PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。

1.2.2 免疫組化結(jié)果判定：TGF-β1蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)中，呈棕黃色。Smad 3蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞的胞質(zhì)和胞核中，亦呈棕黃色。染色結(jié)果按二級(jí)定位法判定，結(jié)果判定有兩位病理科醫(yī)師雙盲獨(dú)立完成。陽(yáng)性染色細(xì)胞百分率評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為：＜20%為0分，21%～40%為1分，41%～60%為2分，61%～80%為3分，＞81%為4分。染色強(qiáng)度評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為：無(wú)著色或淡黃色為0分，淺棕黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分，兩項(xiàng)分?jǐn)?shù)相加進(jìn)行最終計(jì)分判定，＜2分為（-），2～3分為（+），4～5分為（++），6～7分為（+++）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，數(shù)值以“”差表示。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 TGF-β1、Smad 3的表達(dá)與胃息肉腫瘤進(jìn)展的關(guān)系TGF-β1在胃癌中高表達(dá)，在胃息肉及慢性胃炎中低表達(dá)，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Smad 3在胃癌低表達(dá)，在慢性胃炎中高表達(dá)，在胃息肉中的表達(dá)低于胃癌組，但高于慢性胃炎組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 不同類型胃息肉和胃癌中TGF-β1、Smad 3的表達(dá)與臨床參數(shù)的關(guān)系 Smad 3在胃癌組織中低表達(dá)，在胃息肉中表達(dá)較高，與胃息肉類型無(wú)明顯差異性，Smad 3表達(dá)與胃癌進(jìn)展負(fù)相關(guān)，分化程度高，TNM分期早，未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，Smad 3表達(dá)程度就高。兩者在胃癌中的表達(dá)與患者性別及年齡無(wú)關(guān)，與腫瘤的TNM分期、癌細(xì)胞分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，見(jiàn)表1，見(jiàn)圖1～圖6。

表1 TGF-β1、Smad 3的陽(yáng)性表達(dá)在不同病理特征中的關(guān)系Table 1 The relationship between positive expression of TGF-beta 1 and Smad 3 in different pathological characteristics

圖1～圖3 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子在慢性胃炎，胃息肉及胃癌中的表達(dá)

圖4～圖6 Smad 3在慢性胃炎，胃息肉及胃癌中的表達(dá)Figure 4-figure 6 Smad 3,expression in chronic gastritis,gastric polyps and gastric cancer

3 討論

胃癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在我國(guó)，每年死于胃癌的患者大約16萬(wàn)人，病死率居各類惡性腫瘤之首，由于胃癌缺乏特異性表現(xiàn)，故早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷對(duì)患者的治療和預(yù)后至關(guān)重要[5]。

胃癌的發(fā)生是一個(gè)長(zhǎng)期的過(guò)程，常會(huì)經(jīng)歷多年持續(xù)的癌前變化，多種癌癥相關(guān)基因均在其中起著重要作用。胃癌的癌前疾病是指與胃癌相關(guān)的胃良性病變，包括慢性萎縮性胃炎、胃腺瘤、胃潰瘍、殘胃、惡性貧血及巨大胃黏膜皺襞癥等。近年來(lái)隨著胃鏡技術(shù)的開(kāi)展及普及，越來(lái)越多的癌前疾病被及時(shí)發(fā)現(xiàn)，對(duì)阻止胃癌的發(fā)生有一定的作用，其中胃息肉作為臨床最常見(jiàn)的胃部疾病，其惡變的幾率及與腫瘤之間的相關(guān)性備受關(guān)注。

胃息肉作為癌前疾病的一種，可分為增生性息肉和腺瘤性息肉[6]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)告，增生性息肉癌變率為0.3%～0.6%[7-8]，腺瘤性息肉的癌變率達(dá)15.69%～41.00%[2-3]，其中呈乳頭狀生長(zhǎng)者稱為乳頭狀息肉，后兩者可能發(fā)生癌變。這是因?yàn)橄倭鲂韵⑷饧叭轭^狀息肉帶有腫瘤性質(zhì)，已完全失去了胃黏膜及腺體的正常結(jié)構(gòu)，胃息肉的癌變率因胃息肉的種類不同而不同，腺瘤性息肉的癌變率在40%左右，而增生性的胃息肉癌變率不超過(guò)5%，后者發(fā)生癌變的原因是在增生性息肉內(nèi)出現(xiàn)了異型增生或腺瘤，也就是說(shuō)在癌前疾病內(nèi)出現(xiàn)了癌前病變。

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）是一組結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān)的活性多肽，TGF-β1是這一家族的主要成員。TGF-β1可通過(guò)阻止細(xì)胞從G1-S期，對(duì)上皮起源細(xì)胞有明顯的生長(zhǎng)抑制作用[9]。TGF-β1屬于負(fù)性生長(zhǎng)因子[10]，但在胃癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，腫瘤可擺脫TGF-β1的抑制，甚至被TGF-β1刺激而過(guò)度生長(zhǎng)，故TGF-β1為雙向調(diào)節(jié)因子。隨著胃癌臨床分期的進(jìn)展及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的出現(xiàn)，TGF-β1表達(dá)逐漸增強(qiáng)，但與患者的年齡及性別無(wú)關(guān)[11-13]，提示TGF-β1可能促進(jìn)胃癌的發(fā)生及發(fā)展。在本試驗(yàn)中，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1在胃癌中的表達(dá)明顯升高，胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為73.3%，明顯高于胃息肉及慢性胃炎組織，其陽(yáng)性表達(dá)率分別為56.7%及40%，（χ2=5.19、3.98，P＜0.05），在不同類型胃息肉中，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1的表達(dá)具有差異性，在伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌患者中，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1的陽(yáng)性率表達(dá)增高，與相關(guān)文獻(xiàn)觀點(diǎn)相符，提示轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1可能促進(jìn)胃癌的發(fā)生及發(fā)展，而胃息肉作為癌前疾病的一種，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1表達(dá)的改變可能在息肉癌變中發(fā)揮一定的作用。

TGF-β超家族是一種信使蛋白，Smads蛋白是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子通路中的重要信使，Smad 3的表達(dá)缺失或突變使TGF-β信號(hào)傳遞中斷，細(xì)胞逃脫TGF-β的生長(zhǎng)抑制作用，導(dǎo)致許多腫瘤的發(fā)生及發(fā)展。故在胃癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，Smad 3作為TGF-β超家族表達(dá)過(guò)程中的抑制生長(zhǎng)信號(hào)因子，能改變細(xì)胞的生長(zhǎng)周期，調(diào)控異常細(xì)胞的分裂周期[14]，對(duì)機(jī)體起到保護(hù)作用。在本試驗(yàn)中，Smad 3在正常胃黏膜組織中的表達(dá)最高，值為55%，胃癌中的Smad 3陽(yáng)性表達(dá)率最低，值為36.6%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.27，P＜0.05），與胃息肉相比，兩兩比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示Smad 3表達(dá)的減少及缺失是引發(fā)腫瘤發(fā)生的重要環(huán)節(jié)。

綜上所述，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β在胃癌的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程中均發(fā)生著重要的作用，而胃息肉作為胃癌的癌前疾病，亦存在上述信號(hào)傳導(dǎo)通路的異常，對(duì)研究胃癌的發(fā)生機(jī)制提供了一個(gè)新的思路，同時(shí)在臨床上，對(duì)于胃腺瘤樣息肉需盡早行內(nèi)鏡下治療，避免息肉的進(jìn)一步惡變，預(yù)防胃癌的發(fā)生。

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