中藥顆粒劑對(duì)傳染性腔上囊病(IBD)雞免疫器官修復(fù)作用的研究

趙 娟，段昌學(xué)，王 曦，劉一飛，趙 敏，韓潔茹，李正莉，趙 華，余牧航

(1.山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,山西 太原 030032；2.陜西省商洛市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，陜西 商洛 726000)

雞傳染性腔上囊病(IBD)是由病毒引起的主要危害雞的免疫器官的一種急性、高度接觸性的傳染病。雖然目前雞群免疫能夠?qū)Ρ静∑鸬搅己玫念A(yù)防效果，但雞群也仍有偶發(fā)感染，如若感染此病，多表現(xiàn)為拉稀，羽毛蓬松，精神不振等癥狀。單純IBD感染雞雖然死亡率不高，但因其腔上囊、脾臟等免疫器官受到嚴(yán)重?fù)p害，結(jié)果造成該雞群嚴(yán)重的免疫抑制，致使此后對(duì)雞群的任何免疫接種效果甚微或根本無效，增加了雞群對(duì)多種疫病的易感性，雞群感染率可達(dá)95%，造成的后果是嚴(yán)重的，產(chǎn)生的經(jīng)濟(jì)損失是無法估量的[1]。

目前針對(duì)IBD臨床上多采用卵黃特異性抗體注射治療，治療效果較好，存活率達(dá)89%以上，但因其治療后雞只的腔上囊、脾臟等免疫器官的組織結(jié)構(gòu)并沒有完全恢復(fù)，IBDV嚴(yán)重破壞腔上囊中的B淋巴細(xì)胞，導(dǎo)致不同程度的免疫抑制，致使雞體對(duì)病原體的免疫力低下而引起繼發(fā)感染，并對(duì)其以后其他疫苗的免疫效果仍然會(huì)有較大的影響[2]。

本項(xiàng)目通過自制中藥復(fù)方顆粒劑，飲水治療IBD陽(yáng)性雞群，顯微鏡鏡檢存活雞腔上囊、脾臟病理變化及組織修復(fù)狀況，研究自制中藥顆粒劑治療IBD的效果及修復(fù)免疫器官損傷的作用。并因其天然性、價(jià)格低廉、使用方便、無應(yīng)激反應(yīng)等特點(diǎn)，具有較好的經(jīng)濟(jì)及社會(huì)效益。

1 材料與方法

1.1 中藥顆粒劑 由山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所中獸醫(yī)藥研究室課題組研制提供，由板藍(lán)根、黃芪、黨參、大青葉、白術(shù)、甘草、神曲、川芎、刺五加、魚腥草等10多味中藥組成。

1.2 被檢動(dòng)物 隨機(jī)抽取25日齡IBD病雞200只，隨機(jī)分成2個(gè)組，即中藥顆粒劑治療組和自然耐過空白對(duì)照組各100只，于其治療康復(fù)后，即35日齡時(shí)，每組隨機(jī)抽取10只用于剖檢采集病料。

1.3 方法 撲殺被檢雞，無菌采集各試驗(yàn)雞腔上囊、脾臟和肝臟病料，眼觀病變以后，用10%中性福爾馬林固定，石蠟包埋，切片，蘇木素—伊紅染色，組織切片于顯微鏡檢查其病理組織學(xué)變化，并進(jìn)行顯微組織拍照直觀比較自然耐過雞和自制中藥顆粒治療康復(fù)雞的免疫器官病理組織學(xué)變化。

2 檢查結(jié)果

2.1 自然耐過雞免疫器官眼觀病理變化 被檢的IBD自然耐過雞的免疫器官仍呈不同程度的病理性變化。

2.1.1 腔上囊 腔上囊不同程度腫大、質(zhì)地柔軟、顏色黃白，囊腔內(nèi)黏液較多，有的漿膜和黏膜仍有出血點(diǎn)或出血斑。

2.1.2 脾臟 脾臟不同程度腫大、質(zhì)地較軟、表面和切面顔色暗紅仍有針尖大小的黃白色壞死點(diǎn)。

2.2 自然耐過雞免疫器官病理組織學(xué)變化

2.2.1 腔上囊 5只雞腔上囊黏膜上皮變性、壞死、脫落、黏膜下層祼露，淋巴濾泡皮質(zhì)部變薄，淋巴細(xì)胞稀少甚至消失，皮質(zhì)部與髓質(zhì)部界線不清，髓質(zhì)部淋巴濾泡嚴(yán)重充血、出血，淋巴細(xì)胞明顯減少，上皮樣細(xì)胞呈彌散性或連片狀增生，黏膜上皮脫落。上皮樣細(xì)胞漿淡染或溶解，胞核濃縮或消失，呈大小不一的空泡樣(如封二彩版圖1), 間質(zhì)增厚而松散，并出現(xiàn)較多的巨噬細(xì)胞，異嗜性白細(xì)胞和少量淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞，淋巴濾泡形態(tài)結(jié)構(gòu)破壞(如封二彩版圖2)。有的淋巴濾泡髓質(zhì)嚴(yán)重毀壞，出現(xiàn)被紅細(xì)胞、巨噬細(xì)胞充斥的腔泡(如封二彩版圖3)。

2.2.2 脾臟 所有雞脾臟內(nèi)的脾小體出現(xiàn)不同程度性壞死，淋巴細(xì)胞明顯減少甚至消失，變成一團(tuán)一團(tuán)淡紅色半透明的蛋白樣物質(zhì)，脾竇擴(kuò)張不同程度瘀血(如封二彩版圖4),中央動(dòng)脈周圍淋巴套中淋巴細(xì)胞減少，網(wǎng)狀細(xì)胞增生，血管內(nèi)皮細(xì)胞腫脹增生，脾竇擴(kuò)張瘀血，并含有數(shù)量不等的巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞(如封二彩版圖5)。

2.3 自制中藥顆粒劑治療組雞的免疫器官的眼觀病理變化及病理組織學(xué)變化

2.3.1 自制中藥顆粒劑治療組雞的免疫器官的眼觀病理變化25日齡傳染性腔上囊病病雞，采用自制中藥顆粒劑治療痊愈后35日齡時(shí)，隨機(jī)抽樣撲殺10只雞，進(jìn)行病理學(xué)檢查，其中有10只雞的病理變化基本一致，表現(xiàn)免疫增強(qiáng)象征。

2.3.1.1 腔上囊 9只雞的腔上囊體如黃豆粒、顔色灰白或黃白、質(zhì)地較堅(jiān)實(shí)，切面無黏液；1只雞腔上囊縮小、質(zhì)地較硬，切面濕潤(rùn)。

2.3.1.2 脾臟 所有被檢治愈后35日齡雞，脾臟眼觀表現(xiàn)：脾臟體積不同程度增大、質(zhì)地堅(jiān)實(shí)，顔色褐紅或暗紅，切面有針柄大小的灰白色半球狀突起。

2.3.2 自制中藥顆粒劑治療組雞的免疫器官的病理組織學(xué)變化

2.3.2.1 腔上囊 8只雞腔上囊淋巴濾泡體積增大，皮質(zhì)與髓質(zhì)界線清晰，皮質(zhì)部增厚，淋巴細(xì)胞多而密集，髓質(zhì)部擴(kuò)張并含多量淋巴細(xì)胞和較多巨噬細(xì)胞，漿細(xì)胞，間質(zhì)輕度充血，黏膜上皮整齊無損(如封二彩版圖6)。1只雞腔上囊被嚴(yán)重毀壞，淋巴濾泡,大量結(jié)締組織增生，僅殘存少量淋巴細(xì)胞和淋巴細(xì)胞結(jié)節(jié)，而被輕度損壞的淋巴濾泡代償性肥大，皮質(zhì)部和髓質(zhì)部擴(kuò)張，淋巴細(xì)胞增生，巨噬細(xì)胞和漿細(xì)胞增多，細(xì)胞密度增加，黏膜上皮增生脫落或呈乳頭樣突出黏膜腔。1只雞腔上囊除有結(jié)締組織增生，淋巴濾泡代償性肥大，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和漿細(xì)胞代償性增多以外，部分被損壞的淋巴濾泡中出現(xiàn)大小不等的囊腫樣結(jié)構(gòu)，囊壁為上皮樣細(xì)胞，囊腔含少量黏液樣物質(zhì)(如封二彩版圖7)。

2.3.2.2 脾臟 脾小體增生，數(shù)量增多，脾小體內(nèi)所含細(xì)胞稠密而深染，并堆積成大小不等的圓形或橢圓形結(jié)節(jié)狀，中央動(dòng)脈周圍淋巴套淋巴細(xì)胞增多，脾竇輕度充血。脾竇深度擴(kuò)張，含有較多紅細(xì)胞和大量巨噬細(xì)胞,淋巴細(xì)胞,脾小體增生，并含有大量的T.B淋巴細(xì)胞，巨噬細(xì)胞和漿細(xì)胞，中央動(dòng)脈周圍淋巴細(xì)胞增多，內(nèi)皮細(xì)胞腫大，增生(如封二彩版圖8)。

3 討論與結(jié)論

3.1 被檢自然耐過雞的腔上囊、脾臟，仍呈不同程度的病理性變化，病理變化典型而一致，主要免疫器官受到嚴(yán)重的破壞仍然存在，腔上囊有結(jié)締組織增生，表明免疫機(jī)能降低，易引起繼發(fā)性感染和疾病，影響雞的生長(zhǎng)發(fā)育及生長(zhǎng)性能。

3.2 采用自制中藥顆粒治療康復(fù)后雞的主要免疫器官形態(tài)結(jié)構(gòu)和組織病變已消失，免疫細(xì)胞明顯增生，數(shù)量增多。雖然個(gè)別康復(fù)雞腔上囊的一些嚴(yán)重毀壞的淋巴濾泡被結(jié)締組織所取代，但損傷較輕的淋巴濾泡代償性肥大，淋巴細(xì)胞代償性增生。這些變化表明，通過自制中藥顆粒防治腔上囊病，可以促進(jìn)腔上囊病雞主要免疫器官的盡快修復(fù)，有利于病雞免疫機(jī)能的恢復(fù)和提高。

3.3 現(xiàn)代藥理研究表明，驅(qū)邪扶正的中藥方劑除直接抑制病毒外，還能大幅度提高機(jī)體的免疫功能，增加機(jī)體免疫器官的重量，提高T、B淋巴細(xì)胞數(shù)量，促進(jìn)干擾素的產(chǎn)生[3]。通過電子顯微鏡檢測(cè)，表明該驅(qū)邪扶正中藥方劑可在一定程度上抑制IBDV所致的細(xì)胞凋亡[4]。配方中應(yīng)用的黃芪具有免疫刺激，抗病毒，抗氧化和抗腫瘤的作用，蕨麻中藥中的多糖和皂苷被認(rèn)為是具有生物活性的兩種物質(zhì)，黃芪多糖具有免疫調(diào)節(jié)效果而且無毒副作用的產(chǎn)生[5-8]。與本研究的相關(guān)結(jié)論一致。

志謝： 本實(shí)驗(yàn)由西北農(nóng)林科技大學(xué)薛登民教授協(xié)作完成。