益生菌對老年人口腔念珠菌的影響

何 云，葛家華

念珠菌是一種常見的條件致病菌，主要存在于人體口腔、陰道、皮膚等處[1]，當人體免疫力降低或者是發生微生態環境紊亂時，比如老年人、兒童、艾滋病患者、長期服用抗生素患者等[2]，易導致機體感染念珠菌。念珠菌作為一種共生菌，在老年人口腔中檢出率可達20%～65%，并隨著年齡的增加而提高[3-4]。益生菌是一類對機體有益的活性微生物，主要包括酪酸梭菌、乳酸菌、雙歧桿菌等，能通過調節宿主微生態平衡而促進機體健康。有研究顯示，規律適量的服用益生菌制品，可以調節胃腸道和陰道的菌群平衡，從而降低機體致病微生物的感染率[5]。Mendonca等[6]也證實，益生菌可以降低口腔念珠菌感染。目前大部分的研究主要集中在益生菌對幼兒和重病患者念珠菌感染上，對于益生菌對老年人口腔念珠菌的影響還鮮有報道。本研究就益生菌含片對老年人口腔念珠菌的影響進行了觀察。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇2013年6月～2015年6月醫院門診老年患者為研究對象。納入標準：（1）年齡＞65歲；（2）能配合完成口腔檢查及唾液樣本采集。排除標準：（1）有嚴重的慢性疾病或腫瘤；（2）使用免疫抑制劑或抗生素；（3）有精神疾病或認知障礙；（4）患有口腔干燥綜合癥。共納入對象168例：年齡65～94（75.48±5.60）歲；男性 66 例，女性 102 例；文化程度：大專及以上34例，高中以下134例；城市戶口57例，農村戶口111例；上頜牙：義齒88例；無齒23例；＜6顆 27例，＞6顆 30例；下頜牙：義齒 88例；無齒18例；＜6顆20例，＞6顆42例。按照病例入組順序編號，采用奇偶數法將患者隨機分為試驗組和對照組，各84例，兩組間基線資料比較無統計學差異（P＞0.05）。本研究方案得到醫院醫學倫理委員會批準，所有患者本人及家屬均對本研究知情同意。

1.2 研究方法 試驗組每天含服含有活菌的益生菌含片 （BLIS K12口腔益生菌含片，新西蘭），2片/次，2次/d，早晚含服。每片含羅伊乳桿菌（菌株號DSM17938）108個活菌。指導研究對象正確含服的方法，使藥片在口腔完全融化，避免嚼服或吞服。同時指導研究對象或其家人每天記錄服用情況，并由試驗者每周電話跟蹤監督研究對象的服用情況。對照組按同樣的方式服用安慰劑含片，其大小、顏色、味道、質地等與益生菌含片相同，只是不含有活菌。兩組均連續服藥3個月。

1.3 檢測指標

1.3.1 口腔檢查 在試驗開始前和3個月后試驗結束時，研究對象在醫院門診接受口腔檢查，常規對其口腔衛生情況、牙齒數目、義齒、牙齦炎癥等進行檢查。同時檢查牙菌斑情況，以“可見”或“未見”進行記錄。讓研究對象咀嚼一塊經過預熱的石蠟（約2 g），用塑料吸管收集約1 ml唾液，用探針在上下前牙收集菌斑約30 mg。

1.3.2 念珠菌檢測 將唾液樣本和菌斑樣本分別接種在沙氏培養基上，培養基中含有氯霉素和慶大霉素抑制雜菌生長，37℃溫浴4 d，用放大鏡觀察并計數菌落。為避免人為計數誤差，菌落計數由兩個人分別計數，取平均數。菌落評分標準[7]：0分：未觀察到菌落生長；1 分：1～20 菌落形成單位（cfu）（103cfu/ml）；2 分：21～50 cfu（104cfu/ml）；3 分：＞50 cfu（＞105cfu/ml）。失訪病例菌落評分記為3分。

1.4 統計學方法 應用SPSS13.0軟件進行統計學分析，計數資料以例和率的形式表示，采用χ2檢驗；計量資料以±s表示，采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組服藥依從性比較 由于研究對象的死亡和其他不明原因，造成試驗組失訪6例，對照組失訪5例。整個試驗過程中沒有病例發生嚴重的不良反應，其中對照組有2例分別在試驗第1 w和第2 w反映有胃部輕微不適，并終止繼續試驗。從研究對象記錄的服藥情況來看，都存在未服用或漏服的情況，組間差異無統計學意義（P＞0.05，表1）。

表1 兩組服藥依從性比較

2.2 兩組口腔念珠菌菌落評分比較 試驗前，兩組唾液念珠菌菌落評分無統計學差異（P＞0.05）；試驗3個月后，試驗組菌落評分高分比例由47.62%降至26.19%（P＜0.05）；而對照組試驗前后菌落評分無顯著變化（P＞0.05），但試驗后對照組菌落評分高分比例顯著高于試驗組（P＜0.05，表2）。兩組菌斑菌落評分也得到與唾液菌落評分相似的結果（表3）。

3 討論

口腔正常微生物群是經過長期的自然選擇形成的與宿主口腔存在相互受益的微生物群。在不同個體的口腔微生態環境中，微生物群的組成種類及數量處于動態平衡狀態。口腔念珠菌也是正常口腔微生物群中的一種，一般不會引起念珠菌口炎。但隨著年齡的增長，人體免疫力降低、機體出現一系列衰老變化，以及長期持續或間斷刺激因素對口腔微環境的影響不斷積累，最終可能導致口腔正常微生物群的動態平衡狀態被打破，口腔念珠菌所占比例增高，引發患者出現口腔念珠菌口炎的風險，有研究提示，應用口腔益生菌可以顯著降低老年人口腔念珠菌感染風險[8]。而國內對于應用益生菌防治老年人口腔念珠菌感染鮮有研究。

表2 兩組唾液念珠菌菌落評分比較[n(%）]

表3 兩組菌斑念珠菌菌落評分比較[n(%)]

本研究結果顯示，試驗組規律的含服口腔益生菌含片，可以顯著降低受試者試驗前后口腔念珠菌菌落數，與對照組服用安慰劑相比具有統計學差異，揭示含服益生菌含片可能降低老年人口腔念珠菌感染風險。本試驗所采用的菌株（DSM17938）來源于人類，在研究過程中，除了有兩例報告輕微的胃部不適以外，未沒有發現受試者產生嚴重的不良反應，說明此菌株可以安全應用在老年群體中。

關于益生菌對口腔念珠菌的抑制作用的機制，有研究證明是因為羅伊乳桿菌通過產生羅氏菌素抑制念珠菌的生長；也有研究發現，可能是通過調節全身免疫系統和增加IgA的分泌而加強口腔黏膜屏障功能[9]。本研究發現，益生菌對念珠菌高攜帶量的個體的控制效果更好，其具體機制有待進一步研究。

本研究對益生菌制劑的用量沒有做深入的探討，且樣本量小、隨訪時間不長，試驗結果還需要更大樣本量和多中心研究結果加以證實。

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