胚胎干細胞在培養過程中操作注意事項

答：(1)定期將未分化的細胞集落從已分化的細胞中分離出來并接種到新的培養基上。

(2)轉移細胞時盡量快，以免細胞發生解離和死亡。

(3)分離細胞集落時使每個部分含5～10個細胞，否則細胞過多將導致分化，細胞過少則克隆的效率低。

(4)由于ESCs是對各種內毒素最為敏感的細胞，故要重視培養液和血清的質量。

(5)重視原始飼養層細胞的質量，沒有原始飼養層細胞所在的胚胎干細胞將在7～10 d內分化或死亡，若原始飼養層細胞質量差，則不能有效地抑制ESCs的分化而導致培養增殖失敗。