創面負壓治療促進堿性成纖維細胞生長因子(bFGF）在糖尿病足肉芽組織表達

姜強,李建婷,婁凱,陸勇,黃國寶

濟南市中心醫院內分泌科 ，山東濟南 250013

糖尿病足是一種糖尿病多見并發癥[1]，表現為足部軟組織與骨關節畸形與破壞，遷延難愈。創面負壓由多側空引流管、醫用泡沫材料以及負壓引流裝置組成，可以及時排除創面及腔隙中的液化、滲液壞死組織，加速毛細血管的生長，促進腔隙及創面有效斂合，在深部腹部開放創口的愈合中發揮重要作用[2]。bFGF屬于多功能外源性生長因子[3]，有促進外胚層及中胚層的細胞修復及再生作用，是促進創面愈合的關鍵因子。我們對創面負壓對糖尿病足患者創面bFGF的影響進行了觀察總結。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年2月—2017年2月，在該院就診的50例糖尿病足患者：常規組女11例，男14例，年齡均值（58.46±5.52）歲；干預組女10例，男15例，年齡均值（58.51±5.31）歲。兩組病患性別、年齡等資料存在良好一致性（P＞0.05）。

1.2 治療方法

常規組：常規紗布換藥，依照敷料浸濕的具體情況，每2～3 d換1次藥，將失活壞死的組織及膿液及時清理。

干預組：對創面常規消毒，將壞死失活的組織有效清除，確保創面、創腔無異物及膿液殘留。依照患者創面實際大小設計合適的修剪敷料，深腔底部填塞敷料；將半透性黏貼薄膜覆蓋創面，確保創面的封閉性；用連接管連接負壓引流裝置，保證敷料與半透明薄膜因負壓吸引于皮膚凹陷；如有漏氣，需再次將創面封閉；設置負壓在-125mmHg，總計治療1周。治療期間需對患者引流管堵塞、出血及漏氣等情況密切觀察，一旦發現異常需盡早處理。

治療前后每位患者均取創面肉芽組織2份，厚度0.5 cm，直徑0.8 cm。一份采取免疫組織化學染色；另外一份置于-80℃儲藏柜中保存。收集標本后，通過Western blotting法對bFGF蛋白的表達進行檢測。

1.3 效果評價

兩組治療1周后，對選取的創面肉芽組織切片依次行HE（蘇木素伊紅）染色、Masson染色（以圖像分析軟件分析切片中膠原含量）、免疫組化染色（以圖像分析系統分析光密度值表示bFGF含量），并用Western blotting法分析bFGF表達的情況。

對比治療5、10 d和15 d時，兩組的創面愈合面積。愈合面積=（治療前潰瘍面積-治療后剩余未愈合面積）/治療前潰瘍面積×100.00%。

1.4 統計方法

整理及匯總實驗數據，用SPSS 22.0統計學軟件處理，（±s）表示計量資料，t檢驗表示組間差異，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者HE染色情況對比

干預組治療后肉芽組織HE染色存在新鮮肉芽組織，主要表現為成纖維細胞、中性粒細胞浸潤，并形成大量的新生毛細血管；常規組成纖維細胞與中性粒細胞浸潤與干預組相比要少。

2.兩組織Masson染色對比

干預組治療前后膠原纖維沉積為（9.9±3.2） %VS（23.3±6.9）%，t=-11.251，（P＜0.05）；常規組治療前后為（9.2±2.5）%VS（10.3%±3.5）， t=-1.924。干預組治療前后膠原面密度差值（13.3±5.4）%顯著高于常規組（1.2±2.5）%，t=9.257（P=0.002）。

表1 治療后創面愈合面積對比（x ±s）

2.3 免疫組化染色分析

bFGF陽性細胞在免疫組化切片顯示為棕黃色或棕褐色顆粒。干預組治療后棕黃色顆粒明顯增加，光密度顯示bFGF表達水平為（0.424±0.090），顯著高于治療前（0.22±0.03），t=14.356（P＜0.05）；常規組治療前后變化不明顯，（P＞0.05）；干預組治療前后光密度差值（0.20±0.05）vs常規組（0.02±0.02）差異有統計學意義，t=12.04（P＜0.05）。

2.4 Western blotting法分析

干預組治療前肉芽組織bFGF表達水平為0.67±0.20，治療后為 2.99±1.12，t=-10.723（P＜0.05）；常規組治療前后（0.63±1.20 vs 0.70±0.17）差異不明顯；干預組治療前后bFGF灰度差值（2.31±0.99）與常規組（0.11±0.08）比較差異有統計學意義，（t=10.142，P＜0.05）。

2.5 兩組治療后創面愈合面積比較

常規組治療5、10 d與15 d后，創面愈合的面積均小于干預組，具體數據見表1。

3 討論

該研究發現創面負壓治療可使糖尿病足患者創面肉芽組織中纖維細胞、成纖維細胞以及毛細血管胚芽的數量多于常規組，bFGF表達高于常規治療組，并使創面愈合快于常規治療組。

糖尿病足具有遷延不愈的特點。細胞因子在傷口愈合中的作用至關重要[3]。bFGF是促進創面愈合的一種關鍵因子，通過刺激成纖維細胞增殖、遷移、分化，調節血管生成和促進膠原蛋白沉積，加速創面愈合[3]。該研究顯示，創面負壓可以增加bFGF在糖尿病足創面表達，促進肉芽組織中纖維細胞、成纖維細胞以及毛細血管胚芽生長，在加速糖尿病足創面愈合中發揮了重要作用，值得進一步推廣。

[1]中國醫療保健國際交流促進會糖尿病足病分會.中國糖尿病足診治指南[J].中華醫學雜志, 2017,97(4) :251-258

[2]Bertelsen,C.A.,Fabricius,R.,Kleif,J. et al. Outcome of negativepressure wound therapy for open abdomen treatment after nontraumatic lower gastrointestinal surgery: Analysis of factors affectingdelayed fascial closure in 101 patients[J]. World Journal of Surgery, 2014,38(4):774-781.

[3] Schweigerer L, Neufeld G, Friedman J, et al. Capillary endothelial cells express basic fibroblast growth factor, a mitogen that promotes their own growth[J]. Nature. 1987，325(6101):257-259.