滇產前胡的化學成分研究

1.廣州白云山漢方現代藥業有限公司/中藥提取分離過程現代化國家工程中心，廣東　廣州　510240； 2.昆明醫科大學藥學院暨重點實驗室，云南　昆明　650500 3.昆明醫科大學第一附屬醫院，云南　昆明　650032；

前胡為傘形科(Umbelliferae)白花前胡 (PeucedanumpraeruptorumDunn)干燥根，苦、辛，微寒，歸肺經。用于痰熱喘滿，咯痰黃稠，風熱咳嗽痰多[1]。在云南有8個屬約20種植物作為前胡使用，其中短片藁本、羽胞藁本、美脈藁本、云前胡、亮蛇床、二色棱子芹是各地區長期習慣使用[2]。《滇南本草》所記載云南地產前胡的功效與《本草綱目》記載一致，為味辛，性寒，陰中陽也，解散傷風傷寒發汗要藥，升降肝氣，止咳嗽，明目退翳，除內外之痰，有推陳出新之功[3]。前胡根部主要含香豆素化合物，其具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤等活性[4-5]。實驗對產自云南中藥前胡的化學成分進行了提取分離、鑒定。從其甲醇提取物分離得到3個化合物，分別鑒定為白當歸素 (byakangelicin，1)[6]、氧化前胡素 (oxypeucedamin，2)[7]和2,3-二甲氧基苯甲酸 (2,3-dimethoxy-benzoic acid，3)[8]。

1　材料與方法

1.1儀器Bruker AM-400型、DRX-500型核磁共振儀(Bruker 公司)，TMS作為內標，為ppm，J為Hz。

1.2材料薄層色譜GF254、柱色譜硅膠(100～200目和200～300目)均為青島海洋化工廠生產；反相填充材料RP-18(Merk公司，40～60(m)；MCI樹脂(Mitsubishi Chemical公司)；Sephadex LH-20柱色譜填料(Merk公司)。藥材于2014年9月購買于云南菊花村藥材市場，由昆明醫科大學唐麗萍博士鑒定為前胡(PeucedanumpraeruptorumDunn)。

2　方法與結果

2.1前胡化學成分的提取分離前胡的干燥根部6.0 kg，經過粉碎后用甲醇溶液重復提取4次(每次10升，室溫浸泡24 h)，合并甲醇提取液，過濾，濃縮得浸膏317.2 g。浸膏分散于1.5 L水中，用乙酸乙酯萃取數次，蒸干乙酸乙酯得浸膏165.0g，加等量硅膠(80～100目)拌樣后以1.0 kg硅膠(200～300目)柱層析，氯仿/丙酮溶劑梯度洗脫(1∶0-0∶1)，TLC檢測，合并相同餾分，得餾分段7部分。分別為A(氯仿部分)， B(9∶1)，C(8∶2)，D(7∶3)，E(6∶4)，F(5∶5)，G(丙酮部分)。B部分稱重25.0 g，用50.0 g硅膠(80-100目)拌樣，用石油醚：丙酮(10∶1, 5∶1, 3∶1, 1∶1)進行梯度洗脫得三部分B1，B2，B3。B1經Sephadex LH-20凝膠柱層析及反復重結晶獲得化合物2 (5.0 mg)和3 (3.0 mg)。C部分稱重21.0 g，用石油醚：異丙醇(8∶1, 4∶1, 2∶1, 1∶1)進行梯度洗脫得四部分C1，C2，C3， C4。C2經過反復重結晶獲得化合物1 (3.0 mg)。

2.2化合物的理化數據白當歸素 (Byakangelicin，1)：C17H18O7；1H-NMR (CDCl3，600Hz) δ：1.26 (3H，s，H-4″), 1.30 (3H，s，H-5″), 3.81 (1H，dd，J=7.8，2.4Hz，H-2″), 4.18 (3H，s，5-OCH3), 4.24 (1H，dd，J=10.2，7.8Hz，H-1″b), 4.58 (1H，dd，J=10.2，2.4Hz，H-1″a), 6.28 (1H，d，J=9.6Hz，H-3), 7.01 (1H，d，J=2.4Hz，H-3′), 7.62 (1H，d，J=1.8Hz，H-2′), 8.12 (1H，d，J=10.2Hz，H-4)；13C-NMR (CDCl3，150Hz) δ：25.2 (q，C-4″), 26.9 (q，C-5″), 60.9 (q，5-OCH3), 71.7 (s，C-3″), 76.1 (d，C-2″), 76.3 (t，C-1″), 105.6 (d，C-3′), 107.7 (s，C-10), 113.1 (d，C-3), 114.7 (s，C-6), 127.0 (s，C-8), 140.0 (d，C-4), 144.2 (s，C-5), 145.1 (s，C-9), 145.5 (d，C-2′), 150.4 (s，C-7), 160.4 (s，C-2)。以上數據與文獻[6]對照一致。

氧化前胡素 (Oxypeucedamin, 2)：C16H14O5；1H-NMR (CDCl3，600Hz) δ：1.41 (3H，s，H-4″), 1.48 (3H，s，H-5″), 3.31 (1H，dd，J=6.6，4.2Hz，H-2″), 4.50 (1H，dd，J=10.8，6.6Hz，H-1″b), 4.67 (1H，dd，J=10.8，4.2Hz，H-1″a), 6.37 (1H，d，J=10.2Hz，H-3), 7.02 (1H，d，J=2.4Hz，H-3′), 7.24 (1H，s，H-8), 7.68 (1H，d，J=2.4Hz，H-2′), 8.27 (1H，d，J=9.6Hz，H-4);13C-NMR (CDCl3，150Hz) δ：19.2 (q，C-4″), 24.8 (q，C-5″), 58.6 (s，C-3″), 61.3 (d，C-2″), 72.4 (t，C-1″), 94.9 (d，C-8), 104.7 (d，C-3′), 107.5 (s，C-10), 113.2 (d，C-3), 114.2 (s，C-6), 139.3 (d，C-4), 145.5 (d，C-2′), 148.5 (s，C-5), 152.6 (s，C-9), 158.2 (s，C-7), 161.3 (s，C-2)。以上數據與文獻[7]對照一致。

2,3-二甲氧基苯甲酸(2,3-Dimethoxy-benzoic acid，3)：C9H10O4；1H-NMR (CDCl3，600Hz) δ：3.93 (3H，s，3-OCH3), 3.94 (3H，s，2-OCH3), 6.91 (1H，d，J=5.6Hz，H-5), 7.58 (1H，d，J=1.6Hz，H-4), 7.76 (1H，dd，J=1.4，5.4Hz，H-6)；13C-NMR (CDCl3，150Hz) δ：56.2 (q，3-OCH3), 56.3 (q，2-OCH3), 110.4 (d，C-4), 112.4 (d，C-5), 121.8 (s，C-1), 124.8 (d，C-6), 148.8 (s，C-3), 153.9 (s，C-2), 172.0 (s，-COOH)。以上數據與文獻[8]對照一致。

3　討論

通過對滇產中藥前胡化學成分的研究發現，其根部主要成分為香豆素類化合物，其中線型呋喃香豆素化合物氧化前胡素(Oxypeucedamin)，具有明顯抗HIV作用，治療指數TI為8.48[9]。該研究為滇產中藥前胡進一步的化學成分及生物活性研究提供了理論基礎。

[1]國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典(一部)[M]. 北京: 中國醫藥科技出版社，2010: 248.

[2]饒高雄，吳帆，劉啟新，等. 云南藥用前胡品種調查[J]. 中藥材，1996, 19(4): 177-179.

[3]蘭茂(明). 滇南本草(第三卷) [M]. 昆明：云南人民出版社，1978: 170.

[4]吳霞，畢贏，王一濤. 前胡化學成分及藥理作用的研究進展[J]. 食品與藥品，2010, 12(11): 442-445.

[5]程果，徐國兵. 香豆素類化合物的藥理作用研究進展[J]. 中成藥，2013, 36(6)：1288-1291.

[6]盧嘉，金麗，金永生，等．中藥杭白芷化學成分的研究[J]. 第二軍醫大學學報，2007, 28(3): 294-298．.

[7]趙愛紅，楊秀偉. 興安白芷脂溶性部位中新的天然產物[J]. 中草藥，2014, 45(13): 1820-1828.

[8]Auerbach J, Weissman S.A, Blacklock T.J, et al. N-Bromosuccinimide/dibromodimethylhydantion in aqueous base: a practical method for the bromination of activated benzoic acids[J]. Tetrahedron Letters, 1993(34): 931-934.

[9]Zhou P, Takaishi Y, Duan H, et al. Coumarins and bicoumarin from Frula sumbul: anti-HIV activity and inhibition of cytokine release [J]. Phytochemistry, 2000, 53(6): 689-697.