微柱凝膠免疫實驗檢測患者血清中抗腫瘤藥物類抗體的臨床應(yīng)用探究

何召新 李瑞娟

（五蓮縣中醫(yī)醫(yī)院，山東 日照 262300）

因藥物吸收而引發(fā)的免疫性溶血性貧血就是指，當(dāng)患者服用某種藥物之后，其機(jī)體內(nèi)部產(chǎn)生了對應(yīng)的藥物類抗體，進(jìn)而致使機(jī)體內(nèi)出現(xiàn)呼吸困難、血尿、疼痛、昏迷以及血壓降低等不良癥狀。在世界經(jīng)濟(jì)迅速發(fā)展的背景影響下，因藥物吸收而引發(fā)的免疫性溶血性貧血病癥逐漸受到了國際醫(yī)學(xué)研究的重視，近年來，針對中成藥制劑以及抗腫瘤藥物等引發(fā)的免疫性溶血性貧血病例也逐漸增多。根據(jù)相關(guān)醫(yī)學(xué)研究資料顯示，自1953年首次報道免疫性溶血性貧血病例至今，已發(fā)現(xiàn)超過100種藥物在服用后很有可能引發(fā)免疫性溶血性貧血[1]。由此，持續(xù)跟進(jìn)對該病癥的研究分析顯得至關(guān)重要。本次研究機(jī)抽取本院臨床中長期服用抗腫瘤藥物進(jìn)行治療的100例患者血清標(biāo)本進(jìn)行研究分析，現(xiàn)將詳細(xì)結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 分析資料：隨機(jī)抽取本院臨床中長期服用抗腫瘤藥物進(jìn)行治療的100例患者血清標(biāo)本進(jìn)行研究。100例患者中，男性患者人數(shù)為48例，女性患者人數(shù)為52例；患者年齡最小為27歲，最大為76歲，平均年齡為（49.58±11.37）歲。其中，經(jīng)檢測后發(fā)現(xiàn)，100例患者中包括49例服用曲妥珠單抗抗體的患者，以及51例服用卡培他濱抗體的患者，現(xiàn)將其樣本進(jìn)行血細(xì)胞分析后，提取血清展開進(jìn)一步的檢測試驗。

1.2 方法

1.2.1 所用藥物：曲妥珠單抗（國藥準(zhǔn)字J20110020，生產(chǎn)廠家：上海羅氏制藥有限公司）、卡培他濱（國藥準(zhǔn)字H20073024，生產(chǎn)廠家：上海羅氏制藥有限公司）。

1.2.2 所用試劑：O型不規(guī)則抗體篩檢紅細(xì)胞、微柱凝膠抗人球蛋白。

1.2.3 檢測儀器：專用孵育器、血庫專用離心機(jī)。

1.2.4 檢測方法：①使用臨床專用的溶媒將曲妥珠單抗進(jìn)行溶解，后根據(jù)實際的配液量對其進(jìn)行換算，以1.112 mg/mL為標(biāo)準(zhǔn)展開試驗；取300 mg卡培他濱并將其溶解在7.5 mL的pH 7.2 PBS緩沖液當(dāng)中，后放置于溫室內(nèi)24 h。在溶解過程中需重點注意，卡培他濱在PBS緩沖液中無法實現(xiàn)完全溶解，因此，應(yīng)將其放置于水溫為37 ℃的容器中30 min，并在放置期間進(jìn)行大力攪拌。待其完全溶解后，取其清液展開后續(xù)試驗。②使用生理鹽水對O型紅細(xì)胞進(jìn)行3次洗滌，并留出部分紅細(xì)胞，用于后續(xù)的正常質(zhì)控，待藥物溶液準(zhǔn)備完畢后，將紅細(xì)胞加入其中。將混合試劑放置與室溫孵育中，儲存60 min，并在規(guī)定時間內(nèi)將其混勻，同時使用PBS對其進(jìn)行3～4次洗滌。使用PBS緩沖液將紅細(xì)胞稀釋到濃度為1%，并放置于溫度為4 ℃的室內(nèi)進(jìn)行保存。③設(shè)置O型洗滌紅細(xì)胞用 LISS 液重懸標(biāo)本、O型洗滌紅細(xì)胞用 PBS緩沖液重懸標(biāo)本以及藥物致敏紅細(xì)胞未加入患者血清標(biāo)本作為陰性對照。而自身檢測為陽性的患者標(biāo)本作為陽性對照。④微柱凝膠檢測方法：將50 μL的紅細(xì)胞加入抗人球蛋白檢測卡中，并加入25 μL的患者血清，放置于溫度為37 ℃的專用孵育器內(nèi)15 min，當(dāng)離心后取出觀察詳細(xì)檢測結(jié)果。⑤同樣使用微柱凝膠檢測方法進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，將50 μL標(biāo)準(zhǔn)抗篩細(xì)胞加入抗人球蛋白檢測卡中，同時加入25 μL的患者血清，放置于溫度為37 ℃的專用孵育器內(nèi)15 min，當(dāng)離心后取出觀察詳細(xì)檢測結(jié)果。

2 結(jié) 果

2.1 本研究抽取的100例長期服用抗腫瘤藥物進(jìn)行治療的100例患者血清標(biāo)本中，存在6例服用卡培他濱的患者，9例服用曲妥珠單抗的患者。經(jīng)過檢測100例患者血清標(biāo)本發(fā)現(xiàn)，共7例患者血清中存在抗腫瘤藥物類抗體，檢出率為7.00%。經(jīng)過檢測49例服用曲妥珠單抗患者的血清樣本結(jié)果顯示，存在2例陽性標(biāo)本，檢出率為4.08%；經(jīng)過檢測51例服用卡培他濱患者的血清樣本結(jié)果顯示，存在5例陽性標(biāo)本，檢出率為9.8%。檢測結(jié)果顯示，曲妥珠單抗產(chǎn)生抗腫瘤藥物類抗體的檢出率低于卡培他濱。

2.2 為了進(jìn)一步排除血清標(biāo)本中存在不規(guī)則抗體的可能性，本次研究對7例陽性標(biāo)本進(jìn)行了不規(guī)則抗體篩查，實驗結(jié)果顯示，7例抗腫瘤藥物類抗體陽性標(biāo)本均為陰性，證實標(biāo)本中不存在不規(guī)則抗體。

3 討 論

根據(jù)相關(guān)醫(yī)學(xué)研究報道顯示[2]，對免疫性溶血性貧血患者給予常規(guī)化療方案會產(chǎn)生一系列的嚴(yán)重不良反應(yīng)，且整體治療效果并不理想，無法為患者的生命健康安全提供可靠保障。隨著世界醫(yī)學(xué)研究的不斷深入，當(dāng)代有關(guān)藥物而引發(fā)的溶血反應(yīng)案例越來越多，有關(guān)醫(yī)學(xué)研究專家發(fā)現(xiàn)，使用聯(lián)合用藥的化療法可以在獲得良好治療效果的同時，降低相關(guān)不良反應(yīng)的發(fā)生率，對提高臨床治療效率有著重大現(xiàn)實意義。曲妥珠單抗屬于人源化單克隆抗體的一種，被臨床廣泛用于治療腫瘤患者的過程中。該藥物會引發(fā)的不良反應(yīng)包括：四肢乏力、呼吸道感染、骨髓抑制以及心悸等。而卡培他濱是氟尿嘧啶類藥物的一種，通過口服用藥的方式進(jìn)入人體后，能夠被機(jī)體胃腸道快速吸收，在近年來常被聯(lián)合應(yīng)用到治療腫瘤患者的過程[3]。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)過檢測100例患者血清標(biāo)本發(fā)現(xiàn)，共7例患者血清中存在抗腫瘤藥物類抗體，檢出率為7.00%。其中存在2例曲妥珠單抗，檢出率為4.08%；存在5例卡培他濱，檢出率為9.8%。檢測結(jié)果顯示，曲妥珠單抗產(chǎn)生抗腫瘤藥物類抗體的檢出率低于卡培他濱。

綜上所述，當(dāng)患者長期服用抗腫瘤類藥物之后，機(jī)體內(nèi)部產(chǎn)生了曲妥珠單抗以及卡培他濱藥物類抗體。該藥物類抗體很可能導(dǎo)致患者出現(xiàn)藥物治療無效或是免疫性溶血等諸多免疫性臨床不良反應(yīng)。由此，為了進(jìn)一步提高臨床整體的治療效果，就必須加強(qiáng)對免疫性溶血反應(yīng)的深入研究，而展開抗腫瘤藥物類抗體的研究檢測，對提高臨床治療效率有著至關(guān)重要的作用。