孕期耳聾基因診斷及產前干預的研究進展

查樹偉 許豪勤 查 佶 孫 慶

（1 江蘇省計劃生育科學技術研究所，江蘇 南京210036；2 美國費城兒童醫院，美國 費城 19104）

遺傳性耳聾產前基因診斷主要針對一方或雙方是耳聾的夫婦、聾兒父母再生育和有耳聾親屬的聽力正常人群，近5年來較多文獻報道了正常孕期人群耳聾基因篩查結果[1-9]，本文主要探討與其相關的研究進展。

1 孕期耳聾基因篩查和產前診斷模式探討

孕期健康人群在知情同意后進行耳聾基因芯片篩查，檢出基因突變者的丈夫進行芯片檢測或夫婦同時相應基因測序，對攜帶同一基因突變夫婦的，進行耳聾風險評估，結合孕婦產前診斷檢測胎兒耳聾基因突變情況，給予生育咨詢指導，減少聾兒出生[6]。柳紅杰等[8]對5338例聽力正常孕婦采用基因芯片篩查檢出319例（5.98%）耳聾基因突變，對突變攜帶者孕婦的聽力正常配偶236例進行相應基因測序，配偶中7例攜帶與孕婦相同耳聾基因突變，這7例孕婦行羊水穿刺后，有2例胎兒確診分別為GJB2基因和SLC26A4基因雙雜合突變，孕婦均選擇終止妊娠。

2 孕期篩查和產前診斷接受程度調查

韓明昱等[10]在正常孕婦人群中進行常見耳聾基因篩查可接受研究，接受率高達93.6%，分析高接受率原因為：①設立耳聾基因篩查的專門診室，由專業人員負責。②醫務人員接診時的適宜推薦，專業人員簡明扼要的講解。③向孕婦發放孕期女性耳聾基因篩查的宣傳資料，進行宣傳咨詢。④孕期耳聾基因篩查免費檢測，孕婦的依從性較好。劉暢等[11]在已生育聾兒家長再生育的臨床調查中發現，家長一般對耳聾基因檢測和產前診斷持積極態度，其中94.6%耳聾基因突變的夫婦同意進行產前診斷。

3 孕婦常見耳聾基因芯片篩查

耳聾基因篩查一般采用遺傳性耳聾基因芯片，檢測4個常見耳聾基因（GJB2基因、GJB3基因、SLC26A4基因和線粒體12S rRNA基因）中的9個位點[12]。在正常孕期人群耳聾基因篩查的部分文獻中，孫蓮花等[1]報道3056例，孟培等[2]報道1060例，楊樹法等[3]報道2674例，張莉等[4]報道467例，邵敏杰等[5]報道893例，李朔等[6]報道1013例，吳偉兵[7]報道1824例，柳紅杰等[8]報道5338例，張萌等[9]報道24078例，耳聾基因突變總檢出率在3%至6%之間。通常在檢出孕婦為耳聾基因攜帶者時，要求其丈夫進行耳聾基因篩查或夫婦同時耳聾基因測序。

4 耳聾基因產前診斷和干預措施

韓明昱等[10]在檢測同為GJB2或SLC26A4基因突變攜帶的4對夫婦，分析其后代耳聾風險為25%，知情同意后分別在20周、21周、21周和28周進行產前診斷，1例風險極大（同時遺傳父母突變基因）自愿選擇終止妊娠，另3例風險等同于正常出生人群（僅遺傳父母其中一人所攜帶的突變）而繼續妊娠，出生后新生兒聽力篩查均通過。韓明昱等[13]還對58個生育聾兒（先證者）家庭（父母聽力正常，檢測為GJB2或SLC26A4突變攜帶者），因存在再生育風險進行產前診斷64例次，其中妊娠11～13周取材絨毛膜16例次、妊娠16～22周抽取羊水48例次和妊娠22～27周抽取臍血2例次。44例次檢測結果為胎兒未攜帶或僅攜帶父母一方突變，出生后隨訪聽力均正常，對于另外20例次檢測結果與先證者基因型相同或同時攜帶父母突變的胎兒，父母自愿選擇終止妊娠。

5 耳聾基因檢測產前診斷方法

產前診斷是在胎兒出生前通過適當的醫療手段對胎兒進行先天性缺陷或遺傳病的診斷，常用的介入性技術方法有絨毛穿刺（妊娠早期）、羊膜腔穿刺（妊娠中期）和臍靜脈穿刺（妊娠中晚期），取得的胎兒細胞進行胎兒基因檢測[14]，這在耳聾基因產前診斷方面得到了廣泛的研究和應用。孫蓮花等[1]進行產前診斷是在妊娠17周對孕婦進行羊膜腔穿刺，抽取30 mL羊水，分兩管，一管抽取羊水脫落細胞DNA進行相應耳聾基因的全外顯子序列測序分析，另一管經羊水細胞培養，待細胞生長呈絮片狀克隆后，收集羊水培養細胞，抽提DNA，進行相同的測序分析，兩次結果相互對照驗證，以確保結果的準確性。李玲等[15]通過超聲引導下介入性穿刺術獲取胎兒附屬物標本進行遺傳性耳聾基因產前診斷，即手術時在超聲定位下選擇安全和適宜位置進針。方法為：妊娠11～14周胎兒采用18G一次性PTCD針絨毛穿刺抽取胎盤絨毛10 mg，16～24周胎兒采用20G針抽取羊水10 mL，25周以上胎兒采用22G針抽取臍血3 mL。

6 胚胎植入前遺傳學診斷技術（PGD）研究

Handyside等[16]于1990年報道運用胚胎移植前遺傳學診斷技術（PGD）成功妊娠，使得PGD開始應用于臨床。PGD是采用輔助生殖方法，通過遺傳診斷技術，挑選健康的胚胎進行子宮移植，獲得表型正常的后代。PGD已廣泛應用于單基因遺傳性疾病和染色體異常性疾病以及線粒體疾病，遺傳性耳聾絕大部分為單基因變異，是PGD適應證[17]。Altarescu等[18]于2009年報道利用極體和卵裂球活檢對非綜合征性遺傳性耳聾患者采用PGD獲得成功妊娠。2010年國立臺灣大學醫學院多?？坡摵蠈σ焉幻騍LC26A4耳聾基因突變導致大前庭水管綜合征（EVAS）患兒的夫婦進行了PGD輔助生殖干預，成功妊娠并生育基因為野生型的單胎嬰兒，出生后聽力篩查正常[19]。2015年中國大陸首例先天性耳聾胚胎植入前遺傳學診斷健康試管嬰兒誕生，標志中國對單基因遺傳病的預防已達到國際先進水平[20]。

參考文獻

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