合理運用遺傳病檢測新技術(shù)提高兒科神經(jīng)系統(tǒng)疾病診治水平

黃云峰 黃致敬 羅燕飛 陸霜霜

【摘要】隨著先進(jìn)分子遺傳學(xué)檢測技術(shù)的發(fā)展，常用的二代測序技術(shù)和拷貝數(shù)檢測技術(shù)日益成熟，其檢測價格有所下降，并得以大量用于臨床診斷與治療中，基于此，兒科神經(jīng)系統(tǒng)疾病診斷水平取得飛速的發(fā)展。但這些新技術(shù)的使用，也會帶來一定的挑戰(zhàn)和問題，例如：如何挑選恰當(dāng)?shù)臋z測技術(shù)、如何解讀檢測結(jié)果等。因此，本文針對相關(guān)檢測技術(shù)做一個總結(jié)，以期為類似研究提供參考。

【關(guān)鍵詞】遺傳病檢測技術(shù)；兒科；神經(jīng)系統(tǒng)疾??；診治

【中圖分類號】R446 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】ISSN.2095-6681.2018.31..01

近些年，我國遺傳病檢測技術(shù)發(fā)展迅速，已經(jīng)基本上可以與世界同步。但也有一些新檢測技術(shù)處于起步應(yīng)用階段，因此，需要面臨一系列的挑戰(zhàn)和問題?；诖?，本文進(jìn)行一個簡單的概括，以供與兒科同行一起研究與討論。

1 第二代測序技術(shù)分析

與第一代測序技術(shù)比較，第二代測序技術(shù)具有測速費用低、速度塊等優(yōu)點，支持邊合成邊測序操作，從而在臨床疾病檢測中得到廣泛的使用?，F(xiàn)階段，主要包含以下幾種：全基因測序就是針對某種生物基因組內(nèi)的所有基因展開測序，可以真實展現(xiàn)整個生物體所有的遺傳信息；全外顯子測序（WES）則是運用目標(biāo)序列的捕獲技術(shù)，對基因組所有外顯因子進(jìn)行捕獲操作，并實施高通量測序的技術(shù)[1]。與全基因組測序比較，這種技術(shù)在包含蛋白編碼信息的基礎(chǔ)上，展現(xiàn)出成本低、測序周期短、便于分辨數(shù)據(jù)等優(yōu)勢[2]。但這種技術(shù)也有一定的局限性，難以了解非編碼序列是否出現(xiàn)改變，無法全面的了解基因組狀況。疾病靶向序列測序技術(shù)（DTS）工作原理與全外顯子測序，就是先要捕獲目標(biāo)需求，隨之開展高通量測序。按需定制主要優(yōu)勢在于，能夠與某一類疾病、臨床表現(xiàn)有關(guān)的致病因子整合在一個基因測序包內(nèi)實施高通量測序操作，尤其適合用于臨床遺傳性病因異質(zhì)性強疾病檢測中[3]。DTS主要優(yōu)點為目標(biāo)區(qū)域比較集中，測序成本有所下降，有利于縮短測序及數(shù)據(jù)分析所用周期，進(jìn)而滿足臨床診斷要求。如今，DTS得以廣泛用于臨床診斷中，包含癲癇、先天遺傳代謝病、智力障礙等。上述疾病具有較強的異質(zhì)性，對于標(biāo)本取材、診斷比較困難的疾病，DTS因具有創(chuàng)傷小、可以同時檢測引起類似表現(xiàn)的幾十種甚至上百種基因優(yōu)點，能夠提前到臨床診斷后，在神經(jīng)病理等信息之前展開檢測。必須注意，DTS也有一些不足之處，主要表現(xiàn)為：無法檢測出未知致病基因；DTS基因包可能優(yōu)于設(shè)計缺陷，導(dǎo)致所納入已知基因并不全面，導(dǎo)致發(fā)生關(guān)鍵遺傳信息遺漏的情況；新疾病或者表型有關(guān)基因被發(fā)現(xiàn)，DTS納入的基因需要不斷進(jìn)行更新，因此，優(yōu)秀的DTS檢測包需要定期更新納入基因。

2 拷貝數(shù)檢測技術(shù)分析

該技術(shù)主要由多重連續(xù)探針擴增技術(shù)（MLPA）、微陣列比較基因組雜交（aCCH）組成，其中，aCCH是在芯片上使用攜帶不同熒光素的樣本和正常對照樣本展開共雜交，此時，發(fā)現(xiàn)相對于正常對照樣本基本組可知，病例樣本基因組DNA拷貝數(shù)發(fā)生改變。aCGH檢測技術(shù)的優(yōu)勢在于，用來進(jìn)行單次檢測的DNA樣本量比較少，可以覆蓋整個基因組，且具有較高的分辨率[4]。而在國內(nèi)，使用aCGH技術(shù)最主要的問題在于價格，從技術(shù)方面分析，aCGH無法檢測小于2 kb的DNA片段缺失或者重復(fù)情況。MLPA就是運用探針和目的DNA序列實施雜交處理，依托連接、產(chǎn)物電泳分離等步驟對目的DNA序列展開定性及半定量分析技術(shù)[5]。MLPA展現(xiàn)出試驗周期短、操作方便等優(yōu)勢，進(jìn)一步確定基因是否重復(fù)或者缺失。與上一種技術(shù)對比，該技術(shù)的缺點在于，一次檢測區(qū)域范圍有一定的閑置，無法覆蓋整個基因組。MLPA技術(shù)的優(yōu)點是，其價格明顯低于aCGH，且操作簡單，能夠快速分析數(shù)據(jù)，獲得良好的檢測信息。不得不說，雖然遺傳性檢測用于兒科神經(jīng)系統(tǒng)疾病診治的作用越來越大，也需要清晰地看到每一種技術(shù)的局限性。例如：無法準(zhǔn)確展開查體操作，確定患者臨床癥狀及體征，將共濟失調(diào)誤診為肌無力，那么，就無法正確挑選疾病靶向測序包，由于肌無力和共濟失調(diào)作為兩個不同的疾病靶向測序包，還必須了解所用測序包是否滿足自己檢測的目的。此外，還必須向患兒家長說明遺傳性檢查在臨床診治中的應(yīng)用價值。因此，不要濫用遺傳學(xué)檢測技術(shù)，醫(yī)者需要在與家

長進(jìn)行充分的溝通之后，由家長決定是否讓孩子接受檢測。

3 結(jié) 論

綜上所述，優(yōu)于遺傳學(xué)檢測技術(shù)的迅速發(fā)展，檢測成本明顯下降，檢測準(zhǔn)確的得到相應(yīng)的提高。我們可以相信，遺傳學(xué)檢測會稱為臨床一種有效的技術(shù)手段用于兒科神經(jīng)系統(tǒng)診療工作中，不僅可以準(zhǔn)確診斷病情，也能為評估患者預(yù)后情況、特異性治療提供一定的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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本文編輯：趙小龍