小龍蝦細菌病害研究進展

趙楠，武秀麗，趙桂華,3

（1.江蘇農林職業技術學院，江蘇 句容 212400；2.句容市人民醫院，江蘇 句容 212400；3.句容市潤泰生物科技有限公司，江蘇 句容 212400）

細菌屬于原核生物，種類眾多，絕大多數對人類有益，極少數可引起動物病害和植物病害，是兼性寄生菌。小龍蝦細菌病是最常見、分布最廣的一類病害，由許多兼性寄生細菌侵染引起。從小龍蝦上分離到的細菌有10屬，包括不動桿菌屬（Acinetobacter）、氣單胞菌屬（Aeromonas）、芽孢桿菌屬（Bacillus）、枸櫞酸桿菌屬（Citrobacter）、棒狀桿菌屬（Corynebacterium）、黃桿菌屬（Flavobacterium）、微球菌屬（Micrococcus）、假單胞菌屬（Pseudomonas）、葡萄球菌屬（Staphylococcus）和弧菌屬（Vibrio）[1-7]。在一些情況下，在人工養殖場和處于野生狀態的小龍蝦，細菌感染會導致死亡，特別是在不良水體環境條件下的病死率更高[2-3]。

目前，國內針對小龍蝦細菌性疾病的報道較少。病原細菌和所致病害具有多樣性，一種細菌可引起多種甲殼動物的疾病，一種疾病也可由多種細菌引起，如腸道細菌性感染有5屬細菌引起，細菌性甲殼病和淡水螯蝦菌血癥分別由3屬細菌引起[6]。假單胞細菌（Pseudomonas sp.）可引起腸道細菌性感染和細菌性甲殼病。小龍蝦菌血癥（Bacteraemia）表現為血管周圍的淋巴血管細胞聚合、形成結節[3,7-9]。事實上，任何一種小龍蝦病害都不是由單一因素引起的，它與水環境中的多因素有關，故養殖水體是一個復合體。

長期以來，小龍蝦的細菌性疾病被認為是小龍蝦的次要病害，或者是與養殖環境惡化有關的一類病害，導致人們出現這種看法的主要原因，可能是因為大多數病原菌都是屬于堿性寄生細菌的緣故。當養殖池塘環境惡化時，細菌致病力就可能發生變化而導致小龍蝦發生各種細菌性疾病。

1 細菌疾病的種類

1.1 腸道細菌性感染

由多種細菌組成小龍蝦腸道內的正常微生物菌群，主要有枸櫞酸桿菌屬（Citrobacter）、假單胞菌屬（Pseudomonas）、不動桿菌屬（Acinetobacter）、腸桿菌屬（Enterobacter）和產堿桿菌屬（Alcaligenes）的細菌。當小龍蝦受到外界比較強烈的應激性刺激，或者受到環境中某種強毒菌株侵染，就有可能導致其腸道內正常微生物菌群結構發生改變，部分細菌可能會在胃、腸道，甚至肝胰腺中異常增殖，導致腸上皮組織壞死，大部分肝胰腺組織也可能因此而受到損傷[6，10]。

1.2 甲殼病

小龍蝦甲殼病與細菌和真菌有關。當外骨骼被侵蝕時可致小龍蝦死亡。該病害由氣單胞菌屬（Aeromonas）、假單胞菌屬（Pseudomonas）、黏細菌（Myxobacteria）、枸櫞酸桿菌屬（Citrobacter）的細菌引起[6,10]。

1.3 爛鰓病

小龍蝦鰓表面通常會附著絲狀藻類或者革蘭陰性菌，還可能存在一些原生生物，在正常情況下，鰓上附著這些微生物不會導致嚴重后果。但是，小龍蝦爛鰓病的發生通常與養殖環境水質惡化有關，如果不采取適當措施控制養殖水質，細菌就會在鰓部大量增殖而導致鰓組織腐爛，直接影響鰓組織對水過濾和對氧氣吸收功能，進而導致小龍蝦機體缺氧而窒息死亡。

1.4 菌血癥

在小龍蝦的血淋巴中可以檢查到大量弧菌屬（Vibrio）、氣單胞菌屬（Aeromonas）和假單胞菌屬（Pseudomonas）的細菌，但是，現在還難以肯定在小龍蝦血淋巴中觀察到細菌是否意味著就是病原菌，因為小龍蝦是并沒有顯示出任何生病癥狀。小龍蝦菌血癥的臨床癥狀只有在瀕臨死亡的小龍蝦中才能觀察到，主要表現為患病小龍蝦意識喪失，并呈現麻痹狀態。其實，即使最有經驗的技術人員也難以描述小龍蝦“菌血癥”的初期臨床癥狀，判斷這種疾病還需要依靠患病小龍蝦病程的進一步發展[6]。

2 不同細菌引起的病害

2.1 螯蝦立克次體（Coxiella cheraxi）

感染小龍蝦的類立克次體有兩種類型：第一種類型立克次體在小龍蝦體內全身分布，屬于系統感染，這類立克次體被命名為螯蝦立克次體（Coxiella cheraxi），除了感染小龍蝦外，也與澳洲淡水龍蝦（Cherax quadricarinatus）的大量死亡相關的。第二種類型立克次體僅感染小龍蝦肝胰腺上皮，在其他的淡水螯蝦中尚未發現[6]。

2.2 螺原體（Spiroplasma）

螺原體是小的、螺旋形細菌，與節肢動物，蜱蟲和植物有關，至今已描述40種[13]。螺原體（Spiroplasma spp.）作為雄性昆蟲上的微生物，能干擾一些昆蟲種群的性別比[14-15]。至今，沒有提供證據證明，螺原體能干擾小龍蝦的性別比例的實例。在被侵染的小龍蝦（P.clarkii）上，螺原體是小龍蝦衰弱病的病原；也能引起中華絨螯蟹（Eriocheir sinensis）的顫抖?。╰remor disease）。但無法證明淡水蟹把螺原體傳播給小龍蝦[16]。Bi K等[17]通過分子測序證明，中華絨螯蟹、小龍蝦、南美白對蝦上螺原體是同一個種，與非凡螺原體（Spiroplasma mirum）有關。在對照傳播試驗中，細菌連續出現在血淋巴，性腺結締組織，腸肝胰腺，神經，心臟和腮中[18]；土霉素對小龍蝦中的螺原體也有效[19]。

通過16 s rDNA序列分析證明了引起小龍蝦患病是螺原體，合成的171 bp PCR產物與中華絨螯蟹螺原體有99%一致，這表明它們之間有很近的血緣關系。

2.3 弧菌屬（Vibrio）

引起小龍蝦死亡的弧菌（Vibrio spp.）有2種。最小弧菌（Vibrio mimicus）是引起小龍蝦死亡的主要病原[20]，而霍亂弧菌（Vibrio cholerae）對小龍蝦的致病力弱，病死率低。該病害是系統性侵染，存在于血淋巴中，生病小龍蝦除了嗜睡外，沒有特殊外部的癥狀[20-21]。特別是在小龍蝦養殖過程中，最小弧菌的一些日博型（ribotypes）菌株經常被分離到，它們都可能是小龍蝦的病原菌[21-22]。陳昌福等[6]從患暴發病的小龍蝦的肝胰腺中分離到具有高致病力的副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus），通過對養殖現場的調查證明，這種嗜鹽性弧菌（=副溶血弧菌）可能是由于養殖業者采用海水小雜魚喂養小龍蝦時帶入的；弧菌和其他桿菌的感染也能引起爛鰓病[6]。此外，人們如果攝食被弧菌侵染的未煮熟小龍蝦能導致人類的腸胃炎[21]。

小龍蝦感染弧菌引起病害癥狀表現為全身無力、趴邊、離岸死亡，發病嚴重時可導致整個池塘龍蝦全部死亡。發病期從4月底開始。

2.4 氣單胞菌屬（Aeromonas）

在小龍蝦養殖環境中，嗜水氣單胞菌（Aeromonas hydrophila）無處不在，它也與魚類和甲殼類動物的病害有關，偶爾引起人類疾病[23]。該細菌可從健康小龍蝦上分離到，被認為是潛在的病原菌[24]。Jiravanichpaisal P等[25]從瑞典生病信號小龍蝦（Pasifastacus leniusculus）上分離到嗜水氣單胞菌和其他的細菌。隨后用肉湯培養細菌，在不同的溫度下，把細菌接種到該地小龍蝦上后，分離到了細菌的細胞外產物；而其他一些細菌不是引起小龍蝦病害的病原菌，但大多數小龍蝦死亡與嗜水氣單胞菌有關[9]。在22℃的條件下，用嗜水氣單胞菌注射小龍蝦，6小時開始死亡。被感染的小龍蝦組織出現壞死斑，血液鼻竇內血細胞聚集。氣單胞菌（Aeromonas caviae）引起出血病、爛眼癥、甲殼潰爛病[10]，嗜水氣單胞菌感染也能引起腸炎和水腫病、爛尾病和偷死癥[6,26]。

大多數小龍蝦細菌性病原都是兼性寄生菌，引起的病害種類多、流行時間長、危害大，具有再次侵染。目前國內關于小龍蝦細菌性疾病的報道相對較少，研究也不夠深入，缺乏細菌感染小龍蝦的致病機理、機體組織病理變化、機體免疫學等研究資料。

細菌性疾病的治療方法與其他水產養殖動物的細菌性病害相同，應正確選用抗生素藥物，對癥治療，中草藥飼料可有效預防小龍蝦細菌病的發生。