探究膠體金免疫層析技術在食品安全檢測中的應用

□ 鄭 韻 李建美 重慶輕工職業學院食品藥品系

1 膠體金免疫層析技術概述

膠體金免疫層析技術是一種有效結合膠體金標記、免疫檢測和層析分析等技術為一體的免疫檢測固相標記技術，在20世紀80年代得到發展。膠體金免疫層析技術作為一種應用形式，是利用抗原抗體反應和免疫金標記技術的相互結合，它是以條帶狀在膜上固定特異性的抗體或抗原，使在層析條上的樣品溶液依靠毛細作用產生泳動，使樣品中的待測物和待測物在層析材料上的抗原或抗體等受體發生親和性與特性較高的免疫反應，在層析的過程中材料的檢測帶通過截留或富集免疫復合物，通過直接使用或酶促顯色反應可對著色標記物進行目測，在5～10 min內可直接獲取試驗結果[1]。所以在檢測激素、核酸、蛋白質、藥物、毒素及殺蟲劑等時都對膠體金的成本和交叉反應較低，靈敏、快速等的特征進行了廣泛的應用。

2 膠體金免疫層析技術的特點

2.1 具有較廣的檢測范圍

該技術既可以對食品中的農藥、獸藥殘留及微生物和真菌毒素進行檢測，還可快速診斷動物的疫病，在許多領域得到廣泛的應用。

2.2 操作過程相對簡單

該技術操作比較簡單，不涉及大型的設備儀器，只用簡單地對檢測樣品進行處理，便可直接觀察到檢測結果，不用具備較強的專業知識也可操作。

2.3 具有較高的檢測靈敏度

該技術大部分使用單克隆抗體進行標記，只對抗原決定簇有親和性和特異性，靈敏度較高，當前市面上的檢測膠體金的卡已經達到1.0 ng/mL的靈敏度。

2.4 便于現場攜帶

使用膠體金對蛋白進行標記在物理上是一種吸附過程，基本上不會對蛋白質的活性造成破壞，因此膠體金試紙條具有良好的穩定性。另外，膠體金檢測卡質量和體積都較小，在現場便于攜帶和檢測。

2.5 可以安全的使用

相比于酶的標記、放射性同位素和熒光素等技術，環保膠體金技術所用的試劑有較低的毒性，不會傷害操作者和對環境造成污染，具有其他檢測技術無可比擬的安全性能。

3 膠體金免疫層析技術在食品安全檢測中的應用

3.1 在食品有害微生物中的檢測

食品安全質量不過關，主要是由于食品中有害微生物出現超標的情況，食品中常見的致病菌主要包括布氏桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌和金黃色葡萄球菌等。在檢測食品中的致病微生物時，最常使用的方法是生物鑒定分離法，但這種方法操作過程繁雜，其靈敏度和特異性也相對較差，并且在提前預防和實時監測中也只發揮有限的作用。膠體金免疫層析技術可以解決這些問題，達到快速檢測食品中的致病微生物的目的。

3.2 食品中生物毒素、農藥獸藥殘留物的檢測

許多食品中都含有農藥、生物毒素等威脅人類健康的殘留，食品中的獸藥和農藥等殘留物通常屬于半抗原體的一種小分子物質，在制備抗體中的人工抗原時需要偶聯其和大分子蛋白。如作為黃曲霉菌和寄生曲霉菌二次代謝的產物，黃曲霉毒素B1是一種致癌物，具有非常強的毒性，其理化性質比較穩定，會嚴重污染食品，在較大程度上威脅人體健康。相關專家在2005年在檢測食品中黃曲霉毒素B1時就是采用的競爭免疫層析技術，把抗AFB1單克隆抗體當作金標抗體，檢測帶和質控帶分別為黃曲霉毒素B1-牛血清蛋白和羊抗鼠IgG，最終獲得試紙條[2]。

3.3 食品中違禁藥物的檢測

部分食品經營者為了獲得最大的利益，不顧國家相關法律法規，為了達到成功吸引食用者購買的目的，在湯料、調料等食品中加入一些違禁藥物（如罌粟殼等），極大地危害了食用者的身體健康。罌粟殼的成分主要包括罌粟堿、嗎啡、可卡因等，在判斷食品中是否有罌粟殼等時，可以通過對罌粟堿、嗎啡等含量的檢測確定。組成罌粟殼的成分大多屬于一種小分子物質，所以可采取類似于農藥的檢測方法進行檢測。制備膠體金時采用檸檬酸三鈉還原法，并對使用膠體金標記方法對牛肉和豬肉中進行檢測時其中的磺胺二甲嘧啶檢測上限控制為20 μg/kg，在對牛奶和豬肉樣品進行檢測時有效的運用該方法和高效液相色譜法，在試條檢測范圍內可獲得和HPLC相一致的結果，在10 min內便可完成這一檢測。

4 結語

免疫膠體金技術作為一種新型的標記技術，簡單、快速、無污染，具有良好的檢測效果，運用該技術可以快速的檢測食品的衛生和質量安全，為人民群眾的食品安全提供良好的保障。