棗不同品種和果實(shí)不同部位糖積累及相關(guān)酶活性*

李 潔 姚寶花 宋宇琴 李六林

(1.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院 太谷 030801； 2. 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院 太谷 030801)

棗(Ziziphusjujuba)是我國(guó)特有的優(yōu)勢(shì)果樹樹種之一(袁晶晶等， 2017)，抗旱耐瘠薄，經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益顯著，在我國(guó)廣泛種植(王為為， 2013；蒲小秋，2017)。中國(guó)有棗品種 700 多個(gè)(趙愛玲等， 2016)，主要集中在新疆、河北、河南、山西、山東等省區(qū)(黃麗萍等， 2017)。棗果實(shí)營(yíng)養(yǎng)豐富，含糖量高，成熟鮮棗果實(shí)中含糖量高達(dá) 25%～30%，干棗糖量可達(dá) 60%～70%(Lietal.， 2007)，是傳統(tǒng)的藥食同源的果品(王為為， 2013)。

果實(shí)內(nèi)積累的糖分主要有蔗糖、果糖、葡萄糖等(Xietal.， 2014;Huangetal.， 2017)。蔗糖合成酶(SS)、磷酸蔗糖合成酶(SPS)和蔗糖轉(zhuǎn)化酶(酸性轉(zhuǎn)化酶AI;中性轉(zhuǎn)化酶NI)在糖代謝中發(fā)揮著重要作用，而且不同種類的酶對(duì)果實(shí)糖積累的影響不同，不同種類果實(shí)中蔗糖代謝酶在糖積累中的作用也存在差異(Xieetal.， 2009; 趙建華等， 2016; 張鶴華等， 2017; 劉麗琴等， 2015; 陳秀萍等， 2015)。章英才等(2014; 2016)研究了4個(gè)類型靈武長(zhǎng)棗(Z.jujuba‘Lingwuchangzao’)果實(shí)糖積累的差異，認(rèn)為不同類型靈武長(zhǎng)棗果實(shí)糖積累類型均為糖直接積累型，其蔗糖代謝相關(guān)酶活性變化各有不同; 景紅霞等(2014)研究發(fā)現(xiàn)，蔗糖合成酶分解方向酶活性對(duì)靈武長(zhǎng)棗葉片和果柄蔗糖的積累起主要的調(diào)控作用。王晶晶等(2016)研究發(fā)現(xiàn)，在駿棗(Z.jujuba‘Junzao’)果實(shí)的生長(zhǎng)發(fā)育過程中，前期轉(zhuǎn)化酶的活性較高，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理可以顯著提高其活性； 李湘鈺(2015)發(fā)現(xiàn)駿棗果實(shí)蔗糖代謝和積累由SS、SPS、AI和NI共同調(diào)控，NI和AI活性的降低相當(dāng)于是駿棗果實(shí)中可溶性總糖開始積累的一個(gè)信號(hào)。目前關(guān)于棗果實(shí)中糖代謝的研究報(bào)道僅限于個(gè)別品種，關(guān)于棗果實(shí)糖分積累的機(jī)制尚不清楚，本研究以3個(gè)棗品種為材料，研究果實(shí)發(fā)育過程中果肩和果頂2個(gè)部位各種糖含量及糖代謝相關(guān)酶活性的動(dòng)態(tài)變化，以進(jìn)一步揭示棗果實(shí)的糖積累變化規(guī)律和不同棗品種間果實(shí)糖積累差異的生理原因，為進(jìn)一步完善棗果實(shí)糖分積累理論提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料為不同的3個(gè)棗品種成熟期棗果實(shí)，早熟品種壺瓶棗(Ziziphusjujuba‘Hupingzao’)，晚熟品種婆婆棗(Z.jujuba‘Popozao’)和婆棗(Z.jujuba‘Pozao’)，均采自山西省農(nóng)科院果樹研究所棗種質(zhì)資源圃。樣本樹為嫁接繁殖正常生長(zhǎng)結(jié)果的成齡樹，樹齡55年，株行距為7 m×8 m，每個(gè)品種選擇樹勢(shì)基本一致的植株做標(biāo)記，每3株為一小區(qū)，每小區(qū)各重復(fù)3次，試驗(yàn)地進(jìn)行常規(guī)管理。自7月12日開始，每隔14天采樣1次，從8月9日開始至果實(shí)成熟期間，每隔7天采樣1次，至果實(shí)成熟，壺瓶棗成熟期早，共采樣8次，婆棗、婆婆棗共采樣10次，每次從樹體不同方向和部位采集棗果實(shí)，每個(gè)小區(qū)各采50個(gè)。所采樣品一部分保存于-40 ℃冰箱，用于酶活性測(cè)定； 另一部分隨即進(jìn)行果實(shí)縱、橫徑及鮮果質(zhì)量測(cè)定，之后將各品種果實(shí)果肩與果頂分開切成薄片，烘干，粉碎，用于糖含量測(cè)定。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 可溶性糖提取及測(cè)定 樣品處理:稱取1 g烘干粉碎的棗果實(shí)樣品(果肩與果頂分開)，用10 mL 50%乙腈溶解，50 ℃條件下超聲提取20 min，5 000 g離心20 min，取上清液，重復(fù)提取1次，合并上清液，定容至25 mL，過濾。取5 mL濾液，依次過預(yù)活化好的固相萃取小柱和0.22 μm濾膜。

糖含量測(cè)定:采用高效液相色譜法(HPLC)，具體方法參照帥良等(2016)、毛智慧等(2011)的方法。色譜柱： Waters ACQUITY UPLC TM Carbohydrate糖分析柱(4.6 mm×250 mm，4 μm)； 固相萃取柱為AgelaCleanert S C18 SPE固相萃取小柱[500 mg·(6 mL)-1]；柱溫65 ℃，流動(dòng)相為78%乙腈，流速為0.2 mL·min-1， 進(jìn)樣量5 μL。檢測(cè)器為ELSD； 漂移管溫度為80 ℃； 載氣： 氮?dú)猓?增益： 500； 氣體壓力： 500 psi； 檢測(cè)池溫度80 ℃； 霧化室溫度35 ℃；噴霧器模式： 冷卻。所有樣品在8 min內(nèi)出峰完畢。

1.2.2 淀粉含量測(cè)定 采用高氯酸法提取淀粉，用蒽酮比色法測(cè)定淀粉含量(Miaoetal.， 2017)。

1.2.3 酶活性測(cè)定 將棗果實(shí)果肩與果頂分開，分別取1.0 g，用液氮研磨5～10 min，加入預(yù)冷的提取緩沖液冰浴下勻漿3～5 min，12 000 r·min-1離心20 min，收集上清即為酶提取液。提取緩沖液包含pH7.5的50 mmol·L-1Hepes，10 mmol·L-1MgCl2，1 mmol·L-1EDTA，0.05% TritonX-100，2.5 mmol·L-1DTT，0.1%BSA和2%PVPP。酶活性測(cè)定步驟參考Yang等(2013)和Almansa(2016)。

1.3 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)相關(guān)性和方差分析采用SAS 9.1軟件進(jìn)行分析，用Origin 9.0軟件制圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種棗果實(shí)發(fā)育過程中糖積累

2.1.1 不同品種棗果實(shí)糖積累動(dòng)態(tài)分析 從圖1可以看出，隨著棗果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育，3個(gè)品種果實(shí)可溶性糖組分比例變化趨勢(shì)明顯。果實(shí)發(fā)育前期，3個(gè)品種果肩與果頂部位都主要積累果糖和葡萄糖，蔗糖所占比例很低； 隨著果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育，各種可溶性糖含量均升高，但果糖和葡萄糖所占比例均逐漸降低，蔗糖比例明顯上升，壺瓶棗升幅最大。

3個(gè)品種棗果實(shí)的果糖與葡萄糖含量及變化趨勢(shì)均相近，尤其是果肩部位，且葡萄糖含量始終略低于果糖。壺瓶棗果肩部位7月27日以后蔗糖含量迅速增加，而果頂部位在8月16日才開始快速積累蔗糖。至采前1周，其果肩部位果糖、葡萄糖、蔗糖含量均高于果頂，采收時(shí)果頂部位蔗糖含量達(dá)最大值121.29 mg·g-1FW，是果糖與葡萄糖含量的3～4倍，表現(xiàn)為典型的蔗糖積累型果實(shí)； 婆婆棗果肩部位蔗糖含量從8月23日后逐漸大幅上升，果頂部位于9月8日后蔗糖含量才迅速增加，最高值達(dá)143.90 mg·g-1FW。在果實(shí)采收時(shí)，蔗糖含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于果糖或葡萄糖，3種糖含量比值約為2∶1∶1，為蔗糖積累型果實(shí)。婆棗果實(shí)果肩與果頂各種可溶性糖含量都較低，且變化幅度不大，其糖分積累主要發(fā)生在9月8日以后，至果實(shí)采收期，果肩蔗糖、果糖和葡萄糖達(dá)其最大值，分別為79.01、75.30、62.60 mg·g-1FW，為己糖積累型果實(shí)，在整個(gè)果實(shí)發(fā)育階段，果肩部位各糖含量明顯高于果頂。

2.1.2 不同品種棗果實(shí)可溶性總糖含量變化 從表1可以看出，3個(gè)品種棗果實(shí)中可溶性總糖的含量均隨著果實(shí)發(fā)育逐漸升高，壺瓶棗果實(shí)從發(fā)育初期至采收，其可溶性總糖含量一直高于婆棗和婆婆棗。在早熟品種壺瓶棗采收后，婆婆棗和婆棗含糖量繼續(xù)升高并最終超過壺瓶棗。8月30日之前，婆婆棗和婆棗果實(shí)總糖含量相近，之后，婆婆棗總糖含量開始明顯高于婆棗。采收時(shí)對(duì)3個(gè)品種棗果實(shí)可溶性總糖含量做方差分析可知，婆婆棗果實(shí)可溶性總糖含量極顯著高于壺瓶棗和婆棗(P<0.01)，而婆棗和壺瓶棗之間沒有顯著性差異。對(duì)3個(gè)棗品種果肩與果頂部位可溶性總糖含量做方差分析，發(fā)現(xiàn)除了壺瓶棗果實(shí)發(fā)育初期果肩與果頂差異不顯著外，在果實(shí)采前1周左右，3個(gè)品種果肩部位可溶性總糖含量均顯著或極顯著高于果頂部位，采收時(shí)果肩仍高于果頂，但未達(dá)顯著水平。

圖1 不同品種棗果實(shí)發(fā)育過程中可溶性糖比例變化Fig.1 Changes of soluble sugars ratio in jujube during fruits development

mg·g-1FW

①可溶性總糖=果糖+蔗糖+葡萄糖；不同小寫字母表示差異顯著(P< 0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。Total soluble sugar =fructose + sucrose + glucose. Different lowercase letters indicate significant difference atP< 0.05, different capital letters indicate extremely significant difference atP< 0.01.

2.1.3 不同棗品種果實(shí)淀粉含量變化 從圖2可知，在果實(shí)整個(gè)發(fā)育過程中，3個(gè)品種棗果實(shí)中淀粉含量都較低，且果肩部位淀粉含量均低于果頂部位。壺瓶棗果實(shí)淀粉含量最低，前期降幅較明顯，之后隨著果實(shí)的發(fā)育逐漸趨于穩(wěn)定，在1.90 mg·g-1FW(果肩)； 婆棗、婆婆棗果實(shí)發(fā)育早期淀粉含量變化相近且值最高，分別為6.78、6.30 mg·g-1FW(果頂)，婆棗隨著果實(shí)發(fā)育淀粉含量基本呈下降趨勢(shì)，最低值為2.74 mg·g-1FW； 婆婆棗果肩與果頂部位淀粉含量在發(fā)育后期變化趨勢(shì)不同，采收時(shí)果肩部位降至最低值2.05 mg·g-1FW(果肩)，這與婆婆棗果實(shí)發(fā)育后期可溶性糖含量在3個(gè)品種中最高的結(jié)果相反。但3個(gè)品種果實(shí)可溶性總糖與淀粉含量之間無顯著相關(guān)性。

圖2 不同棗品種果實(shí)發(fā)育過程中淀粉含量變化Fig.2 Changes of starch content during fruit development in different jujube cultivarsA： 果肩； B： 果頂。A: Fruit shoulder; B:Fruit top. 下同。The same below.

2.2 不同品種棗果實(shí)發(fā)育過程中糖代謝酶活性變化

2.2.1 蔗糖合成酶活性的變化 蔗糖合成酶具有合成(SSs)和分解(SSd)蔗糖的雙重作用。由圖3可知，3個(gè)品種的SSs活性在8月10日之前總體較低，此后以不同幅度上升，壺瓶棗、婆婆棗、婆棗SSs活性分別在8月16日、8月30日、9月初依次達(dá)到第1個(gè)高峰，這與3個(gè)棗品種開始迅速積累蔗糖的順序一致。之后壺瓶棗呈不規(guī)則的“W”變化趨勢(shì)，在成熟前SSs活性達(dá)最高值； 婆婆棗果實(shí)SSs活性在達(dá)到高峰之后開始下降，果肩部位降幅較大，而果頂部位變化平緩； 婆棗果實(shí)果肩與果頂部位SSs活性在整個(gè)果實(shí)發(fā)育階段始終最低。經(jīng)方差分析可知，婆婆棗和壺瓶棗的SSs活性分別極顯著(P<0.01)和顯著(P<0.05)高于婆棗，而婆婆棗和壺瓶棗果實(shí)間的差異未達(dá)到顯著水平(P>0.05)，這與婆婆棗和壺瓶棗蔗糖含量高于婆棗的結(jié)果相一致。在果實(shí)發(fā)育期，3個(gè)品種果肩與果頂部位SSs活性均較低，且變化趨勢(shì)相近，品種間沒有顯著差異(P>0.05)。婆棗自9月20日后SSd活性升幅比較明顯，果肩部位SSd活性也高于果頂，這與婆棗為己糖積累型果實(shí)相對(duì)應(yīng)； 婆婆棗果頂部位SSd活性在后期升高后又降低，與其果糖和葡萄糖含量變化趨勢(shì)一致。3個(gè)品種的SSs活性明顯大于SSd活性，所以棗果實(shí)中蔗糖合成酶活性以合成方向?yàn)橹鳎珜?duì)婆棗來說，SSd與其果糖和葡萄糖積累顯著相關(guān)，對(duì)其果肩、果頂糖含量差異的影響較大。

2.2.2 轉(zhuǎn)化酶活性的變化 轉(zhuǎn)化酶催化蔗糖分解為果糖和葡萄糖，根據(jù)其最適pH值不同可分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)(姚寶花， 2014)。由圖3可知，3個(gè)品種果肩與果頂部位AI和NI活性變化規(guī)律相似。壺瓶棗果實(shí)AI活性在8月10日之前降幅較大，在3個(gè)品種中值最低，與此時(shí)其蔗糖含量最低相對(duì)應(yīng)； 婆婆棗和婆棗果實(shí)AI活性在7月27日最高，分別達(dá)72.12、52.70 mg·h-1g-1FW。婆棗在8月23日降至最低值后又回升，婆婆棗則降至8月30日后，AI活性才有所回升。在7月27日之前，壺瓶棗果實(shí)中NI活性較高，是婆棗與婆婆棗果實(shí)的1.4～1.8倍，之后NI活性緩慢下降，至采收時(shí)降至約10 mg· h-1g-1FW。而婆棗和婆婆棗果實(shí)NI活性呈波動(dòng)變化。此外，NI活性在果實(shí)整個(gè)發(fā)育期始終低于AI。可見，棗果實(shí)發(fā)育前期，較高活性的AI可以將蔗糖迅速地轉(zhuǎn)化為果糖和葡萄糖，使得此時(shí)棗果實(shí)中蔗糖含量較低，隨著該酶活性的逐漸下降，果實(shí)蔗糖含量逐漸上升。對(duì)3個(gè)棗品種果實(shí)果肩部位與果頂部位之間的AI和NI活性進(jìn)行方差分析可知，3個(gè)棗品種果實(shí)之間這2種酶活性均無顯著差異(P>0.05)。

圖3 不同棗品種果實(shí)發(fā)育過程中糖代謝相關(guān)酶活性的變化Fig.3 Changes of sucrose metabolizing enzymes activity in different jujube cultivars

2.2.3 蔗糖磷酸合酶活性(SPS)的變化 SPS催化尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)和6-磷酸果糖不可逆地合成蔗糖。由圖3可知，在3個(gè)品種棗果實(shí)發(fā)育早期，SPS活性均很低且變幅不大，隨著果實(shí)的發(fā)育，其呈波動(dòng)式上升趨勢(shì)，至果實(shí)采收時(shí)達(dá)最大值。壺瓶棗和婆婆棗SPS活性的變化趨勢(shì)相近，在8月10日之后SPS活性快速上升，到采收期達(dá)到最大值； 婆婆棗SPS活性在壺瓶棗采收后繼續(xù)上升并超過壺瓶棗； 而婆棗果肩與果頂部位SPS活性的變幅均低于壺瓶棗和婆婆棗，這與3個(gè)品種棗果實(shí)中蔗糖含量的差異和變化趨勢(shì)一致，反映出SPS在3個(gè)品種棗果實(shí)蔗糖合成中起著關(guān)鍵調(diào)控作用。對(duì)3個(gè)棗品種果肩與果頂部位SPS活性做方差分析可知，婆婆棗和壺瓶棗果實(shí)兩部位SPS活性差異并未達(dá)顯著水平(P>0.05)； 而婆棗果實(shí)在8月30日后，果肩SPS活性顯著高于果頂，與此階段果肩蔗糖含量明顯高于果頂相對(duì)應(yīng)。對(duì)品種間SPS活性做方差分析則表明，婆婆棗與壺瓶棗果實(shí)SPS活性分別極顯著(P<0.01)、顯著(P<0.05)高于婆棗。

2.2.4 淀粉酶活性的變化 淀粉酶可以水解淀粉。由圖4可知，3個(gè)品種棗果實(shí)的淀粉酶活性隨著果實(shí)的發(fā)育逐漸升至最高后再呈波動(dòng)狀變化趨勢(shì)。壺瓶棗果肩與果頂果實(shí)淀粉酶活性分別在8月23日、8月6日達(dá)到最高值，為77.14和71.82 mg·g-1FW h-1，在3個(gè)品種中峰值最高； 婆棗在9月14日達(dá)最高值，婆婆棗淀粉酶活性變化趨勢(shì)最復(fù)雜。結(jié)合圖2可知，在棗果實(shí)發(fā)育的整個(gè)階段，果實(shí)淀粉酶活性的變化趨勢(shì)基本與其淀粉含量的變化相反，可見，淀粉酶在3個(gè)品種棗果實(shí)的淀粉積累過程中起著重要調(diào)控作用。

圖4 不同棗品種果實(shí)中淀粉酶活性變化Fig.4 Changes of amylase activity in different jujube cultivars

2.2.5 棗果實(shí)發(fā)育過程中糖積累與相關(guān)酶活性的關(guān)系 蔗糖代謝酶凈酶活性為蔗糖合成酶類(SSs+SPS)與蔗糖分解酶類(SSd+NI+AI)活性之差，是反映蔗糖代謝酶綜合作用的重要指標(biāo)(景洪霞等， 2014)。由表2和表3可知，壺瓶棗果肩部位糖積累與SPS、SSs、SC、NI顯著相關(guān)，果頂部位糖積累與SPS、SSs、 SC顯著相關(guān)，所以壺瓶棗果實(shí)糖積累過程受多種蔗糖代謝酶的綜合調(diào)控。婆婆棗果肩部位糖積累與SPS活性極顯著正相關(guān)，果頂部位糖積累與SPS、SSd活性顯著相關(guān)，結(jié)合圖1和圖3可以得出，婆婆棗果實(shí)糖積累主要受SPS調(diào)控。婆棗為己糖積累型果實(shí)，其果肩糖含量與SPS和SSd活性顯著正相關(guān)，果頂糖含量與SPS活性顯著正相關(guān)，結(jié)合圖4可知婆棗果肩與果頂部位SPS活性均最低且變幅不大，故SSd對(duì)婆棗果實(shí)發(fā)育過程中糖分積累起主要調(diào)控作用。SPS是調(diào)控3個(gè)品種果肩與果頂糖積累的共同的關(guān)鍵酶。

表2 不同棗品種果肩部位糖積累與相關(guān)代謝酶活性的相關(guān)性①Tab.2 Relation between sugar accumulation and activities of sucrose metabolizing enzymes in shoulder of jujube fruit mg·g-1FW

①*和**分別表示P<0.05和P<0.01顯著性水平：凈酶活性=(SSs + SPS)-( SSd +AI+NI)。下同。*and**stand for significant level at 0.05 and 0.01. Net enzyme activity = (SSs +SPS)- (SSd +AI+NI). The same below.

表3 不同棗品種果頂部位糖積累與相關(guān)代謝酶活性的相關(guān)性Tab.3 Relation between sugar accumulation and activities of sucrose metabolizing enzymes in top of jujube fruit mg·g-1FW

3 討論

3.1 棗果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育過程中的糖積累

本研究發(fā)現(xiàn)，3個(gè)品種的棗果實(shí)在第1次快速生長(zhǎng)期蔗糖積累量均很低，這與新疆梨(Pyrussinkiangensis)(李芳芳等， 2014)和蘋果(Maluspumila)(Zhangetal.， 2010)的研究結(jié)果基本一致。在棗果實(shí)發(fā)育中后期，3個(gè)品種均有一個(gè)明顯的蔗糖積累的轉(zhuǎn)折點(diǎn)(壺瓶棗為8月16日，婆棗和婆婆棗為9月8日)，這與嘉平大棗(Ziziphusjujuba‘Jiaping’)中硬核前果實(shí)中只含單糖，硬核后出現(xiàn)雙糖(甘霖等， 2000)的結(jié)論相似。此外，3個(gè)棗品種果實(shí)開始蔗糖積累時(shí)間為壺瓶棗最早，其次為婆婆棗，然后是婆棗，在壺瓶棗采收前其蔗糖含量的高低順序也如此，故推斷棗果實(shí)中蔗糖含量的高低與開始啟動(dòng)蔗糖積累的時(shí)間有一定關(guān)系。根據(jù)陳俊偉等(2004)對(duì)果實(shí)糖積累類型的劃分，棗果實(shí)屬于糖直接積累型，即碳水化合物輸入果實(shí)后，僅少量以淀粉的形式積累，大部分的糖分以可溶性糖的形式貯存于果實(shí)中。然而果實(shí)中各糖組分比例的差異較大，一些果實(shí)中還原糖積累量多于蔗糖，另一些則以蔗糖積累為主，故又將糖直接積累型果實(shí)分為蔗糖積累型、中間類型和還原糖積累型3類(陳俊偉等， 2004)。本研究表明，壺瓶棗和婆婆棗果實(shí)成熟時(shí)以積累蔗糖為主，其糖分積累形式與靈武長(zhǎng)棗相似(章英才等， 2016)，也與趙愛玲等(2016)對(duì)棗果實(shí)糖酸組分的研究結(jié)論一致。而婆棗果實(shí)成熟時(shí)則以積累果糖和葡萄糖為主。

無論是蔗糖積累型品種還是還原糖積累型品種，棗果實(shí)發(fā)育初期均以積累還原糖為主，這可能是由于棗果實(shí)在發(fā)育早期，細(xì)胞活動(dòng)旺盛，從源葉輸入果實(shí)中的蔗糖被高活性的轉(zhuǎn)化酶分解為葡萄糖和果糖，為果實(shí)的迅速增長(zhǎng)提供能源物質(zhì)。在棗果實(shí)整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育期間，葡萄糖和果糖含量變化趨勢(shì)基本一致，但果糖含量始終高于葡萄糖，這可能是由于較多的葡萄糖作為呼吸作用的底物被代謝消耗(吳國(guó)良， 2004)。在整個(gè)棗果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育期間，3個(gè)棗品種果實(shí)的果肩與果頂2個(gè)部位存在糖濃度差異，成熟時(shí)果肩部蔗糖含量大于果頂部，這可能與果實(shí)不同部位糖代謝的運(yùn)輸速率和分配存在差異有關(guān)。

3.2 蔗糖代謝相關(guān)酶在棗果實(shí)糖積累中的作用

蔗糖代謝相關(guān)酶對(duì)果實(shí)糖分的積累有重要作用。柑橘(Citrusreticulata)果實(shí)發(fā)育后期蔗糖積累與較低的轉(zhuǎn)化酶水平密切關(guān)系(Jiangetal.， 2014)； 臍橙(Citrussinensis)果實(shí)的SS和SPS是引起臍橙品種間果實(shí)糖含量差異的關(guān)鍵酶(龔榮高， 2006)。此外，段小強(qiáng)(2016)也對(duì)蘋果、梨、香蕉(Musaspp.)、甜瓜(Cucumismelo)、楊梅(Myricarubra)等果實(shí)中蔗糖積累與蔗糖代謝相關(guān)酶的關(guān)系進(jìn)行了深入研究。本研究發(fā)現(xiàn)3個(gè)棗品種果肩與果頂部位在果實(shí)發(fā)育前期AI活性均較高，與蔗糖積累呈極顯著負(fù)相關(guān)，致使棗果實(shí)前期積累蔗糖較少，以積累果糖和葡萄糖為主，其變化與楊梅(謝鳴等， 2005)、核桃(Juglansregia)(吳國(guó)良， 2004)等相類似。3個(gè)棗品種果實(shí)SPS 活性變化趨勢(shì)與其蔗糖含量變化趨勢(shì)相符合，且婆婆棗和壺瓶棗果肩與果頂部位SPS活性均顯著高于婆棗，與婆婆棗和壺瓶棗果實(shí)蔗糖含量顯著高于婆棗蔗糖含量相一致，故由此推斷，SPS是影響3個(gè)棗品種果實(shí)蔗糖積累的共同的關(guān)鍵酶，且不同棗品種果實(shí)內(nèi)的糖分含量的差異可能也由SPS活性的差異引起，SPS作為積累蔗糖的關(guān)鍵合成酶在芒果(Mangiferaindica)(魏長(zhǎng)賓等， 2008)、葡萄(Vitisvinifera)(李夢(mèng)鴿等, 2016)等果實(shí)的研究中都有相似結(jié)論； 壺瓶棗SSs活性高峰期出現(xiàn)最早，婆婆棗SSs活性最高，婆棗SSs活性高峰期出現(xiàn)的最晚，且活性顯著低于壺瓶棗和婆婆棗；在整個(gè)果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育期間，3個(gè)品種的SSd活性均較低且變化不大，品種間沒有顯著差異。棗果實(shí)中蔗糖合成酶以合成方向?yàn)橹鳎嵒菸牡?2016)在杏(Armeniacavulgaris)果實(shí)研究中也得到相似的結(jié)論； 從凈酶活性分析也可看出SPS是3個(gè)品種果肩與果頂糖積累的關(guān)鍵酶。本研究中3個(gè)棗品種果實(shí)淀粉酶活性的變化趨勢(shì)基本與其淀粉含量的變化相反，由此可知淀粉酶在棗果實(shí)淀粉積累過程中起著關(guān)鍵調(diào)控作用。

蔗糖代謝相關(guān)酶對(duì)調(diào)節(jié)棗果實(shí)糖積累有重要的作用。由于葡萄糖、果糖和蔗糖積累與糖代謝相關(guān)酶活性的關(guān)系存在差異，代謝機(jī)制不同。因此，有必要進(jìn)一步分析可溶性糖代謝相關(guān)酶包括其同工酶及其基因的表達(dá)，來分析不同類型棗果實(shí)中糖積累差異的調(diào)控機(jī)制。

4 結(jié)論

3個(gè)棗品種在果實(shí)發(fā)育前期均以積累果糖和葡萄糖為主。壺瓶棗果實(shí)最早開始迅速積累蔗糖，其次是婆婆棗，二者表現(xiàn)為蔗糖積累型果實(shí)； 婆棗糖積累過程發(fā)生最晚，為己糖積累型果實(shí)。除壺瓶棗第1次和3個(gè)品種最后1次 (即采收時(shí))外，3個(gè)棗品種果實(shí)果肩部位可溶性糖含量均顯著高于果頂。婆婆棗果實(shí)可溶性總糖含量極顯著高于壺瓶棗和婆棗，而婆棗和壺瓶棗之間沒有顯著性差異，可見棗果實(shí)的可溶性總糖含量高低與品種的早熟或晚熟無關(guān)。

SPS是影響3個(gè)棗品種果實(shí)蔗糖積累的關(guān)鍵酶，且不同棗品種果實(shí)內(nèi)的糖分含量的差異可能也由SPS活性的差異引起，棗果實(shí)中蔗糖合成酶以合成方向?yàn)橹鳌仄織椆麑?shí)發(fā)育過程中糖積累受蔗糖代謝酶綜合調(diào)控，婆婆棗果實(shí)的糖積累主要受SPS調(diào)控，SSd對(duì)婆棗果實(shí)的糖積累起重要調(diào)控作用。

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