食蟹猴在胚胎學(xué)研究中的應(yīng)用

余子浩　艾曉杰

摘要：食蟹猴生物學(xué)特性與人類相似，是研究胚胎發(fā)育的優(yōu)質(zhì)動(dòng)物模型，用其建立的胚胎模型能較好地類比人胚胎發(fā)育的過程。食蟹猴胚胎學(xué)研究將對人類醫(yī)學(xué)研究的進(jìn)步起到重要的推動(dòng)作用。

關(guān)鍵詞：食蟹猴；胚胎學(xué)

食蟹猴（Macaca fascicularis）為靈長目猴科。其毛色黃、灰、褐不等，常棲息于有紅樹的沼澤地，主產(chǎn)于東南亞諸國。因其生物學(xué)特性與人類相似，是研究胚胎發(fā)育的優(yōu)質(zhì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。同時(shí)，食蟹猴體型較小，性情較溫和，便于人類馴化和實(shí)驗(yàn)操作。

一、食蟹猴生殖細(xì)胞相關(guān)研究

精液保存是雄性食蟹猴胚胎學(xué)研究的首要難題之一。其精子凍融后活力和質(zhì)量是與個(gè)體、冷凍保護(hù)液成分、降升溫速度速度與精液凍前處理等因素密切相關(guān)，但目前在食蟹猴精液冷凍技術(shù)的研究很多還處于經(jīng)驗(yàn)性試驗(yàn)階段，對精液冷凍過程中的精子損傷機(jī)理、試驗(yàn)過程中外部環(huán)境變化對精子的影響、造成不同個(gè)體的冷凍敏感性及遺傳因素對冷凍敏感性差異的機(jī)制等諸多方面尚不完全清楚。而利用計(jì)算機(jī)輔助精液分析技術(shù)對食蟹猴精子質(zhì)量的檢驗(yàn)，并了解其精液的生物學(xué)特性，可以為判定食蟹猴繁殖能力、鑒定精液品質(zhì)提供重要的科研依據(jù)，對食蟹猴繁殖的生產(chǎn)實(shí)踐有著重要的指導(dǎo)意義。

黎宗強(qiáng)、曾素先研究了幾種保存液配方在不同溫度下食蟹猴精子的存活時(shí)間及存活指數(shù)，得出TRIS液添加20%蛋黃是食蟹猴精液低溫（0～5℃）保存液的最優(yōu)配方。盧晟盛，李林等研究了不同甘油濃度和平衡時(shí)間對食蟹猴精液冷凍效果的影響，以建立和優(yōu)化食蟹猴精液冷凍的程序，得出結(jié)論：在食蟹猴精液冷凍中，在改良TTE中加入3%～5%的甘油且平衡30min可以獲得較好效果，精子凍后活率和復(fù)蘇率達(dá)到了45%和62%。黎宗強(qiáng)使用了計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)（CASA）對食蟹猴精液進(jìn)行了分析，以揭示食蟹猴的精液生物學(xué)特性，該研究驗(yàn)證了CASA系統(tǒng)操作簡便、快捷、直觀、實(shí)用、數(shù)據(jù)可靠，較傳統(tǒng)人工檢測方法有良好的相關(guān)性和準(zhǔn)確性。李學(xué)家，張秀娟等通過分別采集性成熟前不同年齡食蟹猴睪丸，制作石蠟染色切片，分析食蟹猴生精細(xì)胞的發(fā)育進(jìn)程，并對食蟹猴精原干細(xì)胞進(jìn)行初步鑒定。此研究詳細(xì)闡述了性成熟前食蟹猴生精細(xì)胞隨年齡增長的漸次性發(fā)育模式，并建立了性成熟前食蟹猴精原干細(xì)胞原位鑒定的一種新方法，為其精原干細(xì)胞的其他相關(guān)研究奠定了基礎(chǔ)。

雌性食蟹猴具有與人相似的月經(jīng)周期，且其食蟹猴胚胎發(fā)育與人類十分類似，且其生殖行為不受季節(jié)限制，食蟹猴胚胎還是研究藥物發(fā)育毒性的理想模型。而食蟹猴胚胎胎仔發(fā)育毒性評(píng)價(jià)模型通常是在懷孕中的的器官形成期給藥，并在懷孕終末解剖進(jìn)行胎仔評(píng)價(jià)，在這期間對受孕猴進(jìn)行血清激素水平的評(píng)價(jià)是評(píng)價(jià)受試物母體毒性的重要指標(biāo)之

袁芳，李比海等通過研究食蟹猴妊娠早期生殖激素的變化，為進(jìn)行食蟹猴胚胎.胎仔發(fā)育毒性試驗(yàn)提供數(shù)據(jù)支持。結(jié)果表明食蟹猴妊娠早期主要生殖激素隨妊娠發(fā)展呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)變化，其中孕酮水平可作為早孕診斷的輔助參考。黎宗強(qiáng)通過用基礎(chǔ)體溫和基礎(chǔ)體重法測定食蟹猴排卵期，為人工養(yǎng)殖食蟹猴提供一套有效的確診雌性食蟹猴排卵期的方法。結(jié)果顯示：雌性食蟹猴黃體期基礎(chǔ)體溫比排卵日的基礎(chǔ)體溫稍高：雌性食蟹猴排卵日體重上升明顯。

二、食蟹猴胚胎細(xì)胞相關(guān)研究

異種核移植是建立治療性克隆非人靈長類動(dòng)物模型和核質(zhì)互作關(guān)系研究動(dòng)物模型的一種方法，可有效避免人類治療性克隆研究中倫理、法律和臨床上的試驗(yàn)限制。而食蟹猴胚胎干細(xì)胞的成功建系還能能為靈長類胚胎干細(xì)胞的研究提供成熟、穩(wěn)定的細(xì)胞來源，對人類胚胎干細(xì)胞研究也具有重要的參考意義。同時(shí)，胚胎干細(xì)胞是一類來源于囊胚階段內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的全能細(xì)胞，具有體外高度增值和自我更新的能力，并可以被定向誘導(dǎo)分化成體內(nèi)各種細(xì)胞類型。因此，食蟹猴胚胎干細(xì)胞具有巨大的醫(yī)學(xué)應(yīng)用價(jià)值與應(yīng)用前景。

學(xué)者對食蟹猴豬異種核移植胚胎細(xì)胞的研究較多。梁明明，權(quán)利等通過探索食蟹猴一豬異種核移植胚胎的發(fā)育能力，為食蟹猴異種核移植胚胎干細(xì)胞的構(gòu)建奠定基礎(chǔ)。指出食蟹猴體細(xì)胞核能夠在豬MII期去核卵母細(xì)胞胞質(zhì)中發(fā)生核重塑，并發(fā)育到8一細(xì)胞階段。許常龍，秦祖興等通過探討Roscovitine同期化供核細(xì)胞對食蟹猴一豬異種體細(xì)胞核移植胚胎體外發(fā)育的影響，為提高靈長類的核移植效率奠定基礎(chǔ)。得出結(jié)論：Roscovitine可有效同期化食蟹猴耳成纖維細(xì)胞在G0/G1期，并最終提高食蟹猴一豬異種核移植重構(gòu)胚胎的囊胚形成率。秦祖興，黃高波等則驗(yàn)證了TSA處理可以提高食蟹猴-豬iSCNT胚胎早期發(fā)育能力。朱宛宛，吳迪等成功建立了食蟹猴胚胎干細(xì)胞系體外培養(yǎng)體系，并誘導(dǎo)其向早期神經(jīng)細(xì)胞分化，為在體移植實(shí)驗(yàn)奠定了基礎(chǔ)。

小結(jié)

綜上所述，食蟹猴在胚胎研究領(lǐng)域是一種非常重要的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，由于其在遺傳學(xué)、解剖學(xué)和生理學(xué)上與人類高度相似性，極大地?cái)U(kuò)展了其在胚胎學(xué)研究中的應(yīng)用范圍。

然而，由于目前國內(nèi)科研條件的制約，食蟹猴在胚胎學(xué)研究中的應(yīng)用并不是十分廣泛，相應(yīng)的科研數(shù)據(jù)也欠全面。隨著我國科學(xué)技術(shù)水平的不斷提高，食蟹猴還能為人類醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究、人類健康和疾病問題的研究和臨床前研究提供理想的模型動(dòng)物，食蟹猴更多動(dòng)物模型的開發(fā)和應(yīng)用也必將對人類醫(yī)學(xué)研究的進(jìn)步起到重要的推動(dòng)作用。